Intermedin Derivado da Pituitária é um Fator Modulado por Estrogênio para Reduzir a Pressão Arterial

Objetivo Específico:

Validação de que a intermedina representa um hormônio vasoativo regulado por estrogênio da hipófise

Hipótese:

Intermedin é um mediador dos efeitos vaso-reguladores dos estrogênios.

Justificativa:

No Estudo Preliminar, mostramos que a intermedina é um fator hipotensor derivado da hipófise que sinaliza através dos complexos receptores CRLR/RAMP no endotélio dos vasos. Com base em estudos de hormônios relacionados, adrenomedulina e CGRP, a intermedina provavelmente reduz a pressão arterial ao exercer um efeito vasodilatador nos leitos vasculares. Estudos anteriores mostraram que o neuropeptídeo αCGRP é produzido predominantemente no neurônio sensorial, e a serotonina pode reduzir seletivamente a secreção de CGRP ativando o receptor endógeno de serotonina (tipo 1 5-HT1) através da via de sinalização do cálcio. A deleção do gene CGRP em camundongos mutantes (αCGRP-/-) leva à elevação da pressão arterial média, frequência cardíaca, resistência vascular periférica e atividade nervosa simpática em comparação com camundongos selvagens. O outro peptídeo relacionado, adrenomedulina (ADM), inicialmente identificado a partir de feocromocitoma, demonstrou ser expresso em vários tecidos, incluindo medula adrenal, tecidos cardiovasculares, pulmão, rim e placenta. A ADM plasmática está elevada em várias condições, incluindo distúrbios cardiovasculares e renais e choque séptico, e foi levantada a hipótese de que a ADM pode estar envolvida no controle da circulação e da dinâmica dos fluidos corporais em vários órgãos. Estudos de camundongos deficientes para ADM mostraram que a ADM é indispensável para o desenvolvimento cardiovascular. Os ratinhos knockout homozigóticos (Adm-/-) exibiram um fenótipo letal embrionário.

Estudos anteriores do promotor do gene ADM revelaram que, além de dois fatores de transcrição, fator nuclear para expressão da interleucina-6 (NF-IL6) e proteína ativadora 2 (AP-2), a expressão do gene ADM é regulada pela hipóxia induzível fator-1 (HIF-1). Sob condições de hipóxia, o HIF-1 se liga aos elementos de resposta à hipóxia (HRE) no promotor do gene ADM para promover a expressão do gene ADM. Embora fora do foco do presente estudo, também detectamos sequências HRE putativas no promotor do gene da intermedina e demonstramos que condições de hipóxia estimulam a atividade do promotor do gene da intermedina, sugerindo que o HIF-1 poderia desempenhar um papel na regulação da expressão do gene da intermedina. Ao contrário da intermedina, a expressão de CGRP e ADM não é ativamente estimulada por estrogênios, sugerindo que esses dois peptídeos relacionados não estão diretamente associados aos efeitos cardiovasculares dos estrogênios. Nas mulheres, o 17β-estradiol produzido pelos ovários é o principal estrogênio circulante que aumenta a vasodilatação e inibe a resposta dos vasos sanguíneos à lesão. Estudos de Mercuro et al. demonstraram que a menopausa induzida por cirurgia causa aumento da resistência vascular periférica e da pressão arterial. Da mesma forma, um estudo transversal mostrou que há um aumento de quatro vezes na incidência de hipertensão em mulheres na pós-menopausa em comparação com indivíduos na pré-menopausa (40% em mulheres na pós-menopausa vs 10% em mulheres na pré-menopausa). O aumento da pressão arterial sistólica por década foi cerca de 5 mmHg maior em mulheres na perimenopausa e pós-menopausa em comparação com mulheres na pré-menopausa. Além de estudos demográficos, estudos mostraram que o estrogênio pode dilatar as artérias coronárias e braquiais em mulheres na pós-menopausa. Parte da atividade vasodilatadora e hipotensora do 17β-estradiol pode ser explicada por sua capacidade de modular a expressão de genes conhecidos por influenciar o tônus ​​e a estrutura vascular, como os receptores da ECA, da renina e da angiotensão tipo I (AT1). No entanto, nenhum desses genes demonstrou ser alvo direto específico para os receptores de estrogênio e são responsáveis ​​pelos efeitos vasoprotetores dos estrogênios. Com base em nossas descobertas de que a intermedina é um fator hipotensor e contém a sequência ERE putativa na região promotora, propomos que a intermedina seja um fator modulador da pressão arterial derivado da hipófise regulado diretamente pelos estrogênios ovarianos. Com base nesse entendimento, levantamos a hipótese de que a regulação negativa da intermedina em indivíduos idosos com deficiência de estrogênio pode ser responsável pela hipertensão pós-menopausa. Como não existe um modelo animal estabelecido adequado para o estudo da menopausa natural, testaremos nossa hipótese estudando a relação entre a concentração plasmática de intermedina e a pressão sanguínea entre mulheres em diferentes estágios reprodutivos.

Seleção de Caso, Medição e Análise de Características Biofísicas e Bioquímicas

Grupo pré-menopausa e pós-menopausa:

As mulheres elegíveis que visitam médicos OB/GYN serão convidadas para uma entrevista. Eles serão questionados sobre características gerais, hábitos de vida (tabagismo, consumo de álcool, atividade física) e histórico médico. Durante a entrevista, a pressão arterial será aferida três vezes no braço direito, com o participante sentado. Uma mulher é considerada pós-menopausa se sua menstruação tiver cessado naturalmente por 12 meses (ou mais) ou se ela tiver ooforectomia bilateral ou histerectomia sem ooforectomia bilateral e tiver mais de 55 anos. A PA de consultório será medida usando um esfigmomanômetro de mercúrio de acordo com as recomendações da Sociedade Americana de Hipertensão (média das três leituras de PA após 5 min de posição sentada tranquila). As características biofísicas e bioquímicas serão medidas, incluindo o último período menstrual, idade, IMC, glicose sérica (AC e PC), creatinina sérica e urinária, colesterol total plasmático, HDL, LDL, triglicerídeos, FSH, LH, 17β-estradiol, progesterona, TSH, intermedina e prolactina. Amostras de sangue de indivíduos individuais serão analisadas em um único ensaio para minimizar as variações. As razões de chances (ORs) de pressão arterial elevada e os intervalos de confiança (ICs) de 95% correspondentes serão calculados após a tolerância para a idade. Além disso, a fim de levar em conta potenciais efeitos de confusão recíprocos das variáveis ​​consideradas, fatores significativamente relacionados com risco de pressão arterial elevada na análise ajustada por idade serão posteriormente incluídos em modelos de regressão logística múltipla ajustados pelo método de máxima verossimilhança. As mulheres que solicitam exames de Papanicolaou regularmente sem qualquer doença médica serão elegíveis para este grupo de estudo.

Os estágios reprodutivos serão designados como:

• Pré-menopausa: nenhuma alteração relatada no padrão do ciclo menstrual;
• Perimenopausa precoce: alteração relatada na frequência do ciclo menstrual no ano anterior com sangramento nos 3 meses anteriores;
• Perimenopausa tardia: ausência de menstruação nos últimos 3-11 meses;
• Pós-menopausa: ausência de menstruação nos últimos 12 meses.

Grupo de Menopausa Induzida Cirurgicamente:

Este protocolo incluirá mulheres férteis que sofrem de patologia ovariana sem outra doença médica e estão programadas para serem submetidas a ooforectomia bilateral associada ou sem histerectomia. Pacientes que sofrem de patologia uterina e se submetem apenas à histerectomia servirão como controles. A pressão arterial e todas as características bioquímicas serão medidas uma semana antes da cirurgia e 1, 3, 6 e 12 meses após a operação. Todas as medições individuais serão cegas quanto ao estado histerectomizado/ooforectomizado dos pacientes. Todo o grupo de dados será relatado como média ± SE. As diferenças nos parâmetros vasculares entre mulheres ooforectomizadas e controles e entre os valores registrados antes e depois da cirurgia serão avaliadas usando testes t de Student pareados e não pareados.

Grupo ARTE:

Serão incluídas mulheres em tratamento de TARV por fator masculino ou tubário. O nível de hormônio do dia 3 (E2, progesterona, FSH, LH, TSH, prolactina, inibina A, inibina B e ativina) e a pressão arterial serão medidos um mês antes do tratamento com ART. Após a administração de gonadotropina, todas as alterações hormonais e da pressão arterial serão medidas e registradas no dia 3, dia 7 e no dia anterior à injeção de hCG, bem como no dia da coleta de oócitos. Todas as características biofísicas e bioquímicas continuarão a ser acompanhadas a partir do 15º dia após a transferência embrionária e até o final do primeiro trimestre no grupo de gestação.