Omega-3-indeksrespons på å spise fjærfemat naturlig beriket med omega-3 flerumettede fettsyrer

BAKGRUNN

Ernæring og helse Suboptimale dietter anslås å være ansvarlige for 20 % av for tidlig (sykdomsmediert) dødelighet på verdensbasis, og 20 % av all sykdomsbyrde, målt ved funksjonshemmingsjusterte leveår (DALY). Koblinger mellom kosthold og sykdom blir i økende grad forstått som en trippel byrde, nemlig; underernæring; skjult sult (dietter som ikke inneholder essensielle aminosyrer, essensielle fettsyrer, vitaminer og mineraler); og en global epidemi av overvekt og fedme [1]. Totalt sett spiser verdens befolkning enorme overskudd av kalorier, sukker og salt, mens inntak av fullkorn, frukt, grønnsaker, nøtter, frø og sjømat kommer fra omega-3 flerumettede fettsyrer (PUFA), i de fleste land, uavhengig av rikdom, er utilstrekkelig for helse [1,2].

Omega-3 flerumettede fettsyrer (omega-3-PUFA) Det er fire langkjedede omega-3-PUFAer. Alfa-linolensyre (ALA 18:3n-3) finnes i planter. De resterende tre omega-3 PUFAene, som er lengre og mer umettede (eicosapentaensyre, EPA 20:5n-3, Docosapentaenoic acid, DPA 22:5n-3, og Docosahexaenoic acid, DHA 22:6n-3), er store del funnet i fet sjømat.

Omega-3-PUFAer og helsekosthold med lavt innhold av omega-3-fettsyrer fra sjømat (eikosapentaensyre (EPA) og dokosaheksaensyre (DHA)), et eksempel på skjult sult, har nylig blitt rangert som den sjette viktigste diettrisikoen faktor - 1,5 millioner dødsfall og 33 millioner DALYer over hele verden kan tilskrives denne mangelen [2,3]. Regelmessig inntak av fet fisk og forhøyede nivåer av EPA og DHA i blodet er sterkt assosiert med beskyttelse mot hjerteinfarkt, slag, overvekt, depresjon og demens senere i livet [4-9]. Videre er DHA essensielt for hjernens utvikling i spedbarnsalderen og barndommen – lavt inntak resulterer i redusert intellektuell kapasitet og mental helse, svekket læring i skolen, og eventuelt dårligere livsmuligheter [10-15].

Omega-3-PUFA-inntak og nivåer over hele verden Til tross for de fleste internasjonale retningslinjer som anbefaler inntak av minst én porsjon per uke med fet fisk (>250 mg/dag av EPA og DHA) [16,17], er opptaket av disse rådene dårlig. Mange mennesker, spesielt barn, spiser ikke sjømat i det hele tatt [18]. Videre faller bestandene av villfisk globalt, og er utilstrekkelig til å gi enda en porsjon per uke til verdens befolkning [19]. Akvakultur har vokst jevnt de siste årene, men mesteparten av oppdrettsfisken er avhengig av fiskeoljetilskudd fra villfiskfangsten. Dette har blitt en knapp, kostbar og uholdbar ressurs. Følgelig har nivåene av EPA og DHA i oppdrettsfisk falt betydelig, slik at det nå kreves minst to porsjoner/uke oppdrettslaks for å levere 250 mg/dag av EPA og DHA [20,21]. Derfor er det ikke overraskende at bare en liten minoritet (<20%) over hele verden viser optimale blodomega-3 PUFA-nivåer [22].

Omega-3-PUFA-anriking av vanlig spiste matvarer som en løsning på verdensmangelalger gir en alternativ, mer bærekraftig kilde til omega-3-PUFA. Dette er grunnlaget for Humanitivs Omega-Pro, et algeoljefôr opprinnelig utviklet av Devenish Nutrition, som når det fôres til fjærfe og griser, resulterer i omega-3-PUFA beriket kyllingkjøtt, egg og svinekjøtt. Smaksforsøk har vist at den berikede maten er like eller mer velsmakende enn standardmat [23]. En nylig fullført randomisert dobbeltblind kontrollert studie med 161 friske voksne viste at regelmessig inntak av omega-3-PUFA beriket kyllingkjøtt og egg ga ytterligere 120 mg/dag av EPA og DHA (48 % av det daglige anbefalte inntaket). Studien rapporterte at ikke bare ble omega-3-status forbedret ved å spise naturlig beriket mat, men blodtrykk og hjertefrekvens ble også senket [24]. Konklusjonene og implikasjonene av denne studien kan oppsummeres som følger;

• Omega-3-PUFA-anriket kyllingkjøtt og egg gir forbrukerne et attraktivt tilleggsalternativ eller alternativ til å spise fet fisk.
• Hvis tilsvarende økninger i omega-3-PUFA-nivåer ble oppnådd globalt, som de som ble observert i studien, kunne 10-15 % av kardiovaskulære hendelser forhindres og ytterligere 1-2 år med sunt liv kunne oppnås.
• I motsetning til mange livsstilsintervensjoner, er helsegevinstene ikke avhengig av folks vilje til å gjøre langvarige kostholdsendringer, men av den utbredte tilgjengeligheten av en rekke rimelige, ofte spiste, naturlig beriket mat.

Sykdomsbelastning og Omega-3-PUFA-status i Saudi-Arabia Hjerte- og karsykdommer, spesielt iskemisk hjertesykdom og hjerneslag, er den ledende årsaken til sykelighet og dødelighet i Saudi-Arabia, og står for 44 % av alle dødsfall og 17 % av alle DALY-er i 2017 [2]. Psykiske lidelser, inkludert Alzheimers demens og depresjon, har nylig blitt rangert som den fjerde viktigste årsaken til sykdomsbyrde i Saudi, og står for 9 % av alle DALYs [2]. Høy kroppsmasseindeks og ernæringsmessige risikofaktorer er de to beste risikofaktorene for dårlig helse i Saudi-Arabia [2].

En fersk analyse utført av Global Burden of Disease Collaborators antyder at omega-3 PUFA-mangel er en enda viktigere ernæringsmessig risikofaktor i land i Midtøsten enn globalt (rangert 4. i Midtøsten versus 6. over hele verden) [3].

En undersøkelse publisert i 2014 beskrev svært regelmessig fiskespising blant innbyggerne i kystbyen Jeddah by - saudiarabiske og ikke-saudiarabiske rapporterte inkludering av fisk i et gjennomsnitt på henholdsvis 2,2 og 3,1 måltider/uke [25]. Imidlertid var flertallet av fiskeartene som ble konsumert hvit fisk og inneholdt bare beskjedne mengder DHA og EPA (område 0-500mg/100g). Enda større bekymring er en andre nyere undersøkelse, som ble utført i Najran i 2018. I denne provinsen i innlandet rapporterte bare 23 % av respondentene at de spiste fisk minst en gang i uken, 31 % rapporterte at de spiste fisk bare en gang i måneden, og 12 % spiste aldri fisk [26]. Totalt sett er det anslått at hver saudisk borger spiser mindre enn 9 kg fisk per år [27,28]. Derimot er de blant verdens største forbrukere av kylling, og hver spiser omtrent 47 kg kyllingkjøtt og 120 egg i året [27,28]. Når det gjelder EPA- og DHA-blodnivåer i den saudiske befolkningen, rapporterte en 2015-studie av 2672 deltakere (1544 menn og 1128 kvinner) en gjennomsnittlig omega-3-indeks på 3,91 % (standardavvik 1,45 %) [29]. Dette er betydelig lavere enn den optimale omega-3-indeksen på 8 % [22].

Studiebegrunnelse I denne randomiserte, dobbeltblindede, kontrollerte studien tar vi sikte på å kvantifisere virkningen av regelmessig inntak av omega-3 PUFA-anriket kyllingkjøtt og egg over en fire måneders periode, i en sunn saudiarabisk befolkning.

STUDIENS MÅL OG MÅL.

Hovedmålet med denne studien vil være å vurdere omega-3-indeksresponsen for røde blodlegemer hos friske saudiske voksne på regelmessig inntak av omega-3 PUFA-anriket kyllingkjøtt og egg. Omega-3-indeksen for røde blodlegemer beregnes som summen av EPA og DHA uttrykt som en prosentandel av totale fettsyrer i erytrocyttmembraner (røde blodlegemer). Omega-3-indeksen for røde blodlegemer er valgt som det primære resultatet for studien, på grunn av; dens lessor-variabilitet over tid sammenlignet med plasmaverdier [30,31]; dens sterke korrelasjoner med EPA- og DHA-nivåer i humant hjertevev og i flere relevante organer i dyremodeller [32,33]; og til slutt på grunn av dens beviste prediksjon av kardiovaskulære hendelser og dødelighet av alle årsaker [34-36].

Sekundære mål inkluderer;

• Vurdering av røde blodlegemer og plasma EPA, DPA og DHA-responser på regelmessig inntak av omega-3 PUFA-anriket kyllingkjøtt og egg.
• Sammenligningen av grunnlinjenivåer av røde blodlegemer og plasma av EPA, DPA og DHA, blant saudiarabiske innbyggere som regelmessig inntar fet fisk med de som ikke regelmessig inntar fet fisk, og
• Vurderingen av hvorvidt omega-3-indeksen for røde blodlegemer og plasma reagerer på maten beriket med omega-3-PUFA er forskjellig mellom de som gjør det, og de som ikke gjør det, inkluderer fet fisk i sitt ukentlige kosthold.

PRØVEDESIGN.

Dette vil være en randomisert dobbeltblind intervensjonsstudie. Rettssaken vil bli utført i samsvar med Helsinki-erklæringen.

STUDIEDELTAKERE

80 sunne, fellesskapsboliger, deltakere vil bli rekruttert til studien.

RANDOMISERING OG MASKERING

Deltakerne vil bli randomisert til en av to armer;

• Kontroll / Placebo-intervensjon: Inntak av minst 4 porsjoner standard kyllingkjøtt og minst 4 standard egg per uke i 4 måneder.
• Eksperimentell intervensjon: Inntak av minst 4 porsjoner med omega-3-PUFA-anriket kyllingkjøtt og minst 4 omega-3-PUFA-anrikede egg per uke, i 4 måneder.

STUDIEGØRELSE

Deltakerne vil delta på studiesenteret ved screening og baseline-besøk og ved studieslutt (måned 4). De vil bli kontaktet på telefon med månedlige mellomrom (måned 1, 2 og 3).

Ved screeningbesøket vil det bli tatt en omfattende livsstil og sykehistorie, et spørreskjema om matfrekvens fylles ut for å fange opp matinntaket det foregående året; en 3 dagers matrekord vil bli arrangert for å fange deltakernes nåværende diettinntak; og tilfredsstillelse av inkluderings- og eksklusjonskriteriene vil bli evaluert.

Ved baseline-besøket, hvis alle inklusjons- og eksklusjonskriterier er oppfylt, vil deltakerne bli randomisert til enten kontroll- eller intervensjonsarmen i studien.

Ved både baseline- og måned 4-besøk vil høyde, vekt, midje- og hofteomkrets bli målt, slik at både kroppsmasseindeksen og midje-hofte-forholdet kan beregnes. Ved disse to klinikkbesøkene vil det bli tatt fastende blodprøver for å tillate måling av plasma- og røde blodlegemer av EPA, DPA og DHA, og også for å tillate lagring av plasmaalikvoter for fremtidige forskningsmålinger. Deltakerne vil bli bedt om å faste, ikke drikke te eller kaffe, ikke røyke og ikke delta i intens trening fra midnatt (minimum 8 timer), før baseline- og studiesluttbesøk. Deltakerne kan drikke vann og ta viktige medisiner på disse morgenene.

Ved telefonsamtaler 1, 2 og 3, og ved besøk 4 i måned, vil hyppigheten av inntak av kyllingkjøtt, egg og fisk i forrige uke bli vurdert, samt samtidige medisiner og deltakernes velvære.

Deltakerne vil bli bedt om å unngå å ta langkjedede omega-3 PUFA-tilskudd i løpet av studien.

NÆRINGSINTERVENSJON

Fjærfekjøttet og eggene vil bli beriket ved å gi kyllinger et komplett fôr som inkluderer alger, som er en rik kilde til omega-3 PUFAer (OmegaPro, Humanitiv, Meath, Irland). Omega-3 PUFA-anriket kylling (hele kyllinger, bryster, lår og trommer) og egg, eller passende kontrollkylling og kontrollegg, vil bli levert til hjemmene til studiedeltakerne med jevne mellomrom (ukentlig eller to-ukentlig), slik at både de, og opptil tre ekstra familiemedlemmer, vil kunne spise minst 4 porsjoner kyllingkjøtt per uke og minst 4 egg ukentlig i løpet av den 4 måneder lange studieperioden. Kyllingkjøttet leveres frossen, og eggene leveres kjølt.

MÅLING AV RØDE CELLER OG PLASMA-NIVÅER AV FETTSYRER

Måling av plasma- og røde blodlegemer av EPA, DPA og DHA vil bli utført ved et laboratorium med spesifikk ekspertise på lipidanalyser. Totale lipider vil bli ekstrahert fra plasma og røde celler ved hjelp av en modifisert Folch-metode [37,38]. Fosfolipider vil bli separert fra nøytrale lipider ved 1-dimensjonal tynnsjiktskromatografi. Fettsyremetylestere vil bli fremstilt ved direkte transesterifisering og separert ved bruk av gasskromatografi-massespektrometri som muliggjør kvantifisering av 28 forskjellige fettsyretopper. Plasmanivåer av omega-3-PUFA vil uttrykkes i mikrogram/gram, og røde blodlegemer som en prosentandel av totale fettsyrer i erytrocyttmembraner. Erytrocytt- eller rødcelle-omega-3-indeksen beregnes som summen av EPA og DHA uttrykt som prosentandel av totale fettsyrer i erytrocyttmembraner.

STATISTISK ANALYSE

Analyser og rapportering Studien vil bli analysert på grunnlag av intensjon å behandle. Standard oppsummeringsstatistikk (gjennomsnitt, standardavvik, median, rekkevidde, %) vil bli brukt for å beskrive grunnlinjekarakteristikker til deltakerne.

Gjentatte tiltak ANOVA vil bli brukt for å sammenligne de 2 studiegruppene. Studien vil bli rapportert i samsvar med CONSORT (Consolidated Standards of Reporting Trials) 2010-erklæringen.

Betraktninger om prøvestørrelse Det primære endepunktet vil være endringen i omega-3-indeksen for røde blodlegemer etter 4 måneder. I tidligere studier har standardavviket for gjentatte mål på erytrocytt omega-3-indeksen vist seg å være 0,5 %. Derfor vil studien med 80 deltakere ha mer enn 95 % kraft til å oppdage en forskjell på 1 % i endringen fra baseline i omega-3-indeksen mellom de som spiser beriket mat versus de som spiser kontrollmat, ved en 2-sidig alfa -nivå på 0,05.

REFERANSER

1. Globalt panel for landbruk og matsystemer for ernæring 2020. Fremtidige matsystemer: For mennesker, planeten vår og velstand. London. Storbritannia.
2. Institute for Health Metrics and Evaluation (2018) GBD Compare. Seattle, WA: IHME, University of Washington. http://vizhub.healthdata.org/gbd-compare. (åpnet mai 2023).
3. GBD 2017 Diet Collaborators. Helseeffekter av kostholdsrisiko i 195 land, 1990-2017: en systematisk analyse for den globale sykdomsbyrden-studien 2017. Lancet. 393, 1958-1972 (2019).
4. Chowdhury, R. et al. Sammenheng mellom fiskekonsum, langkjedede omega 3-fettsyrer og risiko for cerebrovaskulær sykdom: systematisk oversikt og meta-analyse. BMJ. 345, e6698 (2012).
5. Chowdhury, R. et al. Forening av kostholds-, sirkulerende og supplerende fettsyrer med koronarrisiko: en systematisk gjennomgang og metaanalyse. Ann. Turnuskandidat. Med. 160, 398-406 (2014).
6. Mozaffarian, D. et al. Plasma fosfolipid langkjedede -3 fettsyrer og total og årsaksspesifikk dødelighet hos eldre voksne - en kohortstudie. Ann. Turnuskandidat. Med. 158, 515-525 (2013).
7. de Oliveira Otto, M.C. et al. Sirkulerende og diettbaserte omega-3 og omega-6 flerumettede fettsyrer og forekomst av CVD i den multietniske studien av aterosklerose J. Am. Hjerte. Assoc. 2, 1-17 (2013).
8. Albar SA. Dietary Omega-6/Omega-3 flerumettet fettsyre (PUFA) og Omega-3 er assosiert med generell og abdominal fedme hos voksne: UK National Diet and Nutritional Survey. Cureus. 12. oktober 2022;14(10):e30209. doi: 10.7759/cureus.30209. PMID: 36381926; PMCID: PMC9650245.
9. Wu, A., Ding, Y., Wu, F., Li, R., Hou, J. & Mao, P. Omega-3-fettsyreinntak og risiko for demens og Alzheimers sykdom: en metaanalyse. Neurosci. Biobehav. Rev. 48, 1-9 (2015).
10. Lauritzen L, Brambilla P, Mazzocchi A, Harslof LB, Ciappolino V, Agostoni C. DHA-effekter i hjernens utvikling og funksjon. Næringsstoffer 2016;8(1):6.
11. Oyen J, Kvestad I, Midtbo LK, Graff IE, Hysing M, Stormark KM, Markhus MW, Baste V, Froyland L, Koletzko B, et al. Inntak av fet fisk og kognitiv funksjon: FINS-KIDS, en randomisert kontrollert studie hos førskolebarn. BMC Med 2018;16(1):41.
12. Demmelmair H, Oyen J, Pickert T, Rauh-Pfeiffer A, Stormark KM, Graff IE, LieO, Kjellevold M, Koletzko B. Effekten av atlantisk laksekonsum på den kognitive ytelsen til førskolebarn - en randomisert kontrollert studie. Clin Nutr 2019;38(6):2558-68.
13. Teisen MN, Vuholm S, Niclasen J, Aristizabal-Henao JJ, Stark KD, Geertsen SS, Damsgaard CT, Lauritzen L. Effekter av fet fiskinntak på kognitiv og sosioemosjonell funksjon hos friske 8-9 år gamle barn: FiSK Junior randomisert forsøk. Am J Clin Nutr 2020;00:1-10.
14. Sorensen LB, Damsgaard CT, Dalskov SM, Petersen RA, Egelund N, Dyssegaard CB, Stark KD, Andersen R, Tetens I, Astrup A, et al. Kosthold induserte endringer i jern- og n-3-fettsyrestatus og assosiasjoner til kognitiv ytelse hos 8-11 år gamle danske barn: sekundære analyser av optimal velvære, utvikling og helse for danske barn gjennom en sunn ny nordisk kostholdsskole Måltidsstudie. Br J Nutr 2015;114(10):1623-37.
15. Handeland K, Oyen J, Skotheim S, Graff IE, Baste V, Kjellevold M, Froyland L, Lie O, Dahl L, Stormark KM. Inntak av fet fisk og oppmerksomhetsytelse hos 14-15 år gamle ungdommer: FINS-TEENS-en randomisert kontrollert studie. Nutr J 2017;16(1):64.
16. EFSA-panelet for dietetiske produkter, ernæring og allergier. Vitenskapelig mening om kostholdsreferanseverdier for fett, inkludert mettede fettsyrer, flerumettede fettsyrer, enumettede fettsyrer, transfettsyrer og kolesterol. EFSA Journal. 8(3), 1461 (2010).
17. U.S. Department of Health and Human Services og U.S. Department of Agriculture. 2015-2020 kostholdsretningslinjer for amerikanere. 8. utgave. desember 2015. Tilgjengelig på http://health.gov/dietaryguidelines/2015/guidelines/ (2015).
18. Micha, R., et al. Globale, regionale og nasjonale forbruksnivåer av diettfett og -oljer i 1990 og 2010: en systematisk analyse inkludert 266 landsspesifikke ernæringsundersøkelser. BMJ. 348, g2272 (2014).
19. Golden, C.D. et al. Fall i fiskefangst truer menneskers helse. Natur. 534, 317-320 (2016).
20. Sprague, M., Dick, J.R. & Tocher, D.R. Innvirkning av bærekraftig fôr på omega-3 langkjedede fettsyrenivåer i oppdrettslaks, 2006-2015. Sci. Rep. 6, http://dx.doi.org/10.1038/srep21892 (2016).
21. Sprague, M., Fawcett, S., Betancor, M. B., Struthers, W., & Tocher, D. R. (2020). Variasjon i ernæringsmessig sammensetning av oppdretts-atlantisk laks (Salmo salar L.) fileter med vekt på EPA- og DHA-innhold. Journal of Food Composition and Analysis, 94(august). https://doi.org/10.1016/j.jfca.2020.103618
22. Stark, K.D., Van Elswyk, M.E., Higgins, M.R., Weatherfordd, C.A. & Salem, N. Global undersøkelse av omega-3-fettsyrene, dokosaheksaensyre og eikosapentaensyre, i blodstrømmen til friske voksne. Prog. Lipid Res. 63, 132-152 (2016).
23. OmegaPro - Devenish [Internett]. www.devenishnutrition.com. [sitert 10. april 2023]. Tilgjengelig fra: https://www.devenishnutrition.com/products-services/poultry/c/specialist-products1/omegapro
24. Stanton, A. V., James, K., Brennan, M. M., O'Donovan, F., Buskandar, F., Shortall, K., El-Sayed, T., Kennedy, J., Hayes, H., Fahey, A. G. , Pender, N., Thom, S. A. M., Moran, N., Williams, D. J., & Dolan, E. (2020). Omega-3-indeks og blodtrykksresponser på å spise mat naturlig beriket med omega-3 flerumettede fettsyrer: en randomisert kontrollert studie. Vitenskapelige rapporter, 10(1), 1-10. https://doi.org/10.1038/s41598-020-71801-5
25. Burger, J., Gochfeld, M., Batang, Z., Alikunhi, N., Al-Jahdali, R., Al-Jebreen, D., Al-Suwailem, A. (2014). Fiskekonsumatferd og priser hos innfødte og ikke-innfødte mennesker i Saudi-Arabia. Miljøforskning. https://doi.org/10.1016/j.envres.2014.05.014
26. Khan, A. Q., Aldosari, F., & Hussain, S. M. (2018). Fiskekonsumatferd og fiskeoppdrettsholdning i Kongeriket Saudi-Arabia (KSA). Journal of the Saudi Society of Agricultural Sciences, 17(2), 195-199. https://doi.org/10.1016/j.jssas.2016.04.003.
27. Saudier blant verdens største forbrukere av kylling. Saudi Gazette 14. mars 2016. http://english.alarabiya.net/en/business/markets/2016/03/14
28. GDD Survey Metadata File | Global kostholdsdatabase [Internett]. globaldietarydatabase.org. [sitert 10. april 2023]. Tilgjengelig fra: https://globaldietarydatabase.org/complete-survey-metadata
29. Bassam, T., Superko, H. R., Caulfield, M., (2015). Risikoen for hjerte- og karsykdommer tilskrevet fiskeolje i blodet (omega-3 fettsyrer) er betydelig forskjellig hos saudiske menn og kvinner. Journal of Saudi Heart Association. http://dx.doi:10.1016/j.jsha.2015.05.202
30. Harris, W. S. & Thomas, R. M. Biologisk variasjon av blod omega-3 biomarkører. Clin. Biochem. 43, 338-340 (2010).
31. Harris, W. S., Varvel, S. A., Pottala, J. V., Warnick, G. R. & McConnell, J. P. Sammenlignende effekter av en akutt dose fiskeolje på omega-3-fettsyrenivåer i røde blodceller versus plasma: Implikasjoner for klinisk nytte. J. Clin. Lipidol. 7, 433-440 (2013).
32. Metcalf, R.G. et al. Forholdet mellom blod og atrielle fettsyrer hos pasienter som gjennomgår hjerte-bypass-operasjoner. Er. J. Clin. Nutr. 91, 528-534 (2010).
33. Fenton, J. I., Gurzell, E. A., Davidson, E. A. & Harris, W. S. PUFA-er for røde blodlegemer reflekterer fosfolipid-PUFA-sammensetningen til hovedorganer. Prostagl. Leukot. Essent. Fett. Syrer. 112, 12-23 (2016).
34. Harris, W. S., Del Gobbo, L. & Tintle, N. L. Omega-3-indeksen og relativ risiko for dødelighet av koronar hjertesykdom: Estimering fra 10 kohortstudier. Aterosklerose. 262, 51-54 (2017).
35. Kleber, M. E., Delgado, G. E., Lorkowski, S., Marz, W. & von Schacky, C. Omega-3-fettsyrer og dødelighet hos pasienter henvist til koronar angiografi. Ludwigshafen risiko- og kardiovaskulær helsestudie. Aterosklerose. 252, 175-181 (2016).
36. Harris, W.S., Tintle, N.L., Etherton, M.R. & Vasan, R.S. Erytrocytt langkjedede omega-3-fettsyrenivåer er omvendt assosiert med dødelighet og tilfeldig hjerte- og karsykdom: The Framingham Heart Study. J. Clin. Lipidol. 12, 718-727 (2018).
37. Folch, J., Lees, M. & Stanley, G. H. S. En enkel metode for isolering og rensing av totale lipider fra dyrevev. J. Biol. Chem. 226, 497-509 (1957).
38. Moilanen, T. & Nikkari, T. Effekten av lagring på fettsyresammensetningen av humant serum. Clin. Chim. Acta. 114, 111-116 (1981).