Avaliação Clínica do Teste Rápido de RNA para Covid-19 (CERrnaTc-19)

O diagnóstico rápido e preciso do Covid-19 ajudaria muito a melhorar o manejo clínico de pacientes que apresentam sintomas de possível Covid-19. Atualmente, os resultados do teste padrão para o vírus levam de 2 a 3 dias para serem divulgados. O Instituto de Engenharia Biomédica da Universidade de Oxford desenvolveu um novo teste, que pode produzir resultados em 30 minutos. Isso usa um cotonete nasal/garganta como o teste padrão atual.

Na primeira fase do ensaio, o swab foi enviado ao laboratório em tubo seco. No laboratório, o swab foi colocado em um frasco com 1 mL de água e uma pequena quantidade (25 µL) da água foi colocada em um tubo de ensaio. Este tubo de ensaio continha materiais que podem detectar a presença do novo coronavírus (SARS-CoV-2). O tubo de ensaio é simplesmente aquecido a 65°C por 30 minutos e, se o Coronavírus estiver presente, o reagente mudará de rosa para amarelo (positivo). Se não houver vírus presente na amostra, a cor permanece rosa (negativa). Este foi concebido para ser um teste muito simples que não requer habilidades ou equipamentos especializados e, portanto, pode ser realizado em hospitais e até mesmo em cuidados primários. Neste estudo pretendemos avaliar a acurácia deste novo teste. Planejamos fazer um segundo swab de pacientes com suspeita de Covid-19 no hospital Watford General (que estavam sendo testados de qualquer maneira) e usar esses swabs para conduzir o novo teste (em condições laboratoriais ideais), bem como o teste padrão. Como não tínhamos certeza da precisão do novo teste, seus resultados não foram usados ​​para tomar decisões sobre o tratamento do paciente. Na coorte inicial de 173 pacientes, foram observadas discrepâncias com algumas amostras quando comparadas com os resultados do laboratório de referência. Em seguida, investigamos se os pacientes que tiveram um teste rápido de RNA positivo, mas um teste "padrão-ouro" negativo, eram verdadeiros positivos, convidando-os a fazer um teste de anticorpos. Isso revelou que 20 dos 161 pacientes com teste de referência negativo tiveram um resultado falso positivo no teste rápido. Esses falsos positivos podem resultar de substâncias interferentes nas amostras clínicas, que afetam a detecção colorimétrica com base nas mudanças de pH.

Em vista desses primeiros resultados e feedback, a equipe de Oxford fez várias modificações no teste rápido:

1. Inativação viral - o cotonete é colocado em solução salina e aquecido a 95°C por 5 minutos - o que mata o vírus e o torna seguro para uso no ponto de atendimento
2. A amostra é diluída 1 em 10 para evitar interação com a saliva
3. Um "interruptor molecular" foi adicionado para evitar falsos positivos.

A precisão diagnóstica do teste modificado foi então avaliada. Convidamos pacientes que estavam sendo rastreados e pacientes que haviam sido rastreados e considerados positivos para participar deste estudo. Como a prevalência de COVID-19 entre os pacientes testados foi menor do que havíamos estimado ao calcular o tamanho da amostra (apenas 12 de 173 foram positivos no teste de referência), a amostra foi aumentada em mais 300 pacientes. Nosso objetivo era descobrir rapidamente se o teste modificado é preciso.

O teste rápido de RNA tem o potencial de ser uma ferramenta de triagem útil se adquirir sensibilidade comparável ao atual "padrão ouro" com uma abordagem rápida e viável.