Beurteilung der perifollikulären Vaskularität bei der In-vitro-Fertilisation

Einhundertvierzehn Frauen mit Tubenfaktor oder ungeklärter Unfruchtbarkeit, die sich in unserer Abteilung einem IVF-Programm unterziehen, werden in ein Wildprotokoll aufgenommen. Nacheinander werden die aufgenommenen Patienten in zwei verschiedene Unterprotokolle aufgeteilt, um die Rolle der perifollikulären Vaskularität bei Patienten mit guter und schlechter Prognose zu bewerten. Die Diagnose wird durch eine Hysterosalpingographie und/oder einen laparoskopischen Farbstofftest sowie eine Samenanalyse des Partners gestellt.

Alle Patienten werden mithilfe einer Computersoftware nach dem Zufallsprinzip in zwei unabhängige Gruppen (Versuchs- und Kontrollgruppe) eingeteilt, und die zufällige Zuordnungssequenz wird in einem geschlossenen und dunklen Umschlag verborgen, bis die Interventionen zugewiesen werden.

Allein in der Versuchsgruppe wird am Tag der Eizellentnahme (36 Stunden nach der hCG-Injektion) eine Power-Doppler-Beurteilung der perifollikulären Vaskularität durchgeführt. Die Vaskularität jedes Ovulationsfollikels wird nacheinander mit einer fortschrittlichen Bildanalysesoftware untersucht und ihre Ausdehnung wird mithilfe eines gut validierten Bewertungssystems bewertet. Die periovulatorischen Follikel werden in hochgradig (Grad 3–4) und niedriggradig (Grad 1–2) eingeteilt.

Nach der Sedierung der Patientin mit intravenösem Propofol werden die Eizellen mit einer 17-G-Doppellumen-Aspirationsnadel mit niedrigem Druck entnommen und einzeln kultiviert, wobei das Reagenzglas und nacheinander die Kulturplatte mit einem Code markiert werden, der dem Grad der perifollikulären Vaskularität entspricht. Die entnommenen Eizellen werden gewaschen und die reifen Eizellen, die durch das Vorhandensein eines ersten Polkörperchens (Metaphase II; MII-Eizellen) bestimmt werden, werden von einem erfahrenen Biologen klassifiziert, der zunächst blind für eine frühere perifollikuläre Vaskularisierung ist. Insbesondere werden MII-Eizellen entsprechend der Anzahl der Anomalien in drei Gruppen eingeteilt: Grad I, Eizellen ohne Anomalie; Grad II, Eizellen mit einer Anomalie; und Grad III, Eizellen mit mindestens zwei Anomalien.

Die drei Eizellen mit dem höchsten Grad werden in der Kontrollgruppe als „die am besten zu befruchtenden“ Eizellen angesehen, während sie in der Versuchsgruppe unter Einbeziehung morphologischer und ultrasonographischer Kriterien ausgewählt werden. Insbesondere wird der Embryologe die Ultraschallkriterien nutzen, um Eizellen mit ähnlichem morphologischem Grad auszuwählen.

In beiden Gruppen werden drei MII-Oozyten 4 Stunden nach der Genesung mit 10.000–20.000 beweglichen Spermien besamt und in den CO2-Inkubator bei einer Temperatur von 37 °C in 5 % CO2 in der Luft gegeben. Die Befruchtung wird 18 Stunden später ausgewertet und durch das Vorhandensein von zwei Vorkernen und zwei Polkörperchen bestätigt. Die befruchteten Eizellen werden mit einem gut standardisierten Bewertungssystem für Zygoten klassifiziert und insgesamt 48 Stunden lang aus Eizellen-IVF kultiviert. Vor dem Transfer werden die Spaltungsembryonen erneut nach der Embryomorphologie und dem relativen Anteil der in der Zona pellucida vorhandenen kernlosen Fragmente eingestuft.

Alle Embryonen, mit Ausnahme derjenigen, die festgenommen wurden (nicht nach 24 Stunden nach der IVF gespalten wurden), werden bei jedem Patienten ohne Ultraschallkontrolle unter Verwendung eines ultraweichen Frydman-Katheters ersetzt. Die Lutealphase wird durch die Gabe von täglich 100 mg natürlichem Progesteron unterstützt. Am 15. Tag nach dem Embryonentransfer wird eine Serum-β-hCG-Bestimmung durchgeführt.

Für jeden Zyklus werden die Serumöstradiolspiegel und die Anzahl der dominanten Follikel am Tag der hCG-Verabreichung, die Dauer der Eierstockstimulation und die verabreichten r-FSH-Einheiten aufgezeichnet. In jedem Fall wird auch die Übereinstimmung zwischen dem Ultraschall-Bewertungsergebnis und dem Eizellengrad bewertet.

Abgebrochene Zyklen (Fälle, in denen nach 35 Behandlungstagen keine follikuläre Reaktion auftritt oder ein Serum-E2-Wert > 2500 pg/ml vorliegt), Befruchtung (Prozentsatz der befruchteten Eizellen / Gesamtzahl der Eizellen), Implantation (Prozentsatz der intrauterinen Fruchtblase / Gesamtzahl der übertragenen Embryonen). ), klinisch (Prozentsatz des ansteigenden β-hCG mit sonografischem Nachweis des intrauterinen Gestationssacks und der fetalen Herzaktivität in der 7. Schwangerschaftswoche / Gesamtzahl der nicht abgebrochenen Zyklen) und laufend (Prozentsatz der durch Ultraschall bestätigten lebenswichtigen Schwangerschaften in der 12. Schwangerschaftswoche / (Gesamtzahl der nicht abgebrochenen Zyklen) Die Schwangerschaftsraten werden bei jeder Patientin ausgewertet. Die Anzahl der Mehrlingsschwangerschaften und der ovariellen Überstimulationssyndrome (OHSS) wird ebenfalls in beiden Gruppen erfasst.