Opracowanie ksenoprzeszczepów pochodzących od pacjentów (PDX) oraz analiza ekspresji receptorów kinazy tyrozynowej u pacjentów z płaskonabłonkowym rakiem głowy i szyi (HNSCC) w celu badania mechanizmów oporności indukowanych przez standardową terapię (SPAR)

1. Identyfikacja Protokołu i Status Administracyjny Akronim Badania: SPAR Data Protokołu: 04-02-2026 Wersja: 3 (Zastępuje wersję 1 z 26/11/2025) Czas Trwania Badania: łącznie 6,5 roku (5 lat rekrutacji/selekcji, 8-12 miesięcy na ekspansję PDX, 3 miesiące analizy molekularnej, 2 miesiące analizy danych) Główny Badacz: Mattia Lauriola Instytucja Koordynująca: IRCCS Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna (Policlinico S. Orsola) 2. Podłoże Naukowe i Uzasadnienie Rak Płaskonabłonkowy Głowy i Szyi (HNSCC) pozostaje globalnym wyzwaniem zdrowotnym, będąc siódmym najczęstszym nowotworem z około 890 000 nowych przypadków i 450 000 zgonów rocznie. Problem Oporności Chociaż standardowe terapie obejmują chirurgię, chemioterapię i radioterapię, ostatnie innowacje, takie jak inhibitory PD-1 (pembrolizumab, nivolumab), przynoszą korzyści tylko 20-30% pacjentów. Cetuksymab (CTX), przeciwciało monoklonalne anty-EGFR, jest standardowym leczeniem, ale nabyta oporność jest częstą przeszkodą. Hipoteza Biologiczna Oporność jest często napędzana przez: Omijanie RTK: Aktywacja alternatywnych receptorów kinazy tyrozynowej (RTK), takich jak MET, AXL, IGFR1 i MERTK. Interakcje Rodziny ERBB: Rodzina ERBB (EGFR, HER2, HER3, HER4) wykorzystuje złożoną heterodimeryzację do utrzymania sygnalizacji pomimo inhibicji EGFR. Szlaki Sygnałowe: Aktywacja dalszych szlaków RAS i PI3K/AKT, a także zmiany w mikrośrodowisku guza (np. cytokiny, markery EMT). Projekt SPAR ma na celu rozwiązanie tego problemu poprzez rozwój unikalnych włoskich modeli ksenoprzeszczepów pochodzących od pacjenta (PDX) do badania tych specyficznych mechanizmów oporności. 3. Cele Badania i Wyniki Cel Pierwszorzędowy Cel: Opracowanie zestawu modeli PDX HNSCC. Metoda: Implantacja próbek guza chirurgicznego do myszy z upośledzoną odpornością. Ocena: Sukces oceniany jest 2-3 miesiące po implantacji. Cele Drugorzędowe Charakterystyka Molekularna: Kompleksowa analiza ekspresji RTK (EGFR, HER2, HER3, HER4, MET, AXL, IGFR1, MERTK) i ich ligandów (np. NRG1-4, EGF, HGF). Zakres Technologiczny: Wykorzystanie NGS (genomiki i transkryptomiki), RT-qPCR, ddPCR, ELISA, Western Blot i technologii QF-Pro do mapowania krajobrazu guza. Wirusologia: Wykrywanie genotypów HPV i obecności transkryptów onkogenów wirusowych (E6). 4. Projekt Badania i Metodologia Jest to nienastawione na zysk, obserwacyjne, przekrojowe badanie wykorzystujące zarówno kohorty retrospektywne, jak i prospektywne. Faza Retrospektywna (n = 40) Źródło Próbek: Zarchiwizowane materiały FFPE (utrwalone formaliną i zatopione w parafinie) z ostatnich 10 lat w IRCCS AOU Bologna. Populacja: Pacjenci leczeni Cetuksymabem (zarówno w zaawansowanym miejscowo, jak i w ustawieniach R/M). Kryteria Włączenia: Pacjenci muszą mieć odpowiedni materiał biologiczny do analizy immunohistochemicznej/molekularnej. Faza Prospektywna (n = 80) Czas Trwania: Rekrutacja przez 5 lat. Źródło: Pacjenci poddawani operacji HNSCC w IRCCS S. Orsola. Rozwój PDX: Świeże próbki guza/krwi pobierane podczas standardowej opieki. Wykonalność: Badacze szacują 30% wskaźnik sukcesu w rozwoju PDX, dążąc do wystarczającej liczby modeli dla solidnego biobanku. 5. Procedury Kliniczne i Zarządzanie Danymi Ocena Kliniczna Badanie to nie wprowadza eksperymentalnych leków; jest zgodne z "zwykłą opieką" pacjenta. Pacjenci w terapii są widywani co 2-3 tygodnie; pacjenci nieaktywni terapeutycznie są obserwowani co 3 miesiące przez pierwsze 2 lata, a następnie co 6 miesięcy przez kolejne 3 lata. Zarządzanie Danymi Platforma: Dane są rejestrowane w pseudonimizowanym elektronicznym Formularzu Raportowania Przypadków (eCRF) przy użyciu platformy REDCap. Personel: Główny Badacz prowadzi rejestr delegacji obowiązków zarządzania danymi. Analiza Statystyczna: Przeprowadzana przy użyciu GraphPad Prism (w. 9.5.0). Dane demograficzne są raportowane jako częstości (kategoryczne) lub średnia/mediana (ciągłe). 6. Etyka i Zgodność Regulacyjna Świadoma Zgoda Pisemna świadoma zgoda jest obowiązkowa do udziału. Przypadek Specjalny (Zmarli/Nieosiągalni Pacjenci): Dla kohorty retrospektywnej, jeśli pacjenci są zmarli lub nieosiągalni pomimo rozsądnych wysiłków, badacze mogą kontynuować bez wyraźnej zgody na podstawie art. 110, D.Lgs 196/2003, pod warunkiem spełnienia wymagań Włoskiego Organu Ochrony Danych. Ubezpieczenie i Zmiany Jako badanie obserwacyjne, nie jest wymagane ubezpieczenie specyficzne dla badania. Wszelkie zmiany w protokole muszą być zgłaszane Komitetowi Etyki jako formalne poprawki. 7. Dystrybucja i Powtarzalność Otwarta Nauka: Badanie zostanie zarejestrowane na platformach takich jak clinicaltrials.gov lub osf.io. Publikacja: Badacz zobowiązuje się do przesłania wyników do recenzowanego czasopisma w ciągu 12 miesięcy od zakończenia badania, niezależnie od wyników. Udostępnianie Danych: Anonimowe dane będą udostępniane dopiero po publikacji.