Evaluar la seguridad y eficacia de la administración IM e IV de ADMSC autólogas para el tratamiento de CLI

Fracción vascular estromal derivada de tejido adiposo (ADSVF) Fracción vascular estromal (SVF) obtenida de la liposucción tumescente. El SVF contiene una variedad de células como preadipocitos, células endoteliales, células de músculo liso, pericitos, fibroblastos y células madre adultas (ASC). Además, el SVF también contiene células sanguíneas de los capilares que irrigan las células grasas. Estos incluyen eritrocitos o glóbulos rojos, células B y T, macrófagos, monocitos, mastocitos, células asesinas naturales (NK), células madre hematopoyéticas y células progenitoras endoteliales, por nombrar algunas. También contiene factores de crecimiento como el factor de crecimiento transformante beta (TGF-β), el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), entre otros. Esto es consistente con las secreciones de las células en presencia de una matriz extracelular. El SVF también contiene las diversas proteínas presentes en la matriz extracelular del tejido adiposo, de las cuales la laminina es de interés debido a su capacidad para ayudar en la regeneración neuronal. El procedimiento completo para la preparación y el aislamiento de las células SVF se llevará a cabo en una sala limpia que cumpla con cGMP.

La fracción vascular estromal pura del orden del 99 % se aislará para este ensayo clínico y se eliminarán otras células innecesarias, como los glóbulos rojos y los leucocitos.

Células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo (ADMSC) Las células madre mesenquimales humanas (MSC) están presentes como una población rara de células en el tejido adiposo que representa casi el 30-40% de las células nucleadas, pero pueden crecer rápidamente en cultivo sin perder su progenitor. Las MSC se pueden expandir in vitro ≥ 2 millones de veces y conservar su capacidad para diferenciarse en varios linajes mesenquimales. Las MSC tienen varias características, como Facilidad de aislamiento, Alto potencial de expansión, Estabilidad genética, Atributos reproducibles de aislamiento a aislamiento, Características reproducibles, Compatibilidad con los principios de ingeniería de tejidos, Potencial para mejorar la reparación en muchos tejidos vitales, Dosis uniforme y Mejor control de calidad y liberación criterios.

Además del uso autólogo, MSC también se puede usar para terapia alogénica. Varios estudios han utilizado alo-MSC in vivo y la experiencia sugiere que las alo-MSC no son rechazadas y muchas tienen efectos positivos sobre el injerto. Las MSC pueden aislarse de varios tejidos, cultivarse ex vivo y expandirse muchas veces.18 Las MSC cultivadas y expandidas parecen representar una población homogénea mediante medidas de citometría de flujo de marcadores de superficie celular. Estas células conservan la capacidad de sufrir diferenciación in vitro a linajes osteogénicos, adipogénicos y condrogénicos, incluso cuando se expanden clonalmente.19 Las MSC derivadas del tejido adiposo humano son capaces de diferenciarse en células endoteliales in vitro y luego formar estructuras similares a capilares en un medio semisólido y sugieren que el potencial de diferenciación de las MSC no se limita a los linajes mesodérmicos, sino que también se podría realizar la transdiferenciación de las MSC en otros linajes como el endotelial. Se sabe que las MSC in vitro e in vivo8 dan lugar al mesodermo de yema de extremidades (osteoblastos, condrocitos, adipocitos, células del estroma y mioblastos esqueléticos) y también pueden diferenciarse en células del mesodermo visceral (células endoteliales).9 Las MSC pueden facilitar la vasculogénesis al aumentar los niveles del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Después de que las MSC se inyectan por vía intramiocárdica en la zona del infarto, aumentan los niveles locales de VEGF, aumenta la densidad vascular y el flujo sanguíneo regional, y mejora la contractilidad.

Las MSC tienen actividad antifibrótica y, por lo tanto, pueden ser una excelente fuente para combatir la fibrosis pulmonar y, por lo tanto, podrían explorarse por su potencial terapéutico para tratar la fibrosis pulmonar idiopática. Las MSC también muestran moléculas secretadas insolubles y unidas a la membrana involucradas en la unión celular a las células vecinas y a la matriz extracelular.18 Esta configuración de la superficie celular puede permitir que las células madre mesenquimales pasen del torrente sanguíneo al tejido mesenquimatoso.