Omega-3-indeksrespons på at spise fjerkræmad naturligt beriget med omega-3 flerumættede fedtsyrer

BAGGRUND

Ernæring og sundhed Suboptimale diæter anslås at være ansvarlige for 20 % af for tidlig (sygdomsmedieret) dødelighed på verdensplan og 20 % af al sygdomsbyrde, målt ved handicapjusterede leveår (DALY). Forbindelser mellem kost og sygdom forstås i stigende grad som en tredobbelt byrde, nemlig; underernæring; skjult sult (kost, der er utilstrækkeligt med essentielle aminosyrer, essentielle fedtsyrer, vitaminer og mineraler); og en global epidemi af overvægt og fedme [1]. Samlet set spiser verdens befolkninger enorme overskud af kalorier, sukker og salt, mens indtag af fuldkorn, frugt, grøntsager, nødder, frø og skaldyr kommer fra omega-3 flerumættede fedtsyrer (PUFA'er) i de fleste lande, uanset rigdom, er utilstrækkelige til sundhed [1,2].

Omega-3 flerumættede fedtsyrer (omega-3-PUFA'er) Der er fire langkædede omega-3-PUFA'er. Alfa-linolensyre (ALA 18:3n-3) findes i planter. De resterende tre omega-3 PUFA'er, som er længere og mere umættede (Eicosapentaensyre, EPA 20:5n-3, Docosapentaensyre, DPA 22:5n-3 og Docosahexaensyre, DHA 22:6n-3), er i store mængder del findes i olieholdige fisk og skaldyr.

Omega-3-PUFA'er og menneskers sundhedsdiæter med lavt indhold af omega-3 fedtsyrer fra fisk og skaldyr (eicosapentaensyre (EPA) og docosahexaensyre (DHA)), et eksempel på skjult sult, er for nylig blevet rangeret som den sjette vigtigste kostrisiko faktor - 1,5 millioner dødsfald og 33 millioner DALY'er på verdensplan kan tilskrives denne mangel [2,3]. Regelmæssig indtagelse af fed fisk og forhøjede blodniveauer af EPA og DHA er stærkt forbundet med beskyttelse mod hjerteanfald, slagtilfælde, fedme, depression og demens senere i livet [4-9]. Ydermere er DHA essentiel for hjernens udvikling under spædbarn og barndom - lavt indtag resulterer i nedsat intellektuel kapacitet og mental sundhed, nedsat indlæring i skolen og i sidste ende dårligere livsmuligheder [10-15].

Omega-3-PUFAs indtag og niveauer på verdensplan På trods af de fleste internationale retningslinjer, der anbefaler indtagelse af mindst én portion fed fisk om ugen (>250 mg/dag af EPA og DHA) [16,17], er optagelsen af ​​dette råd ringe. Mange mennesker, især børn, indtager slet ikke fisk og skaldyr [18]. Desuden falder de vilde fiskebestande globalt, og de er utilstrækkelige til at give verdens befolkning en portion om ugen [19]. Akvakulturen er vokset støt de seneste år, men de fleste opdrættede fisk er afhængige af fiskeolietilskud fra den vilde fiskefangst. Dette er blevet en knap, dyr og uholdbar ressource. Som følge heraf er niveauerne af EPA og DHA i opdrættede fisk faldet betydeligt, således at der nu kræves mindst to portioner/uge opdrættet laks for at levere 250 mg/dag EPA og DHA [20,21]. Derfor er det ikke overraskende, at på verdensplan kun en lille minoritet (<20%) udviser optimale omega-3 PUFA-niveauer i blodet [22].

Omega-3-PUFA berigelse af almindeligt spiste fødevarer som en løsning på de verdensomspændende mangelalger giver en alternativ, mere bæredygtig kilde til omega-3-PUFA'er. Dette er grundlaget for Humanitivs Omega-Pro, et algeoliefoder oprindeligt udviklet af Devenish Nutrition, som, når det fodres til fjerkræ og svin, resulterer i omega-3-PUFA beriget kyllingekød, æg og svinekød. Smagsforsøg har vist, at de berigede fødevarer er lige så eller mere velsmagende end standardfødevarer [23]. Et nyligt afsluttet randomiseret dobbeltblindt kontrolleret forsøg med 161 raske voksne viste, at regelmæssig indtagelse af omega-3-PUFA beriget kyllingekød og æg gav yderligere 120 mg/dag af EPA og DHA (48 % af det daglige anbefalede indtag). Undersøgelsen rapporterede, at omega-3-status ikke kun blev forbedret ved at spise naturligt beriget mad, men blodtryk og hjertefrekvens blev også sænket [24]. Konklusionerne og implikationerne af denne undersøgelse kan opsummeres som følger;

• Omega-3-PUFA beriget kyllingekød og æg giver forbrugerne en attraktiv ekstra mulighed eller et alternativ til at spise fed fisk.
• Hvis tilsvarende stigninger i omega-3-PUFA-niveauer blev opnået globalt, som dem, der blev observeret i undersøgelsen, kunne 10-15% af kardiovaskulære hændelser forhindres, og yderligere 1-2 års sundt liv kunne opnås.
• I modsætning til mange livsstilsinterventioner er sundhedsfordelene ikke afhængige af folks vilje til at foretage langvarige kostændringer, men af ​​den udbredte tilgængelighed af en række billige, almindeligt spiste, naturligt berigede fødevarer.

Sygdomsbyrde og Omega-3-PUFA-status i Saudi-Arabien Hjerte-kar-sygdomme, især iskæmisk hjertesygdom og slagtilfælde, er den førende årsag til sygelighed og dødelighed i Saudi-Arabien, der tegner sig for 44 % af alle dødsfald og 17 % af alle DALYs i 2017 [2]. Psykiske lidelser, herunder Alzheimers demens og depression, er for nylig blevet rangeret som den fjerdevigtigste årsag til sygdomsbyrde i Saudi, der tegner sig for 9% af alle DALY'er [2]. Højt kropsmasseindeks og ernæringsmæssige risikofaktorer er de øverste 2 risikofaktorer for dårligt helbred i Saudi-Arabien [2].

En nylig analyse udført af Global Burden of Disease Collaborators tyder på, at omega-3 PUFA-mangel er en endnu vigtigere ernæringsmæssig risikofaktor i lande i Mellemøsten end globalt (rangeret 4. i Mellemøsten versus 6. på verdensplan) [3].

En undersøgelse offentliggjort i 2014 beskrev meget regelmæssig fiskespisning blandt indbyggere i kystbyen Jeddah by - saudiarabiske og ikke-saudiarabiske rapporterede inklusion af fisk i et gennemsnit på henholdsvis 2,2 og 3,1 måltider/uge [25]. Imidlertid var størstedelen af ​​de fiskearter, der blev indtaget, hvid fisk og indeholdt kun beskedne mængder af DHA og EPA (interval 0-500mg/100g). En endnu større bekymring er en anden nyere undersøgelse, som blev udført i Najran i 2018. I denne indre provins rapporterede kun 23 % af de adspurgte, at de spiste fisk mindst en gang om ugen, 31 % rapporterede, at de kun spiste fisk en gang om måneden, og 12 % spiste aldrig fisk [26]. Samlet set anslås det, at hver saudisk borger spiser mindre end 9 kg fisk om året [27,28]. Derimod er de blandt verdens største forbrugere af kylling, der hver spiser cirka 47 kg kyllingekød og 120 æg om året [27,28]. Med hensyn til EPA- og DHA-blodniveauer i den saudiske befolkning rapporterede et 2015-studie af 2672 deltagere (1544 mænd og 1128 kvinder) et gennemsnitligt omega-3-indeks på 3,91% (standardafvigelse 1,45%) [29]. Dette er betydeligt lavere end det optimale omega-3 indeks på 8 % [22].

Undersøgelsesgrundlag I dette randomiserede, dobbeltblindede, kontrollerede forsøg sigter vi mod at kvantificere virkningen af ​​regelmæssigt forbrug af omega-3 PUFA beriget kyllingekød og æg over en fire måneders periode i en sund saudisk befolkning.

STUDIEFORMÅL OG MÅL.

Det primære formål med denne undersøgelse vil være at vurdere de røde blodlegemers omega-3-indeksrespons hos raske saudiske voksne på regelmæssigt forbrug af omega-3 PUFA-beriget kyllingekød og æg. Omega-3-indekset for røde blodlegemer beregnes som summen af ​​EPA og DHA udtrykt som en procentdel af de totale fedtsyrer i erytrocytmembraner (røde blodlegemer). Omega-3-indekset for røde blodlegemer er blevet valgt som det primære resultat for forsøget på grund af; dens mindre variabilitet over tid sammenlignet med plasmaværdier [30,31]; dets stærke korrelationer med EPA- og DHA-niveauer i humant hjertevæv og i flere relevante organer i dyremodeller [32,33]; og endelig på grund af dens dokumenterede forudsigelse af kardiovaskulære hændelser og dødelighed af alle årsager [34-36].

Sekundære mål omfatter;

• Vurdering af røde blodlegemer og plasma-EPA, DPA og DHA-reaktioner på regelmæssig indtagelse af omega-3 PUFA-beriget kyllingekød og æg.
• Sammenligningen af ​​baseline niveauer af røde blodlegemer og plasma af EPA, DPA og DHA blandt saudiarabiske beboere, der regelmæssigt indtager fed fisk, med dem, der ikke regelmæssigt indtager fed fisk, og
• Vurderingen af, hvorvidt de røde blodlegemer og plasma-omega-3-indekset reagerer på de omega-3-PUFA-berigede fødevarer, er forskellig mellem dem, der gør, og dem, der ikke gør det, inkluderer fed fisk i deres ugentlige kost.

PRØVEDESIGN.

Dette vil være et randomiseret dobbeltblindt interventionsstudie. Retssagen vil blive udført i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen.

STUDIEDELTAGERE

80 sunde, samfundsmæssige boliger, vil deltagere blive rekrutteret til undersøgelsen.

RANDOMISERING OG MASKERING

Deltagerne vil blive randomiseret til en af ​​to arme;

• Kontrol/placebointervention: Indtagelse af mindst 4 portioner standard kyllingekød og mindst 4 standardæg om ugen i 4 måneder.
• Eksperimentel intervention: Indtagelse af mindst 4 portioner omega-3-PUFA-beriget kyllingekød og mindst 4 omega-3-PUFA-berigede æg om ugen i 4 måneder.

STUDIEUDFØRELSE

Deltagerne vil deltage i studiecentret ved screeningen og baselinebesøgene og ved undersøgelsens afslutning (måned 4). De vil blive kontaktet telefonisk med månedlige intervaller (måned 1, 2 og 3).

Ved screeningbesøget vil der blive taget en omfattende livsstils- og sygehistorie, et spørgeskema med madfrekvens vil blive udfyldt for at fange fødeindtaget i løbet af det foregående år; en 3 dages madrekord vil blive arrangeret for at fange deltagernes aktuelle diætindtag; og tilfredsstillelse af inklusions- og eksklusionskriterierne vil blive evalueret.

Ved baseline-besøget, hvis alle inklusions- og eksklusionskriterier er opfyldt, vil deltagerne blive randomiseret til enten kontrol- eller interventionsarmen i undersøgelsen.

Ved både baseline- og måned 4-besøg vil højde, vægt, talje- og hofteomkreds blive målt, hvilket muliggør beregning af både body mass index og talje-hofte-forholdet. Ved disse to klinikbesøg vil der blive taget fasteblodprøver for at muliggøre måling af plasma- og røde blodlegemeniveauer af EPA, DPA og DHA, og også for at tillade opbevaring af plasmaalikvoter til fremtidige forskningsmålinger. Deltagerne vil blive bedt om at faste, ikke drikke te eller kaffe, ikke ryge og ikke deltage i intens motion fra midnat (minimum 8 timer) forud for baseline- og afslutningsbesøgene. Deltagerne kan drikke vand og tage vigtig medicin på disse morgener.

Ved telefonopkald 1, 2 og 3 måned, og ved besøg 4 måned, vil hyppigheden af ​​indtagelse af kyllingekød, æg og fisk i den foregående uge blive vurderet, ligesom samtidig medicin og deltagernes velbefindende.

Deltagerne vil blive bedt om at undgå at tage langkædede omega-3 PUFA-tilskud i hele undersøgelsens varighed.

ERNÆRINGSINTERVENTION

Fjerkrækødet og æggene vil blive beriget ved at fodre kyllinger med et komplet foder, som omfatter alger, som er en rig kilde til omega-3 PUFA'er (OmegaPro, Humanitiv, Meath, Irland). Omega-3 PUFA beriget kylling (hele kyllinger, bryster, lår og tromler) og æg, eller passende kontrolkylling og kontrolæg, vil blive leveret til studiedeltagernes hjem med regelmæssige mellemrum (ugentlig eller to ugentligt), således at både de og op til tre yderligere familiemedlemmer vil være i stand til at spise mindst 4 portioner kyllingekød om ugen og mindst 4 æg ugentligt i løbet af den 4 måneder lange undersøgelsesperiode. Kyllingekødet leveres frosset, og æggene leveres på køl.

MÅLING AF RØDE COLLER OG PLASMA-NIVEAUER AF FEDSYRER

Måling af plasma- og erytrocytniveauer af EPA, DPA og DHA vil blive udført på et laboratorium med specifik ekspertise i lipidanalyser. Totale lipider vil blive ekstraheret fra plasma og røde blodlegemer ved hjælp af en modificeret Folch-metode [37,38]. Fosfolipider vil blive adskilt fra neutrale lipider ved 1-dimensionel tyndtlagskromatografi. Fedtsyremethylestere vil blive fremstillet ved direkte transesterificering og separeret ved hjælp af gaskromatografi-massespektrometri, der muliggør kvantificering af 28 forskellige fedtsyretoppe. Plasmaniveauer af omega-3-PUFA'er vil blive udtrykt i mikrogram/gram, og niveauer af røde blodlegemer som en procentdel af totale fedtsyrer i erytrocytmembraner. Erytrocyt- eller omega-3-indekset for røde blodlegemer beregnes som summen af ​​EPA og DHA udtrykt som procentdel af totale fedtsyrer i erytrocytmembraner.

STATISTISK ANALYSE

Analyser og rapportering Undersøgelsen vil blive analyseret ud fra en intention to treat-basis. Standard opsummerende statistik (middelværdi, standardafvigelse, median, interval, %) vil blive brugt til at beskrive basislinjekarakteristika for deltagerne.

Gentagne foranstaltninger ANOVA vil blive brugt til at sammenligne de 2 undersøgelsesgrupper. Undersøgelsen vil blive rapporteret i overensstemmelse med CONSORT (Consolidated Standards of Reporting Trials) erklæring fra 2010.

Overvejelser om prøvestørrelse Det primære slutpunkt vil være ændringen i omega-3-indekset for røde blodlegemer efter 4 måneder. I tidligere undersøgelser har standardafvigelsen for gentagne målinger af erytrocyt-omega-3-indekset vist sig at være 0,5 %. Derfor vil undersøgelsen med 80 deltagere have mere end 95 % kraft til at påvise en forskel på 1 % i ændringen fra baseline i omega-3-indekset mellem dem, der spiser berigede fødevarer versus dem, der spiser kontrolfødevarer, ved en 2-sidet alfa. -niveau på 0,05.

REFERENCER

1. Globalt Panel om Landbrug og Fødevaresystemer til Ernæring 2020. Fremtidens fødevaresystemer: For mennesker, vores planet og velstand. London. Storbritannien.
2. Institute for Health Metrics and Evaluation (2018) GBD Sammenlign. Seattle, WA: IHME, University of Washington. http://vizhub.healthdata.org/gbd-compare. (tilgået maj 2023).
3. GBD 2017 Kostsamarbejdspartnere. Sundhedseffekter af kostrisici i 195 lande, 1990-2017: en systematisk analyse for den globale byrde af sygdomsstudie 2017. Lancet. 393, 1958-1972 (2019).
4. Chowdhury, R. et al. Sammenhæng mellem fiskeforbrug, langkædede omega 3-fedtsyrer og risiko for cerebrovaskulær sygdom: systematisk gennemgang og meta-analyse. BMJ. 345, e6698 (2012).
5. Chowdhury, R. et al. Sammenslutning af diætetiske, cirkulerende og supplerende fedtsyrer med koronar risiko: en systematisk gennemgang og meta-analyse. Ann. Praktikant. Med. 160, 398-406 (2014).
6. Mozaffarian, D. et al. Plasma phospholipid langkædede -3 fedtsyrer og total og årsagsspecifik dødelighed hos ældre voksne - en kohorteundersøgelse. Ann. Praktikant. Med. 158, 515-525 (2013).
7. de Oliveira Otto, M.C. et al. Cirkulerende og diætetiske omega-3 og omega-6 flerumættede fedtsyrer og forekomst af CVD i den multietniske undersøgelse af aterosklerose J. Am. Hjerte. Assoc. 2, 1-17 (2013).
8. Albar SA. Diætmæssig Omega-6/Omega-3 flerumættet fedtsyre (PUFA) og Omega-3 er forbundet med generel og abdominal fedme hos voksne: UK National Diet and Nutritional Survey. Cureus. 2022 12. oktober;14(10):e30209. doi: 10.7759/cureus.30209. PMID: 36381926; PMCID: PMC9650245.
9. Wu, A., Ding, Y., Wu, F., Li, R., Hou, J. & Mao, P. Omega-3 fedtsyreindtag og risici for demens og Alzheimers sygdom: en meta-analyse. Neurosci. Bioadfærd. Åb. 48, 1-9 (2015).
10. Lauritzen L, Brambilla P, Mazzocchi A, Harslof LB, Ciappolino V, Agostoni C. DHA-effekter i hjernens udvikling og funktion. Næringsstoffer 2016;8(1):6.
11. Oyen J, Kvestad I, Midtbo LK, Graff IE, Hysing M, Stormark KM, Markhus MW, Baste V, Froyland L, Koletzko B, et al. Indtag af fed fisk og kognitiv funktion: FINS-KIDS, et randomiseret kontrolleret forsøg i førskolebørn. BMC Med 2018;16(1):41.
12. Demmelmair H, Oyen J, Pickert T, Rauh-Pfeiffer A, Stormark KM, Graff IE, LieO, Kjellevold M, Koletzko B. Effekten af ​​atlantisk lakseforbrug på førskolebørns kognitive præstation - et randomiseret kontrolleret forsøg. Clin Nutr 2019;38(6):2558-68.
13. Teisen MN, Vuholm S, Niclasen J, Aristizabal-Henao JJ, Stark KD, Geertsen SS, Damsgaard CT, Lauritzen L. Effects of oily fish intake on cognitive and socioemotional function in sunde 8-9-year old children: the FiSK Junior randomiseret forsøg. Am J Clin Nutr 2020;00:1-10.
14. Sorensen LB, Damsgaard CT, Dalskov SM, Petersen RA, Egelund N, Dyssegaard CB, Stark KD, Andersen R, Tetens I, Astrup A, et al. Kosten inducerede ændringer i jern- og n-3-fedtsyrestatus og sammenhænge med kognitiv præstation hos 8-11-årige danske børn: sekundære analyser af det optimale velvære, udvikling og sundhed for danske børn gennem en sund ny nordisk kostskole Måltidsstudie. Br J Nutr 2015;114(10):1623-37.
15. Handeland K, Oyen J, Skotheim S, Graff IE, Baste V, Kjellevold M, Froyland L, Lie O, Dahl L, Stormark KM. Indtagelse af fed fisk og opmærksomhedspræstation hos 14-15-årige unge: FINS-TEENS-et randomiseret kontrolleret forsøg. Nutr J 2017;16(1):64.
16. EFSA Panel for Diætetiske Produkter, Ernæring og Allergier. Videnskabelig udtalelse om kostreferenceværdier for fedtstoffer, herunder mættede fedtsyrer, flerumættede fedtsyrer, monoumættede fedtsyrer, transfedtsyrer og kolesterol. EFSA Journal. 8(3), 1461 (2010).
17. US Department of Health and Human Services og US Department of Agriculture. 2015-2020 Kostvejledning for amerikanere. 8. Udgave. december 2015. Tilgængelig på http://health.gov/dietaryguidelines/2015/guidelines/ (2015).
18. Micha, R., et al. Globale, regionale og nationale forbrugsniveauer af diætfedt og -olier i 1990 og 2010: en systematisk analyse, herunder 266 landespecifikke ernæringsundersøgelser. BMJ. 348, g2272 (2014).
19. Golden, C.D. et al. Fald i fiskefangst truer menneskers sundhed. Natur. 534, 317-320 (2016).
20. Sprague, M., Dick, J.R. & Tocher, D.R. Indvirkning af bæredygtigt foder på omega-3 langkædede fedtsyreniveauer i opdrættet atlanterhavslaks, 2006-2015. Sci. Rep. 6, http://dx.doi.org/10.1038/srep21892 (2016).
21. Sprague, M., Fawcett, S., Betancor, M. B., Struthers, W., & Tocher, D. R. (2020). Variation i den ernæringsmæssige sammensætning af opdrættede atlanterhavslaks (Salmo salar L.) fileter med vægt på EPA og DHA indhold. Journal of Food Composition and Analysis, 94(august). https://doi.org/10.1016/j.jfca.2020.103618
22. Stark, K.D., Van Elswyk, M.E., Higgins, M.R., Weatherfordd, C.A. & Salem, N. Global undersøgelse af omega-3 fedtsyrer, docosahexaensyre og eicosapentaensyre, i blodstrømmen hos raske voksne. Prog. Lipid Res. 63, 132-152 (2016).
23. OmegaPro - Devenish [Internet]. www.devenishnutrition.com. [citeret 10. april 2023]. Tilgængelig fra: https://www.devenishnutrition.com/products-services/poultry/c/specialist-products1/omegapro
24. Stanton, A. V., James, K., Brennan, M. M., O'Donovan, F., Buskandar, F., Shortall, K., El-Sayed, T., Kennedy, J., Hayes, H., Fahey, A. G. , Pender, N., Thom, S. A. M., Moran, N., Williams, D. J., & Dolan, E. (2020). Omega-3-indeks og blodtryksreaktioner på at spise fødevarer, der er naturligt beriget med omega-3 flerumættede fedtsyrer: et randomiseret kontrolleret forsøg. Scientific Reports, 10(1), 1-10. https://doi.org/10.1038/s41598-020-71801-5
25. Burger, J., Gochfeld, M., Batang, Z., Alikunhi, N., Al-Jahdali, R., Al-Jebreen, D., Al-Suwailem, A. (2014). Fiskeforbrugsadfærd og rater hos indfødte og ikke-indfødte mennesker i Saudi-Arabien. Miljøundersøgelser. https://doi.org/10.1016/j.envres.2014.05.014
26. Khan, A. Q., Aldosari, F., & Hussain, S. M. (2018). Fiskeforbrugsadfærd og fiskeopdrætsholdning i Kongeriget Saudi-Arabien (KSA). Journal of the Saudi Society of Agricultural Sciences, 17(2), 195-199. https://doi.org/10.1016/j.jssas.2016.04.003.
27. Saudierne blandt verdens største forbrugere af kylling. Saudi Gazette den 14. marts 2016. http://english.alarabiya.net/da/business/markets/2016/03/14
28. GDD Survey Metadata Fil | Global kostdatabase [Internet]. globaldietarydatabase.org. [citeret 10. april 2023]. Tilgængelig fra: https://globaldietarydatabase.org/complete-survey-metadata
29. Bassam, T., Superko, H. R., Caulfield, M., (2015). Risikoen for hjertekarsygdomme, der tilskrives fiskeolie i blodet (omega-3-fedtsyrer), er signifikant forskellige hos saudiske mænd og kvinder. Journal of Saudi Heart Association. http://dx.doi:10.1016/j.jsha.2015.05.202
30. Harris, W. S. & Thomas, R. M. Biologisk variabilitet af blod omega-3 biomarkører. Clin. Biochem. 43, 338-340 (2010).
31. Harris, W. S., Varvel, S. A., Pottala, J. V., Warnick, G. R. & McConnell, J. P. Sammenlignende virkninger af en akut dosis fiskeolie på omega-3-fedtsyreniveauer i røde blodlegemer versus plasma: Implikationer for klinisk anvendelighed. J. Clin. Lipidol. 7, 433-440 (2013).
32. Metcalf, R.G. et al. Forholdet mellem blod og atrielle fedtsyrer hos patienter, der gennemgår hjerte-bypass-operation. Er. J. Clin. Nutr. 91, 528-534 (2010).
33. Fenton, J. I., Gurzell, E. A., Davidson, E. A. & Harris, W. S. PUFA'er af røde blodlegemer afspejler phospholipid-PUFA-sammensætningen af ​​større organer. Prostagl. Leukot. Essent. Fed. Syrer. 112, 12-23 (2016).
34. Harris, W. S., Del Gobbo, L. & Tintle, N. L. Omega-3-indekset og relativ risiko for koronar hjertesygdomsdødelighed: Estimering fra 10 kohortestudier. Åreforkalkning. 262, 51-54 (2017).
35. Kleber, M. E., Delgado, G. E., Lorkowski, S., Marz, W. & von Schacky, C. Omega-3 fedtsyrer og dødelighed hos patienter henvist til koronar angiografi. Ludwigshafen Risk and Cardiovascular Health Study. Åreforkalkning. 252, 175-181 (2016).
36. Harris, W. S., Tintle, N. L., Etherton, M. R. & Vasan, R. S. Erythrocyte langkædede omega-3-fedtsyreniveauer er omvendt forbundet med dødelighed og med hændelige hjerte-kar-sygdomme: The Framingham Heart Study. J. Clin. Lipidol. 12, 718-727 (2018).
37. Folch, J., Lees, M. & Stanley, G. H. S. En simpel metode til isolering og oprensning af totale lipider fra dyrevæv. J. Biol. Chem. 226, 497-509 (1957).
38. Moilanen, T. & Nikkari, T. Effekten af ​​opbevaring på fedtsyresammensætningen af ​​humant serum. Clin. Chim. Acta. 114, 111-116 (1981).