- ICH GCP
- US Clinical Trials Registry
- Klinisk utprøving NCT02535377
Menneskelige spermmarkører for kryoskademotstand
Molekylær diagnostikk av sædkryoresistens hos sæddonorer og kliniske utfall etter kunstig inseminasjon. Optimalisering av sædbank
Spermfrysing har vært brukt i flere tiår for å bevare mannlig fertilitet i tilfeller av forutsigbart eller uventet tap av fruktbarhet for å garantere fremtidig farskap, og også som et komplement til assistert befruktning.
Sædkvaliteten etter tining er svært varierende, selv blant påfølgende prøver fra samme individ, med gjennomsnittlig overlevelse på rundt 40 %. Til dags dato er det molekylære grunnlaget for tilstrekkelig motstand eller intoleranse mot frysings-/tiningsprotokoller ukjent, og kunnskapen kan føre til forbedring i utvalget av prøvene som skal fryses, og også i tilstrekkelig tilskudd av kryokonserveringsmedier. Mikroarray-analyse gir et kraftig verktøy for å adressere den molekylære forklaringen utover denne oppførselen, og gir resultater om komparativ messenger ribonukleinsyre (mRNA) uttrykk under de to forskjellige biologiske forholdene: optimal og suboptimal overlevelse.
Deretter er målet med etterforskernes studie å bestemme den genomiske profilen til sædprøver avhengig av deres overlevelsesresistens mot kryokonservering, for å bestemme gener involvert i kryoskadefølsomhet.
Studieoversikt
Detaljert beskrivelse
Nestede tilfeller og kontrolldesign, med donorsædprøver frosset under konvensjonelle protokoller, kategorisert avhengig av deres gode (GSR, n=20) (mindre enn 20 % motilitetsreduksjon) eller dårlige (BSR, n=20) (mer enn 20 % motilitet) reduksjon) overlevelsesrater. Sperm-mRNA ble ekstrahert ved bruk av Trizol-protokollen, suspendert i dietylpyrokarbonat (DEPC)-behandlet vann og frosset ved -80 grader inntil mikroarray-eksperimentene ble utført. RNA ble analysert på Agilent Bioanalyzer 2100. Prøver ble samlet i 4 (5 prøver/pool og 4 pools/gruppe). Til slutt ble 8 Agilent One colour Whole genome microarray (44K) utført med sammenslåtte prøver, 4 microarrays per gruppe.
Resultatene vil bli evaluert for å oppdage de genene som er differensielt uttrykt.
Studietype
Registrering (Faktiske)
Kontakter og plasseringer
Studiesteder
-
-
-
Alicante, Spania, 03015
- IVI Alicante
-
-
Deltakelseskriterier
Kvalifikasjonskriterier
Alder som er kvalifisert for studier
Tar imot friske frivillige
Kjønn som er kvalifisert for studier
Prøvetakingsmetode
Studiepopulasjon
Menn fra 18-35 år, inkludert i donasjonsprogrammet til IVI Alicante. Enhver overførbar klinisk patologi, virusinfeksjon eller genetisk sykdom bør utelukkes av familiehistorie.
I tillegg må sædprøver fra givere oppfylle sædkriteriene vurdert av laboratoriet vårt:
- spermkonsentrasjon> 40 millioner sperm / ml;
- prosentandel av progressiv motilitet > 50 %
- prosentandel av normale former > 4 %.
For graviditetsrater etter IUI vil kun kvinner < 40 år uten tubal patologi og IUI indikasjoner inkluderes.
Beskrivelse
Inklusjonskriterier:
Kriteriene som brukes for inkludering av givere i sædbanken vil bli vurdert:
- menn fra 18 til 35 år.
- gode fysiske og psykiske forhold og ingen arvelige sykdommer
- seminal parametere: konsentrasjon > 40 millioner sperm / ml; prosentandel av progressiv motilitet> 50 % prosentandel av normale former> 4 %.
- For graviditetsrater etter kunstig inseminasjon vil kun kvinner < 40 år uten tubal patologi og kunstig inseminasjon inkluderes.
Ekskluderingskriterier:
All populasjon som ikke er inkludert i listen over inkludering vil bli ekskludert.
Studieplan
Hvordan er studiet utformet?
Designdetaljer
Kohorter og intervensjoner
Gruppe / Kohort |
Intervensjon / Behandling |
|---|---|
|
Høy kryomotstand
Høy motstand mot kryokonservering av sæd (redusert sædmotilitet <20 %)
|
Sædceller fra de forskjellige gruppene kryokonserveres for å evaluere deres motstand mot bevaring.
|
|
Lav kryomotstand
Lav motstand mot kryokonservering av sæd (redusert sædmotilitet >20 %)
|
Sædceller fra de forskjellige gruppene kryokonserveres for å evaluere deres motstand mot bevaring.
|
Hva måler studien?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Genomisk profil av sædprøver avhengig av deres overlevelsesresistens mot kryokonservering
Tidsramme: Et og et halvt år
|
Den genomiske profilen til sædprøver avhengig av deres overlevelsesresistens mot kryokonservering vil bli analysert og uttrykt som:
|
Et og et halvt år
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Graviditetstall etter kunstig inseminasjon med donorsæd i de ulike gruppene.
Tidsramme: to år
|
Når vi har fått den genomiske profilen til prøver fra donorer inkludert de forskjellige gruppene, vil vi analysere forholdet til de reproduktive resultatene, spesielt graviditetsrater etter konvensjonell kunstig inseminasjon (prosentandel av positiv graviditetstest)
|
to år
|
Samarbeidspartnere og etterforskere
Samarbeidspartnere
Publikasjoner og nyttige lenker
Generelle publikasjoner
- Thurston LM, Siggins K, Mileham AJ, Watson PF, Holt WV. Identification of amplified restriction fragment length polymorphism markers linked to genes controlling boar sperm viability following cryopreservation. Biol Reprod. 2002 Mar;66(3):545-54. doi: 10.1095/biolreprod66.3.545.
- Thurston LM, Watson PF, Holt WV. Semen cryopreservation: a genetic explanation for species and individual variation? Cryo Letters. 2002 Jul-Aug;23(4):255-62.
- Holt WV, Medrano A, Thurston LM, Watson PF. The significance of cooling rates and animal variability for boar sperm cryopreservation: insights from the cryomicroscope. Theriogenology. 2005 Jan 15;63(2):370-82. doi: 10.1016/j.theriogenology.2004.09.018.
- Casas I, Sancho S, Briz M, Pinart E, Bussalleu E, Yeste M, Bonet S. Freezability prediction of boar ejaculates assessed by functional sperm parameters and sperm proteins. Theriogenology. 2009 Oct 15;72(7):930-48. doi: 10.1016/j.theriogenology.2009.07.001. Epub 2009 Aug 3.
- Garrido N, Martinez-Conejero JA, Jauregui J, Horcajadas JA, Simon C, Remohi J, Meseguer M. Microarray analysis in sperm from fertile and infertile men without basic sperm analysis abnormalities reveals a significantly different transcriptome. Fertil Steril. 2009 Apr;91(4 Suppl):1307-10. doi: 10.1016/j.fertnstert.2008.01.078. Epub 2008 Mar 25.
- Garcia-Herrero S, Meseguer M, Martinez-Conejero JA, Remohi J, Pellicer A, Garrido N. The transcriptome of spermatozoa used in homologous intrauterine insemination varies considerably between samples that achieve pregnancy and those that do not. Fertil Steril. 2010 Sep;94(4):1360-1373. doi: 10.1016/j.fertnstert.2009.07.1671. Epub 2009 Sep 30.
- Garcia-Herrero S, Garrido N, Martinez-Conejero JA, Remohi J, Pellicer A, Meseguer M. Ontological evaluation of transcriptional differences between sperm of infertile males and fertile donors using microarray analysis. J Assist Reprod Genet. 2010 Feb;27(2-3):111-20. doi: 10.1007/s10815-010-9388-5. Epub 2010 Feb 2.
- Rahana AR, Ng SP, Leong CF, Rahimah MD. Comparison between mechanical freezer and conventional freezing using liquid nitrogen in normozoospermia. Singapore Med J. 2011 Oct;52(10):734-7.
- Gadea J, Molla M, Selles E, Marco MA, Garcia-Vazquez FA, Gardon JC. Reduced glutathione content in human sperm is decreased after cryopreservation: Effect of the addition of reduced glutathione to the freezing and thawing extenders. Cryobiology. 2011 Feb;62(1):40-6. doi: 10.1016/j.cryobiol.2010.12.001. Epub 2010 Dec 13.
Studierekorddatoer
Studer hoveddatoer
Studiestart
Primær fullføring (FAKTISKE)
Studiet fullført (FAKTISKE)
Datoer for studieregistrering
Først innsendt
Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene
Først lagt ut (ANSLAG)
Oppdateringer av studieposter
Sist oppdatering lagt ut (FAKTISKE)
Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene
Sist bekreftet
Mer informasjon
Begreper knyttet til denne studien
Nøkkelord
Andre studie-ID-numre
- 1406-ALC-048-ES
Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .