Pochopení role imunitního systému u alergií na stromové ořechy a arašídy: Klíčové biomarkery pro diagnostiku a sledování léčby a léčebné cíle (Markers4Care)

Pozadí: Prevalence arašídů spolu s alergiemi na ořechy se v průběhu let zvyšuje a představuje většinu život ohrožujících reakcí i na nepatrné dávky alergenu. V důsledku toho alergie na arašídy a stromové ořechy způsobují pacientům a jejich pečovatelům značnou fyzickou a duševní zátěž kvůli úzkosti a strachu z anafylaxe z náhodné expozice, stresu z dodržování přísné eliminační diety, nedostatku proaktivního plánu léčby a kvůli nízké pravděpodobnosti přirozené zotavení z těchto alergií. Po celá desetiletí se vedení spoléhalo na přísné vyhýbání se potravinám, které jsou viníky. Orální imunoterapie (OIT) je průlomová alternativní modalita k přísným vyhýbavým dietám. OIT spočívá v postupném zavádění nízkých dávek implikovaného potravinového alergenu s cílem modulovat imunitní odpověď pacienta a pomáhat budovat imunologickou a klinickou toleranci. Ačkoli OIT má své silné výhody, klinický výsledek se u pacientů liší. Proto existuje jasná potřeba spolehlivých ex-vivo biomarkerů, které odrážejí klinickou progresi a výsledek terapie, což by mohlo v budoucnu pomoci s přesnější stratifikací pacientů pro personalizované léčebné přístupy.

Cíle: Tento projekt se zaměřuje na měření imunitních cílů, protilátek, imunitních buněk a imunitních mediátorů v krvi pacientů během orálních potravinových testů (OFC) a během standardní perorální imunoterapie s cílem identifikovat nové imunitní markery korelující s klinický výsledek léčby. Identifikace imunitních modifikací během OIT nám umožní endotypovat pacienty a možná pomůže odhalit markery potravinových výzev a progrese terapie, stejně jako výsledek OIT.

Lucemburští partneři: Lucemburský institut zdraví (LIH), Oddělení pro infekce a imunitu (DII; vedoucí prof. M. Ollert) vede vědecký projekt (hlavní řešitel Dr. A. Kuehn). Hlavními klinickými partnery jsou Dr. F. Codreanu-Morel a Dr. V. Petit-Cordebar z Národní jednotky imunologie-alergologie, Centre Hospitalier (CHL), Lucembursko. Hlavním lékařským zkoušejícím pro zdravé kontroly je Dr. Alessia Pochesci, MD, Centrum klinického a epidemiologického vyšetřování (CIEC), Lucemburský institut zdraví (LIH), Lucembursko. Lucemburská integrovaná biobanka (IBBL) připraví a uloží podskupinu klinických vzorků až do použití. Ostatní biologické vzorky jsou připravovány a skladovány na DII, LIH. Klinické vzorky (krev, séra, plazma, stolice) budou analyzovány na DII, LIH.

Realizace projektu: Klinici na CHL provedou podrobná klinická vyšetření účastníků včetně kožního prick testu (SPT), sérologické analýzy na specifické IgE a potravinových provokací na implikovaný potravinový alergen podle své běžné klinické praxe na Národní jednotce imunologie-alergologie ( CHL). Na základě pokynů a postupů Evropské akademie pro alergii a klinickou imunologii (EAACI) stanovených v CHL podstoupí všichni účastníci alergičtí na arašídy a stromové ořechy způsobilí pro studii základní OFC. OFC je upraveno z protokolu PRACTALL a dávky alergenu jsou upraveny podle klinické reaktivity pacienta.

Pro účastníky způsobilé pro imunoterapii (N= 30 Peanut-OIT a N=30 Tree nut-OIT) je OIT založena na protokolu zavedeném na klinice a je upravena ze současné literatury. Stručně řečeno, účastníci konzumují přírůstkové dávky alergenu (arašídy/stromové ořechy) doma, dokud nedosáhnou udržovací dávky 300 mg ořechového proteinu přibližně za 26 týdnů (6 měsíců). Tato počáteční fáze OIT se nazývá fáze budování. Poté následuje pokračující denní příjem této udržovací dávky. Po minimálně 12 měsících udržovací fáze OIT podstoupí účastníci další závěrečnou OFC v nemocnici, aby se vyhodnotila desenzibilizace na arašídy nebo ořechy. Účastníci jsou sledováni v nemocnici každých 6 měsíců, tj. na konci fáze budování, po 6 měsících a po 12 měsících denního příjmu udržovací dávky.

Účastníci, kteří nejsou způsobilí pro OIT (N=30 alergičtí na arašídy a stromové ořechy) a kteří jsou na vyhýbavé dietě, jsou také sledováni každých 6 měsíců po dobu 18 měsíců. Finální OFC se však pro tyto účastníky nekoná.

Sběr dat účastníků studie provádí vedoucí lékař.

Kromě toho budou jako kontroly zařazeni zdraví dospělí (N=20) tolerující jakýkoli typ ořechů a bez jakýchkoli známých potravinových alergií. Dr. Alessia Pochesci, CIEC, LIH je zodpovědná za sběr dat od těchto zdravých účastníků.

Odběr vzorku krve:

i) Pro skupinu OIT:

• Během základního a konečného OFC budou odebírány vzorky krve na začátku, během a na konci potravinového testu do tří různých lahviček.
• Během sledování OIT bude kromě rutinního odběru krve během těchto kontrolních návštěv odebrán jednorázový vzorek krve na konci fáze budování a po 6 měsících udržovací fáze.

ii) Pro skupinu vyhýbající se:

• Během základní linie OFC budou odebírány vzorky krve na začátku, během a na konci potravinové výzvy.
• Během následných návštěv bude jednorázový odběr krve odebírán šest měsíců, tj. 6, 12 a 18 měsíců po základní hodnotě OFC.

iii) Zdraví dospělí účastníci: Bude proveden jednorázový odběr krve.

Kolekce vzorků stolice:

Vzorek stolice bude odebrán účastníkům alergickým na ořechy na začátku a po dokončení minimálně 18 měsíců trvání studie pomocí komerčních domácích souprav pro odběr vzorků stolice. Účastníci obdrží odběrovou sadu obsahující speciální odběrové zkumavky, příslušenství a pokyny.

Odebrané klinické vzorky budou v klinických centrech pseudonymizovány. Seznam synonym obsahující informace o identifikaci přijatých účastníků a jejich odpovídající pseudonym bude k dispozici pouze v klinickém centru (zkoušející lékař). Osobní údaje jsou chráněny podle nařízení (EU) 2016/679 ze dne 27. dubna 2016 o ochraně fyzických osob v souvislosti se zpracováním osobních údajů (GDPR) a zákona ze dne 1. srpna 2018 o organizaci Národní komise pro ochranu osobních údajů a obecný zákon o ochraně osobních údajů.