Wykrywanie mutacji IDH2 i monitorowanie resztkowej choroby molekularnej u pacjentów z AML

Stwierdzono, że dehydrogenaza izocytrynianowa 2 (IDH2) jest jednym z powtarzających się mutacji genów w ostrej białaczce szpikowej, co wskazuje na jej krytyczną rolę w leukemogenezie. Mutacje IDH2 stanowią około 10-20% pacjentów z AML. Stwierdzono, że mutacja IDH2 jest związana z wytwarzaniem 2-HG, które zakłóca metylację histonów i modyfikację DNA, powodując częściowe zablokowanie różnicowania komórek szpiku. W modelu przedklinicznym wykazano, że inhibitory IDH odwracają blokadę różnicowania w komórkach nowotworowych. Trwa ocena inhibitorów IDH2 w badaniach klinicznych fazy I/II. Analiza mutacji IDH2 u pacjentów z AML pomoże zidentyfikować pacjentów z AML, którzy mogliby odnieść korzyść z leczenia inhibitorem IDH.

Zbadane zostaną próbki szpiku kostnego od 300 dorosłych pacjentów (>20 lat) z nowo zdiagnozowaną AML od 1 stycznia 2014 r., którzy otrzymywali standardową chemioterapię w szpitalach, które przystąpiły do ​​programu Ministerstwa Zdrowia i Opieki Społecznej AML. Komórki jednojądrzaste są ekstrahowane z próbek szpiku kostnego podczas wstępnej diagnozy. Analiza mutacji eksonu 4 genu IDH2 zostanie przeprowadzona przez amplifikację PCR, a następnie pirosekwencjonowanie w celu wykrycia mutacji IDH2-R140 i R172 oraz poziomów mutacji. Próbki kontrolne pacjentów będących nosicielami mutacji IDH2 w momencie osiągnięcia remisji hematologicznej, kolejne próbki w różnych punktach czasowych, w tym co najmniej po dwóch chemioterapiach poremisyjnych, na koniec terapii i następnie co 3 miesiące w pierwszym roku, a następnie co 6 miesięcy do 24 miesięcy, jak również w czasie nawrotu, będzie mierzone za pomocą ilościowej LNA PCR w czasie rzeczywistym z testem sondy TaqMan w celu określenia zmian poziomów mutantów IDH2.