Perifollikulær vaskularitetsvurdering ved in-vitro-fertilisering

Ett hundre og fjorten kvinner med tubal faktor eller uforklarlig infertilitet som gjennomgår IVF-programmer på vår avdeling vil bli registrert i en vill protokoll. Suksessivt vil de innrullerte pasientene deles inn i to forskjellige underprotokoller som evaluerer rollen til den perifollikulære vaskulariteten hos pasienter med god og dårlig prognose. Diagnosen stilles ved hysterosalpingografi og/eller laparoskopisk fargeprøve og med partnerens sædanalyse.

Alle pasienter vil bli tilfeldig fordelt i to uavhengige grupper (eksperimentelle og kontrollgrupper) ved hjelp av en dataprogramvare, og den tilfeldige tildelingssekvensen vil bli skjult i lukket og mørk konvolutt inntil intervensjonene skal tildeles.

I den eksperimentelle gruppen alene vil en kraftdoppler-vurdering av perifollikulær vaskularitet bli utført dagen for oocytthenting (36 timer etter hCG-injeksjon). Vaskulariteten til hver eggløsningsfollikkel vil bli studert suksessivt ved hjelp av en avansert bildeanalyseprogramvare, og utvidelsen av den vil bli gradert ved hjelp av et godt validert graderingssystem. De periovulatoriske folliklene vil bli kategorisert i høy grad (grad 3-4) og lav grad (grad 1-2).

Etter pasientens sedasjon med IV propofol, vil oocytter bli hentet ut ved hjelp av en 17 G dobbel-lumen aspirasjonsnål med lavt trykk og individuelt dyrket som markerer reagensglasset og, suksessivt, dyrkingsplaten med en kode som tilsvarer perifollikulær vaskularitetsgrad. De hentede oocyttene vil bli vasket og de modne oocyttene, bestemt av tilstedeværelsen av en første polar kropp (metafase II; MII oocytter), vil bli klassifisert av en erfaren biolog som først ble blindet for tidligere perifollikulær vaskularisering. Spesielt MII oocytter vil bli gradert i tre grupper i henhold til antall anomalier: grad I, oocytter uten noen anomali; grad II, oocytter med en anomali; og grad III, oocytter med minst to anomalier.

De tre oocyttene med høyest karakter vil bli ansett som "de beste" oocyttene å befrukte i kontrollgruppen, mens de i forsøksgruppen vil bli valgt ut med integrering av morfologiske og ultrasonografiske kriterier. Spesielt vil embryologen bruke de ultrasonografiske kriteriene for å velge innenfor oocytter med lignende morfologisk grad.

I begge grupper vil tre MII oocytter bli inseminert 4 timer etter utvinning med 10000-20000 bevegelige sædceller og plassert i CO2-inkubatoren ved en temperatur på 37°C i 5% CO2 i luft, og befruktningen vil bli evaluert 18 timer senere og bekreftet av tilstedeværelsen av to pronuclei og to polare legemer. De befruktede oocyttene vil bli klassifisert med et godt standardisert skåringssystem for zygoter og dyrket i totalt 48 timer fra oocytter IVF. Før overføring vil spaltningsembryoene igjen graderes i henhold til embryomorfologien og den relative andelen av anukleatfragmenter som er tilstede i zona pellucida.

Alle embryoer, med ekskludering av de arresterte (ikke spaltet etter 24 timer fra IVF), vil bli erstattet i hver pasient uten ultralydveiledning ved bruk av ultramykt Frydman-kateter. Lutealfasen vil bli støttet av 100 mg naturlig progesteron daglig administrert. En serum-β-hCG-vurdering vil bli utført på 15. dag etter embryooverføring.

For hver syklus vil serumøstradiolnivåene og antall dominante follikler på dagen for hCG-administrasjon, varigheten av ovariestimulering og enhetene av r-FSH som administreres, bli registrert. Overensstemmelsen mellom ultralydskåringen og oocyttgraden vil også bli evaluert i hvert enkelt tilfelle.

Kansellerte sykluser (tilfeller av fravær av follikulær respons etter 35 dagers behandling eller en serum-E2-verdi >2500 pg/ml), befruktning (prosent av befruktede oocytter / totale oocytter), implantasjon (prosentandel av intrauterine svangerskapsposer / totalt overførte embryoer ), klinisk (prosentandel av stigende β-hCG med sonografiske bevis på intrauterin svangerskapssekk og føtal hjerteaktivitet ved 7 uker av svangerskapet / totale ikke-kansellerte sykluser) og pågående (prosentandel av vitale svangerskap bekreftet ved ultralyd ved 12 ukers svangerskapsalder / totale ikke-kansellerte sykluser) graviditetsrater vil bli evaluert hos hver pasient. Antall flerlingsgraviditeter og ovariehyperstimuleringssyndromer (OHSS) vil også bli registrert i begge grupper.