Zmiany szczytowego utleniania tłuszczu i sprawności aerobowej w okresie przedsezonowym u subelitarnych piłkarzy

Do badania zostaną zrekrutowane trzy subelitarne drużyny piłkarskie z okolic Kopenhagi. Badanie obejmie dwie wizyty w naszym laboratorium oraz testy terenowe w okresie przedsezonowym.

Zanim uczestnicy zgłosili się na ochotnika do udziału i podpisali pisemny formularz świadomej zgody, uczestnicy otrzymali pisemną i ustną informację o treści i możliwych zagrożeniach związanych z badaniem.

Uczestnicy przybyli do laboratorium po całonocnym poście (najpóźniej od 22:00). Ponadto uczestnicy zostali poproszeni o unikanie forsownych ćwiczeń na 48 godzin przed dniem testu i przestrzeganie zwykłej diety, którą trzeba było powtórzyć przed drugą wizytą.

Badania w naszym laboratorium obejmują:

• Pomiary antropometrii wzrostu i wagi.
• Pomiar składu ciała za pomocą absorpcjometrii rentgenowskiej o podwójnej energii (DXA).
• Pomiar VO2max metodą bezwysiłkową opartą na sejsmokardiografii.
• Pobranie spoczynkowej krwi żylnej o objętości 15 ml do pomiarów spoczynkowych poziomów hormonów, metabolitów i lipidów w osoczu krwi.
• Pomiar PFO i Fatmax podczas stopniowego submaksymalnego testu biegowego na bieżni napędzanej silnikiem.
• Pomiar VO2max na bieżni napędzanej silnikiem.
• Kwestionariusz dotyczący poprzedniego i obecnego poziomu piłkarskiego, liczby lat aktywności, pozycji w grze itp.

Procedura i analiza:

Skanowanie DXA: Uczestnicy zostaną umieszczeni w pozycji leżącej w skanerze DXA (Lunar iDXA, GE Healthcare) po oddaniu mikcji iw skąpym ubraniu.

Próbki krwi: Próbki krwi zostaną pobrane z żyły cubiti medialis w przedramieniu. Krew zostanie pobrana do mrożonych pojemników próżniowych BD (5 ml aprotyniny, 4 ml EDTA i 2 ml heparyny litowej) i natychmiast odwirowana przy 4000 g przez 10 minut w temperaturze 4⁰C (Rotina 380R, Hettich). Osocze będzie pobierane i przechowywane w temperaturze -80⁰C do późniejszych analiz spoczynkowych poziomów metabolitów, lipidów i hormonów.

Stężenia hemoglobiny, hematokrytu, glukozy i mleczanu zostaną natychmiast zanalizowane poprzez pobranie 2 ml krwi do specjalistycznej strzykawki (safePICO Aspirator, Radiometer) oraz za pomocą automatycznego analizatora (ABL800 Flex, Radiometer).

Test wysiłkowy: Uczestnicy wykonają stopniowany test wysiłkowy na bieżni napędzanej silnikiem (Woodway Pro XL, Woodway USA Inc) z pomiarami oddech po oddechu wymiany gazowej w płucach przez zautomatyzowany system online (Quark CPET, Cosmed) przez cały czas trwania testu .

Protokół zaadaptowano z Randell et al. 2019 z małymi poprawkami.

Protokół rozpocznie się od odpoczynku, podczas którego uczestnik siedzi na krześle na bieżni przez 5 min. Następnie ćwiczenie rozpocznie się z prędkością 6 km/h ze wzniesieniem 1% przez 5 minut, po czym prędkość będzie zwiększana o 2 km/h co 3 minuty, aż współczynnik wymiany oddechowej przekroczy 1,00. Następnie nachylenie będzie wzrastać o 2% co minutę, aż do dobrowolnego wyczerpania, podczas gdy prędkość będzie utrzymywana na stałym poziomie.

Uczestnicy będą nosić na klatce piersiowej czujnik tętna (Garmin HRM-Tri, Garmin Forerunner 735XT, Garmin Ltd) z ciągłym pomiarem tętna podczas testu. Ponadto uczestnicy zostaną zapytani o postrzeganie wyczerpania w skali Borga 6-20 bezpośrednio po wyczerpaniu.

Testy w terenie będą obejmowały trzy testy przerywanej regeneracji Yo-Yo poziomu 2 (YYIR2) i sesyjne RPE (wskaźnik postrzeganego wysiłku (skala 1-10) dla każdej sesji treningowej. YYIR2 zostanie zaplanowany z jednym w drugim tygodniu treningów, jednym w połowie i jednym w ostatnim tygodniu treningów przed rozpoczęciem sezonu startowego.

Analiza statystyczna:

Wszystkie dane zostaną sprawdzone pod kątem rozkładu normalnego (test Shapiro-Wilka) i równej wariancji (test Browna-Forsythe'a). Istotnym poziomem jest p<0,05.

Systematyczne różnice w PFO, wydolności tlenowej, składzie ciała i spoczynkowych wartościach krwi przed i po okresie treningu przedsezonowego zostaną przeanalizowane za pomocą sparowanego testu t.

Analiza korelacji Pearsona zostanie przeprowadzona z odpowiednimi spoczynkowymi wartościami krwi przed wysiłkiem i PFO, wydolnością tlenową i składem ciała w celu przeanalizowania związku w możliwych różnicach między testami przed i po. Dodatkowo, odpowiednie spoczynkowe wartości krwi przed wysiłkiem zostaną dodatkowo przeanalizowane za pomocą analizy współczynnika zmienności (CV%) w celu przyjrzenia się zmienności z dnia na dzień.

Aby odpowiedzieć na nasz drugorzędny cel, zostanie zastosowana dwukierunkowa ANOVA z powtarzanymi pomiarami w celu przeanalizowania wpływu czasu i określonej grupy pozycji gracza na PFO i wydolność tlenową. Test wielokrotnych porównań post-hoc Sidaka zostanie zastosowany, gdy zostanie znaleziony znaczący wpływ czasu lub określonej grupy pozycji gracza.

Projekt został zatwierdzony przez Science Ethical Committee of the Greater Region of Copenhagen (H-20019103) 3 lipca 2020 r. Protokół badania był zgodny z zasadami deklaracji helsińskiej