SuPAR u dorosłych pacjentów z Covid-19 (SPARCOL)

TŁO

Rozpuszczalny receptor aktywatora plazminogenu urokinazy

Biomarker rozpuszczalny receptor aktywatora plazminogenu urokinazy (suPAR) jest rozpuszczalną postacią związanego z błoną komórkową białka receptora aktywatora plazminogenu urokinazy (uPAR), którego ekspresja występuje głównie na komórkach odpornościowych, komórkach śródbłonka i komórkach mięśni gładkich. uPAR jest uwalniany podczas stanu zapalnego lub aktywacji immunologicznej, a zatem poziom suPAR odzwierciedla stopień aktywacji immunologicznej u danej osoby. Wszyscy ludzie mają wyjściowy poziom suPAR, który jest ustalany indywidualnie i wzrasta wraz z wiekiem. Badania wykazały, że poziom suPAR jest związany z chorobowością i śmiertelnością w wielu ostrych i przewlekłych chorobach oraz w populacji ogólnej. Poziom suPAR jest podwyższony we wszystkich chorobach i nie jest związany wyłącznie z jedną konkretną chorobą. Dlatego suPAR ma zastosowanie jako marker prognostyczny, a nie diagnostyczny. Ta cecha może być wykorzystana do stratyfikacji ryzyka u niewyselekcjonowanych pacjentów.

Pierwotnie udowodniono, że uPAR jest receptorem urokinazy (uPA), który rozkłada plazminogen na aktywną plazminę. Ponadto uPAR oddziałuje z innymi białkami i odgrywa rolę w kilku ważnych procesach komórkowych, takich jak migracja, adhezja, angiogeneza, proliferacja i chemotaksja. Białko suPAR zostało odkryte w 1991 roku, kiedy okazało się, że jest markerem progresji raka. W ostatnich latach kilka badań wykazało, że suPAR jest związany z wieloma chorobami przewlekłymi (w tym chorobami układu krążenia, wątroby, nerek i płuc), a jego poziom jest predyktorem negatywnego wyniku różnych chorób zakaźnych (gruźlica, HIV malaria, posocznica, zapalenie opon mózgowych, zapalenie płuc) oraz u pacjentów w stanie krytycznym.

We wszystkich chorobach poziom suPAR odróżnia osoby, które nie przeżyły, od osób, które przeżyły. SuPAR odzwierciedla poziom przewlekłego stanu zapalnego, dlatego był badany jako potencjalny marker rozwoju chorób, a badania wykazały, że podwyższony poziom prognozuje rozwój chorób przewlekłych i nowotworów w populacji ogólnej. Poziom suPAR we krwi jest stabilny, bez wahań dobowych i po poście, podczas gdy suPAR można mierzyć we krwi, osoczu, moczu, płynie mózgowo-rdzeniowym, płynie puchlinowym i płynie opłucnowym. Poziom wzrasta i maleje odpowiednio wraz z postępem i poprawą choroby, ale wolniej w porównaniu np. Białko C-reaktywne (CRP). Normalny poziom suPAR w osoczu wynosi 2-3 ng/ml u osób zdrowych, około 3-4 ng/ml u niewyselekcjonowanych pacjentów na oddziałach ratunkowych i około 9-10 ng/ml u pacjentów w stanie krytycznym.

suPAR w intensywnej terapii

U krytycznie chorych poziom suPAR jest znacząco podwyższony. suPAR jest niezależnym markerem prognostycznym, a zmiana w czasie koreluje z dysfunkcją narządu. SuPAR jest podwyższony i ma wartość prognostyczną u pacjentów z: SIRS (zespół ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej), posocznicą/wstrząsem septycznym, oparzeniami i urazowymi uszkodzeniami mózgu. Poziom suPAR odzwierciedla odpowiedź immunologiczną organizmu na infekcje, a poziom ten wzrasta wraz z ciężkością infekcji. U pacjentów z dysfunkcjami narządowymi wartość suPAR jest często wartością dwucyfrową. W szczególności dysfunkcja wątroby i nerek wpływa na poziom suPAR. suPAR badano u pacjentów z SIRS, którzy zostali przyjęci w trybie pilnym na oddział ratunkowy (n=902). Badania wykazały, że suPAR jest silniejszym markerem śmiertelności 2-dniowej, 30-dniowej i 90-dniowej niż wiek, CRP, IL-6, kreatynina i prokalcytonina. Jednak do celów diagnostycznych IL-6 i CRP są lepsze niż suPAR w przewidywaniu dodatniego posiewu krwi. Greckie wieloośrodkowe badanie obejmujące 1914 pacjentów z sepsą wykazało, że suPAR jest silnym predyktorem śmiertelności, a poziom suPAR powyżej 12 ng/ml wiąże się z >80% wrażliwością na śmiertelność i ujemną wartością predykcyjną wynoszącą 94,5%. Ponadto wartość prognostyczna suPAR u pacjentów z sepsą jest niezależna od odpowiednich zmiennych towarzyszących, takich jak wynik APACHE, CRP itp.

U pacjentów z oparzeniami i urazami wziewnymi wymagającymi wentylacji mechanicznej stężenie suPAR w osoczu i płyn z popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych korelują z IL-6 i czynnikami krzepnięcia. Podwyższony poziom suPAR w osoczu jest związany z przedłużonym pobytem na Oddziale Intensywnej Terapii (OIOM) i czasem trwania wentylacji mechanicznej. Poziom suPAR jest podwyższony u pacjentów z urazowym uszkodzeniem mózgu. U pacjentów urazowych, którzy doznali urazu mózgu w ciągu 12 godzin przed pobraniem krwi, średni poziom suPAR wynosi 14,9 ng/ml ± 6,9 w porównaniu z 2,8 ng/ml ± 0,7 u osób kontrolnych. U tych pacjentów suPAR wiąże się z ciężkością uszkodzenia mózgu i śmiertelnością.

suPAR i zespół ostrej niewydolności oddechowej

Śmiertelność pacjentów z zespołem ostrej niewydolności oddechowej (ARDS) jest wysoka. Markery biologiczne oraz systemy oceny ciężkości choroby mogą być przydatne do stratyfikacji ryzyka i tworzenia jednorodnych grup pacjentów w badaniach klinicznych. Jednak obecnie nie stwierdzono, aby pojedynczy marker biologiczny miał wystarczającą wartość dyskryminacyjną do dokładnego przewidywania śmiertelności lub podejmowania decyzji przyłóżkowych u pacjentów z ARDS w warunkach klinicznych. opublikowane w 2015 roku. W tym badaniu poziomy suPAR w osoczu były wyższe wraz ze wzrostem nasilenia ARDS i wyższe u pacjentów, którzy zmarli na OIOM-ie. Ponadto wyższe poziomy suPAR w osoczu były związane z mniejszą liczbą dni bez respiratora i OIT.

W prospektywnym, wieloośrodkowym badaniu obserwacyjnym, w którym uczestniczyli mechanicznie wentylowani pacjenci OIOM, niskie stężenia suPAR przewidywały przeżycie, a wysokie stężenia — terapię nerkozastępczą i śmiertelność. Autorzy doszli do wniosku, że SuPAR może być stosowany do badań przesiewowych pacjentów z potencjalnie dobrym przeżyciem, podczas gdy jego powiązanie z terapią nerkozastępczą może stanowić wczesny sygnał ostrzegawczy ostrej niewydolności nerek. Kilku innych autorów oceniło wartość predykcyjną suPAR w odniesieniu do ryzyka ARDS u pacjentów z sepsą i zgłosiło korelację/związek z ciężkością choroby, stanem zapalnym i śmiertelnością.

CEL

SPARCOL to wieloośrodkowe badanie obserwacyjne, którego celem jest zbadanie, czy wartość suPAR mierzona przy przyjęciu może przewidywać ryzyko przyszłych powikłań i śmiertelności u dorosłych pacjentów z Covid-19.

METODY

Projekt

Jest to prospektywne badanie obserwacyjne zaprojektowane zgodnie z deklaracją helsińską. Badanie zostanie zarejestrowane na stronie Clinical Trials.gov i zostało zatwierdzone przez Institutional Review Board of the University Hospital of Larisa, pod numerem referencyjnym 17543. Badanie zostanie zatwierdzone przez IRB każdego z uczestniczących ośrodków.

Kwalifikacja pacjenta

Kryteriami włączenia będą: (1) dorośli (≥18 lat) pacjenci hospitalizowani głównie z powodu COVID-19; (2) potwierdzone zakażenie SARS-CoV-2 zdiagnozowane za pomocą testu reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą próbek wymazu z jamy nosowo-gardłowej lub ustno-gardłowej; oraz (3) co najmniej jedną próbkę krwi pobraną przy przyjęciu i przechowywaną do badania biomarkerów. Pacjenci z potwierdzoną infekcją SARS-CoV-2, którzy nie będą przyjmowani pierwotnie z powodu COVID-19 oraz pacjenci z niepełnymi danymi zostaną wykluczeni.

Pobieranie próbek i pomiary laboratoryjne

Uczestnicy zostaną poddani pobraniu krwi żylnej obwodowej bezpośrednio po przyjęciu. Próbki krwi pobrane od wszystkich pacjentów oraz osocze EDTA będą przechowywane w temperaturze -80°C do późniejszego pomiaru. Poziomy suPAR w osoczu zostaną określone przy użyciu testu suPARnostic® ELISA (ViroGates, Dania), który jest oparty na uproszczonym teście ELISA z podwójnym przeciwciałem monoklonalnym kanapkowym, w którym próbki i anty-suPAR skoniugowane z peroksydazą są najpierw mieszane razem, a następnie inkubowane w anty-suPAR wstępnie powlekane mikrodołki. Standardy rekombinowanego suPAR w zestawie są kalibrowane względem próbek zdrowych ludzkich dawców krwi. Stężenia suPAR określa się jako ng/ml osocza.

Wyniki

Pierwszorzędowym punktem końcowym będzie obecność powikłań ze strony układu oddechowego [konieczność wentylacji nieinwazyjnej (CPAP-BiPAP, wysokiego przepływu tlenu do nosa lub wentylacji mechanicznej]), przyjęcie na OIOM i przeżycie po 30 dniach.

Drugorzędowymi punktami końcowymi będą niedociśnienie (zdefiniowane jako skurczowe ciśnienie krwi

Gromadzenie i monitorowanie danych

Analiza danych będzie oparta na predefiniowanych punktach danych na prospektywnym formularzu zbierania danych. Personel będzie zaślepiony na pomiary do końca badania, a wszystkie dane zostaną przeanalizowane. Monitorowanie kliniczne podczas całego badania będzie prowadzone w celu maksymalizacji przestrzegania protokołu, podczas gdy niezależny personel badawczy ds. monitorowania danych i bezpieczeństwa będzie monitorował aspekty bezpieczeństwa, etyczne i naukowe badania. Gromadzenie danych obejmie również dane demograficzne, ogólną morfologię krwi, białko C-reaktywne, APACHE II i SOFA.

Zarządzanie danymi

Celem planu zarządzania danymi klinicznymi jest dostarczenie danych wysokiej jakości poprzez przyjęcie ustandaryzowanych procedur w celu zminimalizowania liczby błędów i braków danych, a w konsekwencji wygenerowanie dokładnej bazy danych do analizy. Zdalne monitorowanie zostanie przeprowadzone w celu zasygnalizowania wczesnych nieprawidłowych wzorców, problemów ze spójnością, wiarygodnością i innych anomalii. Wszelkie brakujące i odstające wartości danych będą indywidualnie korygowane i uzupełniane lub korygowane, gdy tylko będzie to możliwe.

Wielkość próbki

Badanie to obejmie około 500 pacjentów. Na podstawie międzynarodowych i krajowych danych epidemiologicznych przewidujemy, że około 30% włączonych pacjentów osiągnie pierwszorzędowe punkty końcowe.

Etyka i rozpowszechnianie

Badanie zostanie przeprowadzone zgodnie z krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi. Badanie rozpocznie się po uzyskaniu zgody Szpitalnej Instytucjonalnej Komisji Rewizyjnej, zgodnie z lokalnymi przepisami. Prospektywna pisemna świadoma zgoda zostanie poproszona przed włączeniem wszystkich kwalifikujących się pacjentów na podstawie decyzji Komisji Rewizyjnej.

Konkurujące interesy Nie zadeklarowano.