Wpływ mechanicznego przygotowania jelita na mikroflorę przewodu pokarmowego

Procedura mechanicznego przygotowania jelita (BP), która bezpośrednio poprzedza endoskopię okrężnicy, powoduje znaczne zmniejszenie zgłaszanych objawów kilku zaburzeń jelitowych (np. zespołu jelita drażliwego (IBS)), ale jak dotąd istnieje niewiele dowodów potwierdzających badania. Ta propozycja wykorzysta solidny projekt eksperymentalny do zbadania zarówno składu mikroflory, jak i, co ważne, jej aktywności metabolicznej w celu oceny interakcji z ludzkimi żywicielami po BP. Celem tego badania pilotażowego jest wygenerowanie danych wykazujących destabilizujący wpływ BP zarówno na skład, jak i aktywność metaboliczną mikroflory jelitowej.

Jeśli hipoteza zostanie potwierdzona, badanie to wykaże, że BP generuje „okno możliwości”, w którym można wpłynąć na późniejsze przywrócenie mikroflory. Ma to ostatecznie na celu skorygowanie dysbiozy i zapobieganie rozwojowi objawowej, niepowikłanej choroby uchyłkowej u pacjentów z uchyłkowatością.

Tło Choroba uchyłkowa, charakteryzująca się osłabieniem podtrzymującej tkanki łącznej ściany okrężnicy, prowadząca do powstawania uchyłków1, jest nieco zaniedbywana i nie poświęca się jej naukowej uwagi, tak jak inne choroby zapalne jelit. Pomimo tego stanu dotykającego 50% naszej starzejącej się populacji, z czego około 1/5 rozwinie wyniszczającą objawową niepowikłaną chorobę uchyłkową (SUDD)2, istnieje niedostatek wiedzy w tej dziedzinie.

Czynniki determinujące przejście od bezobjawowej uchyłkowatości do SUDD są niejasne. Jednak mikroflora jelitowa została powiązana z niedawnymi badaniami na małą skalę, które korelowały uchyłkowatość z wyczerpaniem klastra IV Clostridium. Klaster Clostridium IX, Fusobacterium i Lactobacillaceae, z których wszystkie mogą wywierać działanie przeciwzapalne. Pacjenci zgłaszający się z niespecyficznym bólem brzucha po lewej stronie i biegunką są oceniani za pomocą endoskopii okrężnicy. Badanie na małą skalę wykazało, że procedura ta spowodowała również znaczną redukcję Lactobacillaceae w populacji kontrolnej po 1 miesiącu (n=10).

BP otrzymuje się 14 i 20 godzin przed kolonoskopią i polega na doustnym podaniu różnych środków przeczyszczających o działaniu pobudzającym (np. Moviprep - glikol polietylenowy), co powoduje ostrą biegunkę i całkowite usunięcie masy kałowej z jelita. Jest prawdopodobne, że to BP jest zaangażowane w jakąkolwiek redukcję zgłaszanych objawów w przeciwieństwie do samej procedury endoskopowej, chociaż domniemane mechanizmy leżące u jej podstaw nie zostały jeszcze zidentyfikowane.

Hipoteza: Przygotowanie jelita do endoskopii destabilizuje mikroflorę jelitową u pacjentów z uchyłkowatością. Przywrócenie tej mikroflory następuje po zmienionej trajektorii rozwojowej, co skutkuje trwałymi zmianami w składzie mikroflory. Co więcej, te obserwowane zmiany będą miały konsekwencje funkcjonalne, jak zidentyfikowano poprzez zmienione interakcje metaboliczne na interfejsie mikrob-gospodarz.

Cele i zadania:

1. Kwantyfikuj trwałe zmiany obserwacyjne, które zachodzą w grupach funkcjonalnych mikroflory jelitowej po BP (technologia HTP FISHflow).
2. Ocenione zostaną funkcjonalne konsekwencje takich zmian w metabolizmie gospodarza, kometabolizmie gospodarz-drobnoustroj i produkcji krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych (odpowiednio spektroskopia magnetycznego rezonansu jądrowego i chromatografia gazowa).
3. Techniki integracji danych statystycznych pozwolą zidentyfikować powiązania między zmienioną mikroflorą a profilami metabolicznymi, aby rozpocząć określanie mechanizmów leżących u podstaw wpływu mikroflory jelitowej na uchyłkowatość.
4. Powyższe wyniki pozwolą określić, czy po BP pojawia się „okno możliwości”, które można wykorzystać do naprawienia dysbiozy jako podstawy do późniejszych badań na większą skalę.

Eksperymentalny projekt

W celu oceny wpływu BP na mikroflorę okrężnicy w uchyłkowatości, kobiety po menopauzie z łagodnym niespecyficznym bólem brzucha po lewej stronie i biegunką, które zostały skierowane na oddział jelita grubego w Royal Berkshire Hospital, zostaną zrekrutowane przez wnioskodawcy (KT, PC). Pacjenci, którzy nie otrzymywali antybiotyków w ciągu ostatnich 3 miesięcy, wypełnią kwestionariusz w celu oceny objawów żołądkowo-jelitowych, który będzie oparty na tych stosowanych w naszych poprzednich badaniach zespołu jelita drażliwego u ludzi (IBS). Mocz zostanie pobrany w t=0 (przed BP), t=2d (24h po BP), t=8d (1 tydzień po BP) i t=3 miesiące (po wezwaniu do szpitala). Kał będzie zbierany w tych samych punktach czasowych, z wyjątkiem t=2d, zamiast tego wymagana będzie pierwsza mikcja po BP. Pacjenci otrzymują doustne BP pocztą lub odbierają ich z oddziału endoskopii, a my wykorzystamy to do dostarczenia pojemników na próbki kału. Próbki zostaną dostarczone do szpitala i natychmiast zamrożone lub pacjenci zostaną poproszeni o zamrożenie i przyniesienie ich na umówioną wizytę. Późniejsze próbki (t-8d, t=3 miesiące) będą przechowywane w domu w stanie zamrożonym, a następnie pobrane przez personel University of Reading po pobraniu obu próbek. Po pobraniu pacjenci otrzymają kwestionariusz (i zaadresowaną do siebie kopertę), aby umożliwić porównanie ich objawów 2 tygodnie i 3 miesiące po BP z objawami zgłoszonymi wcześniej (t=0).