Оценить безопасность и эффективность внутримышечного и внутривенного введения аутологичных ADMSCs для лечения CLI

Стромально-васкулярная фракция, полученная из жировой ткани (ADSVF) Стромально-васкулярная фракция (SVF), полученная в результате тумесцентной липосакции. SVF содержит множество клеток, таких как преадипоциты, эндотелиальные клетки, клетки гладкой мускулатуры, перициты, фибробласты и взрослые стволовые клетки (ASC). Кроме того, СВФ также содержит клетки крови из капилляров, снабжающих жировые клетки. К ним относятся эритроциты или эритроциты, В- и Т-клетки, макрофаги, моноциты, тучные клетки, естественные клетки-киллеры (NK), гемопоэтические стволовые клетки и эндотелиальные клетки-предшественники, и это лишь некоторые из них. Он также содержит факторы роста, такие как трансформирующий фактор роста бета (TGF-β), фактор роста тромбоцитов (PDGF) и фактор роста фибробластов (FGF). Это согласуется с выделениями клеток в присутствии внеклеточного матрикса. SVF также содержит различные белки, присутствующие во внеклеточном матриксе жировой ткани, из которых ламинин представляет интерес из-за его способности помогать в регенерации нервов. Вся процедура подготовки SVF и выделения клеток SVF будет проводиться в чистой комнате с соблюдением cGMP.

Чистая стромально-васкулярная фракция в количестве 99% будет выделена для этого клинического испытания, исключая другие ненужные клетки, такие как эритроциты и лейкоциты.

Мезенхимальные стволовые клетки, полученные из жировой ткани (ADMSC) Мезенхимальные стволовые клетки человека (МСК) присутствуют в виде редкой популяции клеток в жировой ткани, которая составляет почти 30-40% ядерных клеток, но они могут быстро расти в культуре, не теряя своей стволовости. МСК могут размножаться in vitro в ≥ 2 миллионов раз и сохранять свою способность дифференцироваться в несколько мезенхимальных клонов. МСК обладают несколькими характеристиками, такими как простота выделения, высокий потенциал размножения, генетическая стабильность, воспроизводимые признаки от изолята к изоляту, воспроизводимые характеристики, совместимость с принципами тканевой инженерии, потенциал для улучшения восстановления во многих жизненно важных тканях, однородная доза и лучший контроль качества и высвобождение. критерии.

Помимо аутологичного использования МСК также могут быть использованы для аллогенной терапии. В нескольких исследованиях использовались алло-МСК in vivo, и опыт свидетельствует о том, что алло-МСК не отторгаются, и многие из них оказывают положительное влияние на приживление. МСК можно выделять из различных тканей, культивировать ex vivo и размножать многократно.18 Выращенные в культуре МСК представляют собой гомогенную популяцию по результатам проточной цитометрии маркеров клеточной поверхности. Эти клетки сохраняют способность к дифференцировке in vitro в остеогенные, адипогенные и хондрогенные линии даже при клональном размножении.19 МСК, полученные из жировой ткани человека, способны дифференцироваться в эндотелиальные клетки in vitro, а затем образовывать капилляроподобные структуры в полутвердой среде, и предполагается, что потенциал дифференцировки МСК не ограничивается мезодермальными клонами, но также трансдифференцировка МСК в другие клоны, такие как эндотелиальные, может быть реализована в vitro и in vivo8 МСК, как известно, дают начало мезодерме зачатка конечности (остеобласты, хондроциты, адипоциты, клетки стромы и скелетные миобласты), а также могут дифференцироваться в клетки висцеральной мезодермы (эндотелиальные клетки).9 МСК могут способствовать васкулогенезу за счет повышения уровня фактора роста эндотелия сосудов (VEGF). После интрамиокардиального введения МСК в зону инфаркта повышается локальный уровень VEGF, увеличивается плотность сосудов и регионарный кровоток, улучшается сократимость.

МСК обладают антифиброзной активностью и, следовательно, могут быть отличным источником для борьбы с легочным фиброзом и, следовательно, могут быть изучены на предмет их терапевтического потенциала для лечения идиопатического легочного фиброза. MSC также демонстрируют связанные с мембраной и нерастворимые секретируемые молекулы, участвующие в прикреплении клеток к соседним клеткам и к внеклеточному матриксу.18 Эта конфигурация клеточной поверхности может позволить мезенхимальным стволовым клеткам попасть домой из кровотока в мезенхимальную ткань.