Zrozumienie roli układu odpornościowego w alergii na orzechy i orzeszki ziemne: kluczowe biomarkery w diagnostyce i leczeniu, monitorowanie i cele leczenia (Markers4Care)

Tło: Częstość występowania alergii na orzeszki ziemne i orzechy drzewne wzrosła z biegiem lat i jest przyczyną większości reakcji zagrażających życiu, nawet na niewielkie dawki alergenu. W rezultacie alergie na orzeszki ziemne i orzechy drzewne powodują znaczne obciążenie fizyczne i psychiczne pacjentów i ich opiekunów ze względu na niepokój i obawę przed anafilaksją w wyniku przypadkowego narażenia, stres związany ze stosowaniem ścisłej diety eliminacyjnej, brak proaktywnego planu leczenia oraz ze względu na niskie prawdopodobieństwo wystąpienia naturalne wyleczenie takich alergii. Przez dziesięciolecia kierownictwo polegało na ścisłym unikaniu żywności będącej winowajcą. Doustna terapia immunologiczna (OIT) to przełomowa metoda alternatywna dla rygorystycznych diet unikających. OIT polega na stopniowym wprowadzaniu małych dawek danego alergenu pokarmowego w celu modulowania odpowiedzi immunologicznej pacjenta i pomagania w budowaniu tolerancji immunologicznej i klinicznej. Chociaż OIT ma swoje mocne strony, wyniki kliniczne są różne u pacjentów. Dlatego istnieje wyraźne zapotrzebowanie na wiarygodne biomarkery ex vivo odzwierciedlające postęp kliniczny i wyniki terapii, które mogłyby w przyszłości pomóc w dokładniejszej stratyfikacji pacjentów pod kątem spersonalizowanych podejść terapeutycznych.

Cele: Projekt ten ma na celu pomiar celów immunologicznych, przeciwciał, komórek odpornościowych i mediatorów immunologicznych we krwi pacjentów podczas prowokacji doustnej pokarmem (OFC) oraz podczas standardowej immunoterapii doustnej w celu zidentyfikowania nowych markerów immunologicznych korelujących z wynik kliniczny leczenia. Identyfikacja modyfikacji immunologicznych podczas OIT umożliwi nam endotypowanie pacjentów i prawdopodobnie pomoże w odkryciu markerów wyzwań żywieniowych i postępu terapii, a także wyniku OIT.

Partnerzy z Luksemburga: Luksemburski Instytut Zdrowia (LIH), Departament Zakażeń i Odporności (DII; kierownik prof. M. Ollert) jest kierownikiem projektu naukowego (główny badacz dr A. Kuehn). Głównymi partnerami klinicznymi są dr F. Codreanu-Morel i dr V. Petit-Cordebar z Krajowej Jednostki Immunologii-Alergologii, Centre Hospitalier (CHL) w Luksemburgu. Głównym badaczem medycznym ds. kontroli zdrowych jest dr Alessia Pochesci, lekarz medycyny, Centrum Badań Klinicznych i Epidemiologicznych (CIEC), Luksemburski Instytut Zdrowia (LIH), Luksemburg. Zintegrowany Biobank Luksemburga (IBBL) przygotuje i przechowa podzbiór próbek klinicznych do czasu użycia. Inne próbki biologiczne są przygotowywane i przechowywane w DII, LIH. Próbki kliniczne (krew, surowica, osocze, kał) będą analizowane w DII, LIH.

Realizacja projektu: Lekarze z CHL przeprowadzą szczegółowe badania kliniczne uczestników, w tym punktowe testy skórne (SPT), analizę serologiczną pod kątem swoistych IgE oraz prowokację pokarmową z alergenem pokarmowym, zgodnie ze swoją rutynową praktyką kliniczną w Krajowej Jednostce Immunologii-Alergologii ( CHL). W oparciu o wytyczne i procedury Europejskiej Akademii Alergologii i Immunologii Klinicznej (EAACI) ustalone w CHL, wszyscy uczestnicy uczuleni na orzeszki ziemne i orzechy, kwalifikujący się do badania, przejdą wyjściowe badanie OFC. OFC jest adaptacją protokołu PRACTALL, a dawki alergenów dostosowywane są w zależności od reaktywności klinicznej pacjenta.

W przypadku uczestników kwalifikujących się do immunoterapii (N= 30 Peanut-OIT i N=30 Treenut-OIT), OIT opiera się na protokole ustalonym w klinice i zaadaptowanym z aktualnej literatury. W skrócie, uczestnik przyjmuje w domu coraz większe dawki alergenu (orzech ziemny/orzech drzewny), aż do osiągnięcia dawki podtrzymującej wynoszącej 300 mg białka orzecha w ciągu około 26 tygodni (6 miesięcy). Ta początkowa faza OIT nazywana jest fazą przygotowawczą. Następnie należy kontynuować codzienne przyjmowanie tej dawki podtrzymującej. Po co najmniej 12 miesiącach fazy podtrzymującej OIT uczestnicy przechodzą w szpitalu kolejną końcową OFC, aby ocenić, czy nie doszło do odczulenia na orzeszki ziemne lub orzechy drzewne. Uczestnicy kontrolują się w szpitalu co 6 miesięcy, tj. pod koniec fazy początkowej, po 6 miesiącach i po 12 miesiącach codziennego przyjmowania dawki podtrzymującej.

Uczestnicy, którzy nie kwalifikują się do OIT (N=30 uczuleni na orzeszki ziemne i orzechy z drzew orzechowych) i którzy stosują dietę unikającą, są również poddawani kontroli co 6 miesięcy przez 18 miesięcy. Jednakże ostateczny OFC nie zostanie przeprowadzony dla tych uczestników.

Zbieraniem danych od uczestników badania zajmuje się kierownik medyczny.

Ponadto jako grupę kontrolną zostaną wzięci zdrowi dorośli (N=20) tolerujący każdy rodzaj orzechów i bez znanych alergii pokarmowych. Za gromadzenie danych od zdrowych uczestników odpowiada dr Alessia Pochesci, CIEC, LIH.

Pobieranie próbek krwi:

i) Dla grupy OIT:

• Podczas początkowej i końcowej fazy OFC próbki krwi będą zbierane na początku, w trakcie i na końcu prowokacji pokarmowej w trzech różnych fiolkach.
• Podczas kontroli OIT, oprócz rutynowego pobierania krwi podczas wizyt kontrolnych, pod koniec fazy odbudowy i po 6 miesiącach fazy podtrzymującej zostanie pobrana jednorazowa próbka krwi.

ii) Dla grupy unikającej:

• Podczas początkowej fazy OFC próbki krwi będą pobierane na początku, w trakcie i na końcu prowokacji pokarmowej.
• Podczas wizyt kontrolnych pobierane będą jednorazowe próbki krwi co sześć miesięcy, tj. 6, 12 i 18 miesięcy po wyjściowym badaniu OFC.

iii) Zdrowi dorośli uczestnicy: zostanie pobrana jednorazowa próbka krwi.

Pobieranie próbek kału:

Próbka kału zostanie pobrana od uczestników uczulonych na orzechy na początku badania i po zakończeniu co najmniej 18 miesięcy trwania badania przy użyciu dostępnych w handlu zestawów do pobierania próbek kału w domu. Uczestnicy otrzymują zestaw do pobierania próbek, zawierający specjalne probówki do pobierania próbek, akcesoria i instrukcje.

Zebrane próbki kliniczne będą pseudonimizowane w ośrodkach klinicznych. Lista synonimów zawierająca informacje dotyczące tożsamości zrekrutowanych uczestników i odpowiadającego im pseudonimu będzie dostępna wyłącznie w ośrodku klinicznym (badacze medyczni). Dane osobowe podlegają ochronie na podstawie Rozporządzenia (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r. w sprawie ochrony osób fizycznych w związku z przetwarzaniem danych osobowych (RODO) oraz ustawy z dnia 1 sierpnia 2018 r. o organizacji Krajowej Komisji Ochrony Danych oraz ogólna ustawa o ochronie danych.