Om de veiligheid en werkzaamheid van IM- en IV-toediening van autologe ADMSC's voor de behandeling van CLI te evalueren

Van vet afgeleide stromale vasculaire fractie (ADSVF) Stromale vasculaire fractie (SVF) verkregen uit tumescente liposuctie. De SVF bevat een verscheidenheid aan cellen zoals pre-adipocyten, endotheelcellen, gladde spiercellen, pericyten, fibroblasten en volwassen stamcellen (ASC's). Daarnaast bevat de SVF ook bloedcellen uit de haarvaten die de vetcellen voeden. Deze omvatten erytrocyten of rode bloedcellen, B- en T-cellen, macrofagen, monocyten, mestcellen, natural killer (NK)-cellen, hematopoëtische stamcellen en endotheliale voorlopercellen, om er maar een paar te noemen. Het bevat ook groeifactoren zoals onder andere transformerende groeifactor beta (TGF-β), van bloedplaatjes afgeleide groeifactor (PDGF) en fibroblastgroeifactor (FGF). Dit komt overeen met de afscheiding van cellen in de aanwezigheid van een extracellulaire matrix. De SVF bevat ook de verschillende eiwitten die aanwezig zijn in de extracellulaire matrix van vetweefsel, waarvan laminine van belang is vanwege het vermogen om te helpen bij neurale regeneratie. De gehele procedure voor SVF-voorbereiding en isolatie van SVF-cellen zal worden uitgevoerd in een cleanroom die voldoet aan de cGMP-richtlijnen.

Zuivere stromale vasculaire fractie voor een bedrag van 99% zal worden geïsoleerd voor deze klinische proef, waarbij andere onnodige cellen zoals RBC en leukocyten worden geëlimineerd.

Van vetweefsel afgeleide mesenchymale stamcellen (ADMSC's) Menselijke mesenchymale stamcellen (MSC's) zijn aanwezig als een zeldzame celpopulatie in vetweefsel dat bijna 30-40% van de cellen met kern uitmaakt, maar ze kunnen snel groeien in kweek zonder hun stamkracht te verliezen. MSC's kunnen in vitro ≥ 2 miljoen keer worden uitgebreid en behouden hun vermogen om te differentiëren in verschillende mesenchymale lijnen. MSC's hebben verschillende kenmerken, zoals isolatiegemak, hoog expansiepotentieel, genetische stabiliteit, reproduceerbare kenmerken van isolaat tot isolaat, reproduceerbare kenmerken, compatibiliteit met principes van tissue engineering, potentieel om herstel in veel vitale weefsels te verbeteren, uniforme dosis en betere kwaliteitscontrole en afgifte criteria.

Naast autoloog gebruik kan MSC ook gebruikt worden voor allogene therapie. Verschillende onderzoeken hebben allo-MSC in vivo gebruikt en de ervaring suggereert dat de allo-MSC's niet worden afgestoten en dat vele positieve effecten hebben op de implantatie. MSC's kunnen worden geïsoleerd uit verschillende weefsels, ex vivo worden gekweekt en vele malen worden geëxpandeerd.18 Gecultiveerde geëxpandeerde MSC's lijken een homogene populatie te vertegenwoordigen volgens flowcytometrische metingen van celoppervlaktemarkers. Deze cellen behouden het vermogen om in vitro differentiatie te ondergaan tot osteogene, adipogene en chondrogene afstammingslijnen, zelfs wanneer ze klonaal zijn geëxpandeerd.19 MSC's afkomstig van menselijk vetweefsel zijn in staat om in vitro te differentiëren tot endotheelcellen en later capillairachtige structuren te vormen in halfvast medium. in vitro en in vivo8 Van MSC's is bekend dat ze aanleiding geven tot het mesoderm van de ledematen (osteoblasten, chondrocyten, adipocyten, stromacellen en skeletmyoblasten) en ze kunnen ook differentiëren tot cellen van het viscerale mesoderm (endotheelcellen).9 MSC's kunnen vasculogenese vergemakkelijken door de niveaus van vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF) te verhogen. Nadat MSC's intramyocardiaal in de infarctzone zijn geïnjecteerd, stijgen de lokale VEGF-niveaus, nemen de vasculaire dichtheid en regionale bloedstroom toe en verbetert de contractiliteit.

MSC's hebben antifibrotische activiteit en kunnen daarom een ​​uitstekende bron zijn om longfibrose aan te pakken en kunnen daarom worden onderzocht op hun therapeutisch potentieel voor de behandeling van idiopathische longfibrose. MSC's vertonen ook membraangebonden en onoplosbare uitgescheiden moleculen die betrokken zijn bij celhechting aan naburige cellen en aan de extracellulaire matrix.18 Deze configuratie van het celoppervlak kan mesenchymale stamcellen in staat stellen om van de bloedbaan naar het mesenchymale weefsel te gaan.