Badanie składników krwi jako prawdopodobnych prognostycznych i predykcyjnych markerów odpowiedzi na leczenie w zaawansowanym raku okrężnicy i odbytnicy (BMACR)

Główną przyczyną śmiertelności związanej z rakiem jest rozprzestrzenianie się komórek nowotworowych do odległych miejsc (mikroprzerzuty). Jednak tylko kilka małych grup komórek nowotworowych może dawać przerzuty, nabywając mechanizm zmniejszania odpowiedzi immunologicznej. Zmiany ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej na nowotwór można mierzyć za pomocą parametrów krwi. W szczególności oceniono odsetek neutrofili-limfocytów (NL) w celu przewidywania przeżycia pacjentów z różnymi typami raka. Pierwszą strategią leczenia raka jelita grubego (CCR) jest całkowita resekcja zmiany. Niemniej jednak niektórzy pacjenci doświadczają nawrotu, prawdopodobnie z powodu resztkowych mikroprzerzutów. Wykazaliśmy, że analiza niektórych białek oporności (Tyms / MRP1) w krążących komórkach nowotworowych (CTC) może przewidywać odpowiedź na leczenie u pacjentów z CCR z przerzutami (mCRC). Zauważamy również, że kinetyka CTC może wykazywać odpowiedź na terapię. Pacjenci z chorobą w stadium III w okrężnicy / odbytnicy, chociaż wykazują wysoki wskaźnik wyleczeń, generalnie upadają lokalnie lub zdalnie, a badania z użyciem markerów krwi w tej grupie pacjentów są nadal rzadkie. Cel główny: Zbadanie komórek znajdujących się we krwi (limfocyty i neutrofile oraz CTC) w celu sprawdzenia, czy mogą one pomóc w wyborze terapii przeciwnowotworowej u pacjentów z zaawansowanym rakiem okrężnicy i odbytnicy. Cele drugorzędne: - ocena wpływu kinetyki CTC na odpowiedź na leczenie pacjentów z zaawansowanym rakiem okrężnicy/odbytnicy; - sprawdzenie ekspresji białek oporności na leczenie, inwazji i proliferacji (Tyms, TGF-βR, MMP-2, β-gal, Ki-67 i CD45) w CTC i ich korelacji z odpowiedzią na leczenie; - sprawdzenie ekspresji mRNA tych samych genów obserwowanej immunocytochemicznie w CTC i ich korelacji z odpowiedzią na leczenie; - ilościowe określenie CTC, neutrofili i limfocytów pacjentów włączonych do tego badania i zweryfikowanie, czy istnieje korelacja między ich wskaźnikami a czasem przeżycia bez progresji choroby. Metody: od pacjentów z zaawansowanym rakiem okrężnicy i odbytnicy zostanie pobrane 10 ml krwi do analizy CTC, limfocytów/neutrofili. CTC zostaną wyizolowane, oznaczone ilościowo i przeanalizowane po rozdzieleniu metodą ISET (Rarecells/Francja). Analiza markerów tych komórek zostanie przeprowadzona za pomocą immunocytochemii, a ekspresja genów zostanie oceniona za pomocą RNAscope. Oznaczenie ilościowe limfocytów/neutrofili zostanie wykonane na podstawie zwykłej morfologii krwi w laboratorium Delboni. Oczekiwane wyniki: Proponujemy pokazać, że nie tylko liczba i kinetyka CTC, ale także ich charakterystyka molekularna może dostarczyć istotnych informacji klinicystom. Mamy nadzieję, że dzięki ilościowemu określeniu liczby neutrofili i limfocytów będziemy w stanie zidentyfikować nowe prognostyczne biomarkery krwi, które mogą skierować klinicystów na najlepszy wybór terapeutyczny.