Hypofyse-avledet-intermedin er en østrogen-modulert faktor for å redusere blodtrykket

Spesifikt mål:

Validering av at intermedin representerer et østrogenregulert vasoaktivt hormon fra hypofysen

Hypotese:

Intermedin er en mediator av de vasoregulerende effektene av østrogener.

Begrunnelse:

I den foreløpige studien viste vi at intermedin er en hypofyseavledet hypotensiv faktor som signaliserer gjennom CRLR/RAMP-reseptorkomplekser i karendotelet. Basert på studier av relaterte hormoner, adrenomedullin og CGRP, reduserer intermedin sannsynligvis blodtrykket ved å utøve en vasodilaterende effekt på vaskulære senger. Tidligere studier har vist at nevropeptidet αCGRP hovedsakelig produseres i det sensoriske nevronet, og serotonin kan selektivt redusere CGRP-sekresjonen ved å aktivere den endogene serotoninreseptoren (type 1 5-HT1) gjennom kalsiumsignalveien. Sletting av CGRP-genet i mutante mus (αCGRP-/-) fører til økning av gjennomsnittlig arterielt trykk, hjertefrekvens, perifer vaskulær motstand og sympatisk nervøs aktivitet sammenlignet med villtype mus. Det andre relaterte peptidet, adrenomedullin (ADM), opprinnelig identifisert fra feokromocytom, har vist seg å komme til uttrykk i forskjellige vev inkludert binyremarg, kardiovaskulært vev, lunge, nyre og placenta. Plasma ADM er forhøyet ved forskjellige tilstander, inkludert kardiovaskulære og nyrelidelser og septisk sjokk, og det har vært antatt at ADM kan være involvert i kontrollen av sirkulasjon og kroppsvæskedynamikk i forskjellige organer. Studier av mus med mangel på ADM viste at ADM er uunnværlig for kardiovaskulær utvikling. De homozygote knockout-musene (Adm-/-) viste en embryonal dødelig fenotype.

Tidligere studier av ADM-genpromotoren har avslørt at i tillegg til to transkripsjonsfaktorer, nukleær faktor for interleukin-6-ekspresjon (NF-IL6) og aktivatorprotein 2 (AP-2), reguleres ADM-genekspresjonen av den hypoksi-induserbare faktor-1 (HIF-1). Under hypoksiforhold binder HIF-1 seg til hypoksiresponselementene (HRE) i ADM-genpromotoren for å fremme ADM-genuttrykk. Selv om vi er utenfor fokus for denne studien, har vi også oppdaget antatte HRE-sekvenser i intermedingenpromotoren og demonstrert at hypoksiforhold stimulerer intermedingenpromoteraktivitet, noe som tyder på at HIF-1 kan spille en rolle i reguleringen av intermedingen-uttrykk. I motsetning til intermedin, stimuleres ikke uttrykket av CGRP og ADM aktivt av østrogener, noe som tyder på at disse to beslektede peptidene ikke er direkte assosiert med de kardiovaskulære effektene av østrogener. Hos kvinner er 17β-østradiol produsert av eggstokkene det viktigste sirkulerende østrogenet som øker vasodilatasjonen og hemmer blodkarenes respons på skade. Studier av Mercuro et al. har vist at kirurgisk-indusert overgangsalder forårsaker en økning i perifer vaskulær motstand og blodtrykk. På samme måte viste en tverrsnittsstudie at det er en fire ganger økning i forekomsten av hypertensjon hos postmenopausale kvinner sammenlignet med premenopausale individer (40 % hos postmenopausale kvinner mot 10 % hos premenopausale kvinner). Økningen i systolisk blodtrykk per tiår var rundt 5 mmHg større hos perimenopausale og postmenopausale kvinner sammenlignet med premenopausale kvinner. I tillegg til demografiske studier har studier vist at østrogen kan utvide koronar- og brachiale arterier hos postmenopausale kvinner. En del av vasodilatasjon og hypotensive aktiviteter av 17β-østradiol kan forklares med dens evne til å modulere ekspresjonen av gener som er kjent for å påvirke vaskulær tonus og struktur, slik som ACE, rennin og angiotensjon type I (AT1) reseptorer. Ingen av disse genene har imidlertid vist seg å være spesifikke direkte mål for østrogenreseptorer og er ansvarlige for de vasoprotektive effektene av østrogener. Basert på funnene våre om at intermedin er en hypotensiv faktor og inneholder antatt ERE-sekvens i promotorregionen, foreslår vi at intermedin er en hypofyseavledet blodtrykksmodulerende faktor direkte regulert av ovarieøstrogener. Basert på denne forståelsen antar vi videre at nedreguleringen av intermedin hos aldrende individer med østrogenmangel kan være ansvarlig for postmenopausal hypertensjon. Fordi det ikke finnes noen etablert dyremodell som er egnet for studiet av naturlig forekommende overgangsalder, vil vi teste hypotesen vår ved å studere forholdet mellom plasma intermedinkonsentrasjon og blodtrykk blant kvinner i forskjellige reproduktive stadier.

Casevalg, måling og analyse av biofysiske og biokjemiske egenskaper

Premenopausal og postmenopausal gruppe:

Kvalifiserte kvinner som besøker OB/GYN-leger vil bli invitert til et intervju. De vil bli spurt om generelle egenskaper, livsstilsvaner (røyking, alkoholforbruk, fysisk aktivitet) og sykehistorie. Under intervjuet vil blodtrykket bli målt tre ganger på høyre arm, mens deltakeren sitter. En kvinne regnes som postmenopausal hvis menstruasjonen har opphørt naturlig i 12 måneder (eller mer), eller hvis hun har bilateral ooforektomi eller hysterektomi uten bilateral ooforektomi og i alderen mer enn 55 år. Kontor BP vil bli målt ved hjelp av et kvikksølv sfygmomanometer i henhold til anbefalingene fra American Society of Hypertension (gjennomsnitt av de tre BP-avlesningene etter 5 minutter med rolig sittestilling). Biofysiske og biokjemiske egenskaper vil bli målt inkludert siste menstruasjonsperiode, alder, BMI, serumglukose (AC og PC), serum- og urinkreatinin, totalt plasmakolesterol, HDL, LDL, triglyserider, FSH, LH, 17β-østradiol, progesteron, TSH, intermedin og prolaktin. Blodprøver fra individuelle forsøkspersoner vil bli analysert i en enkelt analyse for å minimere variasjoner. Oddsratio (OR) for forhøyet blodtrykk og de tilsvarende 95 % konfidensintervaller (CIs) vil bli beregnet etter alderen. Videre, for å ta hensyn til potensielle gjensidige forvirrende effekter av variabler som vurderes, vil faktorer som er signifikant relatert til forhøyet blodtrykksrisiko i den aldersjusterte analysen senere inkluderes i flere logistiske regresjonsmodeller tilpasset metoden for maksimal sannsynlighet. Kvinner som ber om årlige regelmessige celleprøver uten medisinsk sykdom vil være kvalifisert for denne studiegruppen.

De reproduktive stadiene vil bli tildelt som:

• Premenopausal: ingen rapportert endring i menstruasjonssyklusmønsteret;
• Tidlig peri-menopausal: rapportert endring i frekvensen av menstruasjonssyklusen i det foregående året med en blødning i løpet av de foregående 3 månedene;
• Sen peri-menopausal: ingen menstruasjon i de foregående 3-11 månedene;
• Postmenopausal: ingen menstruasjon de siste 12 månedene.

Kirurgisk indusert menopausal gruppe:

Denne protokollen vil inkludere fertile kvinner som lider av ovariepatologi uten annen medisinsk sykdom og som er planlagt å gjennomgå bilateral ooforektomi assosiert med eller uten hysterektomi. Pasienter som lider av livmorpatologi og gjennomgår hysterektomi vil kun fungere som kontroller. Blodtrykk og alle biokjemiske egenskaper vil bli målt en uke før operasjon og 1, 3, 6 og 12 måneder etter operasjon. Alle individuelle målinger vil bli blindet med hensyn til hysterektomisert/ooforektomisert status til pasientene. Hele datagruppen vil bli rapportert som gjennomsnitt ± SE. Forskjeller i vaskulære parametere mellom ooforektomiserte kvinner og kontroller og mellom verdier registrert før og etter operasjonen vil bli vurdert ved bruk av parede og uparede Students t-tester.

ART Group:

Kvinner i ART-behandling på grunn av mannlig eller tubal faktor vil bli inkludert. Dag 3 hormonnivå (E2, progesteron, FSH, LH, TSH, prolaktin, inhibin A, inhibin B og aktivin) og blodtrykk vil bli målt en måned før ART-behandling. Etter administrering av gonadotropin vil alle hormon- og blodtrykksendringene bli målt og registrert på dag 3, dag 7 og dagen før hCG-injeksjon samt dagen for uthenting av oocytter. Alle biofysiske og biokjemiske egenskaper vil fortsette å følge opp den 15. dagen etter embryooverføring og til slutten av første trimester i svangerskapsgruppen.