Resposta do índice ômega-3 ao consumo de alimentos de aves naturalmente enriquecidos com ácidos graxos poliinsaturados ômega-3

FUNDO

Nutrição e Saúde Estima-se que dietas abaixo do ideal sejam responsáveis ​​por 20% da mortalidade prematura (mediada por doenças) em todo o mundo e por 20% de toda a carga de doenças, conforme medido pelos anos de vida ajustados por incapacidade (DALYs). As ligações entre dieta e doença são cada vez mais entendidas como um fardo triplo, nomeadamente; subnutrição; fome oculta (dietas insuficientes em aminoácidos essenciais, ácidos graxos essenciais, vitaminas e minerais); e uma epidemia global de sobrepeso e obesidade [1]. No geral, as populações mundiais estão a consumir enormes excessos de calorias, açúcares e sal, enquanto a ingestão de cereais integrais, frutas, vegetais, frutos secos, sementes e marisco originam ácidos gordos poli-insaturados (PUFAs) ómega-3, na maioria dos países, independentemente de riqueza, são inadequados para a saúde [1,2].

Ácidos graxos poliinsaturados ômega-3 (PUFAs ômega-3) Existem quatro PUFAs ômega-3 de cadeia longa. O ácido alfa-linolênico (ALA 18:3n-3) é encontrado nas plantas. Os três PUFAs ômega-3 restantes, que são mais longos e mais insaturados (ácido eicosapentaenóico, EPA 20:5n-3, ácido docosapentaenóico, DPA 22:5n-3 e ácido docosahexaenóico, DHA 22:6n-3), estão em grande parte parte encontrada em frutos do mar oleosos.

PUFAs ômega-3 e saúde humana Dietas pobres em ácidos graxos ômega-3 provenientes de frutos do mar (ácido eicosapentaenóico (EPA) e ácido docosahexaenóico (DHA)), um exemplo de fome oculta, foram recentemente classificadas como o sexto risco dietético mais importante factor - 1,5 milhões de mortes e 33 milhões de DALYs em todo o mundo são atribuíveis a esta deficiência [2,3]. O consumo regular de peixes oleosos e níveis elevados de EPA e DHA no sangue estão fortemente associados à proteção contra ataques cardíacos, derrames, obesidade, depressão e demência na vida adulta [4-9]. Além disso, o DHA é essencial para o desenvolvimento do cérebro durante a primeira infância - baixas ingestões resultam em redução da capacidade intelectual e saúde mental, aprendizagem prejudicada na escola e eventuais oportunidades de vida mais pobres [10-15].

Ingestão e níveis de PUFAs ômega-3 em todo o mundo Apesar da maioria das diretrizes internacionais recomendarem o consumo de pelo menos uma porção por semana de peixes oleosos (>250 mg/dia de EPA e DHA) [16,17], a aceitação deste conselho é baixa. Muitas pessoas, especialmente crianças, não consomem nenhum marisco [18]. Além disso, os stocks de peixes selvagens a nível mundial estão a diminuir e são insuficientes para fornecer uma porção por semana à população mundial [19]. A aquicultura tem crescido constantemente nos últimos anos, mas a maioria dos peixes cultivados depende da suplementação de óleo de peixe proveniente da captura de peixes selvagens. Este tornou-se um recurso escasso, caro e insustentável. Consequentemente, os níveis de EPA e DHA nos peixes de viveiro caíram consideravelmente, de modo que agora são necessárias pelo menos duas porções/semana de salmão de viveiro para fornecer 250 mg/dia de EPA e DHA [20,21]. Portanto, não é surpreendente que, em todo o mundo, apenas uma pequena minoria (<20%) apresente níveis ótimos de PUFAs ômega-3 no sangue [22].

Enriquecimento de ômega-3-PUFA de alimentos comumente consumidos como uma solução para a deficiência mundial As algas fornecem uma fonte alternativa e mais sustentável de ômega-3-PUFAs. Esta é a base do Omega-Pro da Humanitiv, um alimento com óleo de algas originalmente desenvolvido pela Devenish Nutrition, que quando fornecido a aves e porcos, resulta em carne de frango, ovos e porco enriquecidos com ômega-3-PUFA. Testes de sabor mostraram que os alimentos enriquecidos são igualmente ou mais palatáveis ​​do que os alimentos padrão [23]. Um estudo randomizado duplo-cego controlado recentemente concluído em 161 adultos saudáveis ​​mostrou que o consumo regular de carne de frango e ovos enriquecidos com ômega-3-PUFA forneceu 120 mg/dia adicionais de EPA e DHA (48% da ingestão diária recomendada). O estudo relatou que não apenas o status de ômega-3 melhorou com a ingestão de alimentos naturalmente enriquecidos, mas a pressão arterial e a frequência cardíaca também foram reduzidas [24]. As conclusões e implicações deste estudo podem ser resumidas da seguinte forma;

• Carne de frango e ovos enriquecidos com ômega-3-PUFA oferecem aos consumidores uma opção ou alternativa adicional atraente ao consumo de peixes oleosos.
• Se aumentos semelhantes nos níveis de ômega-3-PUFA fossem alcançados globalmente, aos observados no estudo, 10-15% dos eventos cardiovasculares poderiam ser evitados e 1-2 anos adicionais de vida saudável poderiam ser alcançados.
• Ao contrário de muitas intervenções no estilo de vida, os benefícios para a saúde não dependem da vontade das pessoas em fazer mudanças dietéticas duradouras, mas da disponibilidade generalizada de uma gama de alimentos baratos, habitualmente consumidos e naturalmente enriquecidos.

Carga de doenças e status de ômega-3-PUFA na Arábia Saudita As doenças cardiovasculares, em particular a doença isquêmica do coração e o acidente vascular cerebral, são a principal causa de morbidade e mortalidade na Arábia Saudita, sendo responsáveis ​​por 44% de todas as mortes e 17% de todos os DALYs em 2017 [2]. Os transtornos mentais, incluindo a demência e a depressão de Alzheimer, foram recentemente classificados como a quarta causa mais importante da carga de doenças na Arábia Saudita, representando 9% de todos os DALYs [2]. O alto índice de massa corporal e os fatores de risco nutricionais são os 2 principais fatores de risco para problemas de saúde na Arábia Saudita [2].

Uma análise recente conduzida pela Global Burden of Disease Collaborators sugere que a deficiência de PUFA ômega-3 é um fator de risco nutricional ainda mais importante nos países do Oriente Médio do que globalmente (classificado em 4º lugar no Oriente Médio versus 6º em todo o mundo) [3].

Uma pesquisa publicada em 2014 descreveu o consumo muito regular de peixe entre os habitantes da cidade costeira de Jeddah - sauditas e não sauditas relataram a inclusão de peixe em uma média de 2,2 e 3,1 refeições/semana, respectivamente [25]. No entanto, a maioria das espécies de peixe consumidas eram peixes brancos e continham apenas quantidades modestas de DHA e EPA (intervalo 0-500mg/100g). Ainda mais preocupante é um segundo inquérito mais recente, realizado em Najran em 2018. Nesta província do interior, apenas 23% dos entrevistados relataram comer peixe pelo menos uma vez por semana, 31% relataram comer peixe apenas uma vez por mês e 12% nunca comeram peixe [26]. No geral, estima-se que cada cidadão saudita come menos de 9 kg de peixe por ano [27,28]. Por outro lado, estão entre os maiores consumidores mundiais de frango, cada um comendo aproximadamente 47 kg de carne de frango e 120 ovos por ano [27,28]. Em relação aos níveis sanguíneos de EPA e DHA na população saudita, um estudo de 2015 com 2.672 participantes (1.544 homens e 1.128 mulheres) relatou um índice médio de ômega-3 de 3,91% (desvio padrão 1,45%) [29]. Isto é consideravelmente inferior ao índice ideal de ômega-3 de 8% [22].

Justificativa do estudo Neste ensaio randomizado, duplo-cego e controlado, pretendemos quantificar o impacto do consumo regular de carne de frango e ovos enriquecidos com PUFA ômega-3 durante um período de quatro meses, em uma população saudita saudável.

FINS E OBJETIVOS DO ESTUDO.

O objetivo principal deste estudo será avaliar a resposta do índice de ômega-3 dos glóbulos vermelhos de adultos sauditas saudáveis ​​ao consumo regular de carne de frango e ovos enriquecidos com PUFA ômega-3. O índice ômega-3 dos glóbulos vermelhos é calculado como a soma de EPA e DHA expressa como uma porcentagem do total de ácidos graxos nas membranas dos eritrócitos (glóbulos vermelhos). O índice ômega-3 de glóbulos vermelhos foi escolhido como resultado primário do estudo, por causa de; sua menor variabilidade ao longo do tempo em comparação com os valores plasmáticos [30,31]; suas fortes correlações com os níveis de EPA e DHA no tecido cardíaco humano e em múltiplos órgãos relevantes em modelos animais [32,33]; e, finalmente, devido à sua previsão comprovada de eventos cardiovasculares e mortalidade por todas as causas [34-36].

Os objetivos secundários incluem;

• A avaliação das respostas de EPA, DPA e DHA de glóbulos vermelhos e plasmáticos ao consumo regular de carne de frango e ovos enriquecidos com PUFA ômega-3.
• A comparação dos níveis basais de glóbulos vermelhos e plasmáticos de EPA, DPA e DHA, entre residentes sauditas que consomem regularmente peixe oleoso com aqueles que não consomem regularmente peixe oleoso, e
• A avaliação sobre se as respostas do índice ômega-3 dos glóbulos vermelhos e plasmáticos aos alimentos enriquecidos com ômega-3-PUFA difere entre aqueles que incluem e aqueles que não incluem peixes oleosos em sua dieta semanal.

PROJETO DE TESTE.

Este será um estudo intervencionista duplo-cego randomizado. O ensaio será realizado de acordo com a Declaração de Helsinque.

PARTICIPANTES DO ESTUDO

80 participantes saudáveis, residentes na comunidade, serão recrutados para o estudo.

RANDOMIZAÇÃO E MASCARAMENTO

Os participantes serão randomizados para um dos dois braços;

• Intervenção Controle / Placebo: Consumo de pelo menos 4 porções de carne de frango padrão e pelo menos 4 ovos padrão por semana, durante 4 meses.
• Intervenção Experimental: Consumo de pelo menos 4 porções de carne de frango enriquecida com ômega-3-PUFA e pelo menos 4 ovos enriquecidos com ômega-3-PUFA por semana, durante 4 meses.

CONDUTA DO ESTUDO

Os participantes comparecerão ao centro de estudo nas visitas de triagem e linha de base e no final do estudo (mês 4). Eles serão contatados por telefone em intervalos mensais (meses 1, 2 e 3).

Na visita de triagem, um estilo de vida abrangente e histórico médico serão coletados, um questionário de frequência alimentar será preenchido para capturar a ingestão alimentar no ano anterior; um registro alimentar de 3 dias será organizado para capturar a ingestão alimentar atual dos participantes; e a satisfação dos critérios de inclusão e exclusão será avaliada.

Na visita inicial, se todos os critérios de inclusão e exclusão forem satisfeitos, os participantes serão randomizados para o braço de controle ou de intervenção do estudo.

Tanto nas consultas iniciais quanto no mês 4, serão medidos altura, peso, circunferência da cintura e do quadril, permitindo o cálculo do índice de massa corporal e da relação cintura-quadril. Nessas duas visitas clínicas, amostras de sangue em jejum serão coletadas para permitir a medição dos níveis plasmáticos e de glóbulos vermelhos de EPA, DPA e DHA, e também para permitir o armazenamento de alíquotas de plasma para medições de pesquisas futuras. Os participantes serão solicitados a jejuar, não beber chá ou café, não fumar e não praticar exercícios intensos a partir da meia-noite (mínimo 8 horas), antes das visitas iniciais e de final do estudo. Os participantes podem beber água e tomar medicamentos essenciais nessas manhãs.

Nas ligações telefônicas do mês 1, 2 e 3, e na visita do mês 4, será avaliada a frequência de consumo de carne de frango, ovos e peixe, durante a semana anterior, assim como os medicamentos concomitantes e o bem-estar do participante.

Os participantes serão solicitados a evitar tomar suplementos de PUFA ômega-3 de cadeia longa durante o estudo.

INTERVENÇÃO NUTRICIONAL

A carne e os ovos das aves serão enriquecidos pela alimentação das galinhas com uma ração completa que inclui algas, que são uma rica fonte de PUFAs ômega-3 (OmegaPro, Humanitiv, Meath, Irlanda). Frango enriquecido com PUFA ômega-3 (frangos inteiros, peitos, coxas e tambores) e ovos, ou o frango de controle apropriado e os ovos de controle, serão entregues nas casas dos participantes do estudo em intervalos regulares (semanalmente ou quinzenalmente), para que tanto eles quanto até três membros adicionais da família poderão comer pelo menos 4 porções de carne de frango por semana e pelo menos 4 ovos por semana durante o período de estudo de 4 meses. A carne de frango será entregue congelada e os ovos refrigerados.

MEDIÇÃO DOS NÍVEIS DE CÉLULAS VERMELHAS E PLASMA DE ÁCIDOS GRAXOS

A medição dos níveis plasmáticos e de glóbulos vermelhos de EPA, DPA e DHA será realizada em laboratório com experiência específica em análises lipídicas. Os lipídios totais serão extraídos do plasma e dos glóbulos vermelhos usando um método Folch modificado [37,38]. Os fosfolipídios serão separados dos lipídios neutros por cromatografia unidimensional em camada delgada. Os ésteres metílicos de ácidos graxos serão preparados por transesterificação direta e separados por cromatografia gasosa-espectrometria de massa, permitindo a quantificação de 28 picos distintos de ácidos graxos. Os níveis plasmáticos de PUFAs ômega-3 serão expressos em microgramas/grama e os níveis de glóbulos vermelhos como uma porcentagem do total de ácidos graxos nas membranas dos eritrócitos. O índice ômega-3 de eritrócitos ou glóbulos vermelhos é calculado como a soma de EPA e DHA expressa como porcentagem do total de ácidos graxos nas membranas dos eritrócitos.

ANÁLISE ESTATÍSTICA

Análises e relatórios O estudo será analisado com base na intenção de tratar. Estatísticas resumidas padrão (média, desvio padrão, mediana, intervalo,%) serão usadas para descrever as características iniciais dos participantes.

ANOVA de medidas repetidas será usada para comparar os 2 grupos de estudo. O estudo será relatado de acordo com a declaração CONSORT (Consolidated Standards of Reporting Trials) de 2010.

Considerações sobre o tamanho da amostra O desfecho primário será a mudança no índice de ômega-3 dos glóbulos vermelhos em 4 meses. Em estudos anteriores, o desvio padrão de medidas repetidas do índice ômega-3 eritrocitário foi de 0,5%. Portanto, com 80 participantes, o estudo terá mais de 95% de poder para detectar uma diferença de 1% na mudança da linha de base no índice de ômega-3 entre aqueles que comem alimentos enriquecidos versus aqueles que comem alimentos de controle, em um alfa bilateral. -nível de 0,05.

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