Hypofyse-afgeleid-Intermedin is een door oestrogeen gemoduleerde factor voor het verlagen van de bloeddruk

Specifiek doel:

Validatie dat intermedin een door oestrogeen gereguleerd vasoactief hormoon uit de hypofyse vertegenwoordigt

Hypothese:

Intermedin is een bemiddelaar van de vaso-regulerende effecten van oestrogenen.

Grondgedachte:

In de voorbereidende studie hebben we aangetoond dat intermedine een van de hypofyse afgeleide hypotensieve factor is die signaleert via CRLR/RAMP-receptorcomplexen in het vaatendotheel. Gebaseerd op studies van verwante hormonen, adrenomedulline en CGRP, verlaagt intermedin waarschijnlijk de bloeddruk door een vaatverwijdend effect uit te oefenen op vaatbedden. Eerdere studies hebben aangetoond dat het neuropeptide αCGRP voornamelijk wordt geproduceerd in het sensorische neuron, en serotonine kan selectief de CGRP-secretie verminderen door de endogene serotonine (type 1 5-HT1) receptor te activeren via de calciumsignaalroute. Deletie van het CGRP-gen in gemuteerde muizen (αCGRP-/-) leidt tot een verhoging van de gemiddelde arteriële druk, hartslag, perifere vasculaire weerstand en sympathische zenuwactiviteit in vergelijking met wildtype muizen. Van het andere verwante peptide, adrenomedulline (ADM), aanvankelijk geïdentificeerd uit feochromocytoom, is aangetoond dat het tot expressie wordt gebracht in verschillende weefsels, waaronder bijniermerg, cardiovasculaire weefsels, longen, nieren en placenta. ADM in plasma is verhoogd bij verschillende aandoeningen, waaronder cardiovasculaire en nieraandoeningen en septische shock, en de hypothese is dat ADM mogelijk betrokken is bij de controle van de bloedsomloop en de dynamiek van lichaamsvloeistoffen in verschillende organen. Studies van muizen met een tekort aan ADM toonden aan dat ADM onmisbaar is voor de ontwikkeling van hart en bloedvaten. De homozygote knock-out (Adm-/-) muizen vertoonden een embryonaal dodelijk fenotype.

Eerdere studies van de ADM-genpromoter hebben aangetoond dat, naast twee transcriptiefactoren, nucleaire factor voor interleukine-6-expressie (NF-IL6) en activatorproteïne 2 (AP-2), de ADM-genexpressie wordt gereguleerd door de hypoxie-induceerbare factor-1 (HIF-1). Onder hypoxie-omstandigheden bindt HIF-1 aan de hypoxie-responselementen (HRE) in de ADM-genpromoter om ADM-genexpressie te bevorderen. Hoewel buiten de focus van de huidige studie, hebben we ook vermeende HRE-sequenties in de intermedine-genpromotor gedetecteerd en aangetoond dat hypoxiecondities de intermedine-genpromotoractiviteit stimuleren, wat suggereert dat HIF-1 een rol zou kunnen spelen bij de regulatie van intermedine-genexpressie. In tegenstelling tot intermedine wordt de expressie van CGRP en ADM niet actief gestimuleerd door oestrogenen, wat suggereert dat deze twee verwante peptiden niet direct geassocieerd zijn met de cardiovasculaire effecten van oestrogenen. Bij vrouwen is 17β-oestradiol geproduceerd door de eierstokken het belangrijkste circulerende oestrogeen dat de vasodilatatie verhoogt en de reactie van bloedvaten op letsel remt. Studies door Mercuro et al. hebben aangetoond dat de chirurgisch geïnduceerde menopauze een toename van de perifere vasculaire weerstand en bloeddruk veroorzaakt. Evenzo toonde een cross-sectioneel onderzoek aan dat er een viervoudige toename is in de incidentie van hypertensie bij postmenopauzale vrouwen in vergelijking met premenopauzale personen (40% bij postmenopauzale vrouwen versus 10% bij premenopauzale vrouwen). De stijging van de systolische bloeddruk per decennium was ongeveer 5 mmHg groter bij vrouwen in de perimenopauzale en postmenopauze dan bij vrouwen in de premenopauze. Naast demografische studies hebben studies aangetoond dat oestrogeen kransslagaders en brachiale slagaders kan verwijden bij postmenopauzale vrouwen. Een deel van de vaatverwijdende en hypotensieve activiteiten van 17β-oestradiol kan worden verklaard door het vermogen ervan om de expressie te moduleren van genen waarvan bekend is dat ze de vasculaire tonus en structuur beïnvloeden, zoals ACE-, renine- en angiotensie type I (AT1)-receptoren. Van geen van deze genen is echter aangetoond dat ze specifieke directe doelen zijn voor oestrogeenreceptoren en verantwoordelijk zijn voor de vaatbeschermende effecten van oestrogenen. Op basis van onze bevindingen dat intermedin een hypotensieve factor is en een vermoedelijke ERE-sequentie in het promotorgebied bevat, stellen we voor dat intermedin een van de hypofyse afgeleide bloeddrukmodulerende factor is die rechtstreeks wordt gereguleerd door ovariële oestrogenen. Op basis van dit inzicht veronderstellen we verder dat de neerwaartse regulatie van intermedine bij ouder wordende personen met oestrogeendeficiëntie verantwoordelijk zou kunnen zijn voor postmenopauzale hypertensie. Omdat er geen bestaand diermodel is dat geschikt is voor de studie van de natuurlijk voorkomende menopauze, zullen we onze hypothese testen door de relatie tussen plasma-intermedineconcentratie en bloeddruk bij vrouwen in verschillende reproductieve stadia te bestuderen.

Gevalsselectie, meting en analyse van biofysische en biochemische kenmerken

Premenopauzale en postmenopauzale groep:

In aanmerking komende vrouwen die OB / GYN-artsen bezoeken, worden uitgenodigd voor een interview. Ze zullen worden ondervraagd over algemene kenmerken, leefgewoonten (roken, alcoholgebruik, lichamelijke activiteit) en medische geschiedenis. Tijdens het interview wordt driemaal de bloeddruk gemeten aan de rechterarm, terwijl de deelnemer zit. Een vrouw wordt als postmenopauzaal beschouwd als haar menstruatie op natuurlijke wijze is gestopt gedurende 12 maanden (of langer), of als zij een bilaterale ovariëctomie of hysterectomie zonder bilaterale ovariëctomie heeft ondergaan en ouder is dan 55 jaar. De bloeddruk op kantoor wordt gemeten met behulp van een kwikbloeddrukmeter volgens de aanbevelingen van de American Society of Hypertension (gemiddelde van de drie bloeddrukmetingen na 5 minuten rustige zithouding). Biofysische en biochemische kenmerken zullen worden gemeten, waaronder de periode van de laatste menstruatie, leeftijd, BMI, serumglucose (AC en PC), serum- en urinecreatinine, plasma totaal cholesterol, HDL, LDL, triglyceriden, FSH, LH, 17β-oestradiol, progesteron, TSH, intermedine en prolactine. Bloedmonsters van individuele proefpersonen zullen in één assay worden geanalyseerd om variaties te minimaliseren. Odds ratio's (OR's) van verhoogde bloeddruk en de overeenkomstige 95% betrouwbaarheidsintervallen (CI's) worden berekend na rekening te houden met leeftijd. Om rekening te houden met mogelijke wederzijdse verstorende effecten van de beschouwde variabelen, zullen vervolgens factoren die significant verband houden met een verhoogd bloeddrukrisico in de voor leeftijd gecorrigeerde analyse vervolgens worden opgenomen in meerdere logistische regressiemodellen die worden aangepast door de methode van maximale waarschijnlijkheid. Vrouwen die jaarlijks een uitstrijkje aanvragen zonder enige medische aandoening komen in aanmerking voor deze onderzoeksgroep.

De reproductieve stadia worden toegewezen als:

• Premenopauzaal: geen gerapporteerde verandering in menstruatiecycluspatroon;
• Vroege peri-menopauzale: gemelde verandering in de frequentie van de menstruatiecyclus in het voorgaande jaar met een bloeding in de voorgaande 3 maanden;
• Late peri-menopauzaal: geen menstruatie in de voorgaande 3-11 maanden;
• Postmenopauzaal: geen menstruatie in de voorgaande 12 maanden.

Chirurgisch geïnduceerde overgangsgroep:

Dit protocol omvat vruchtbare vrouwen die lijden aan eierstokpathologie zonder andere medische ziekte en die een bilaterale ovariëctomie moeten ondergaan in combinatie met of zonder hysterectomie. Patiënten die lijden aan baarmoederpathologie en alleen een hysterectomie ondergaan, dienen als controles. De bloeddruk en alle biochemische kenmerken worden een week voor de operatie en 1, 3, 6 en 12 maanden na de operatie gemeten. Alle individuele metingen worden geblindeerd wat betreft de status van hysterectomie/ovariëctomie van de patiënten. De hele gegevensgroep wordt gerapporteerd als gemiddelde ± SE. Verschillen in vasculaire parameters tussen vrouwen met een ovariëctomie en controles en tussen waarden die voorafgaand aan en na de operatie zijn geregistreerd, zullen worden beoordeeld met behulp van gepaarde en ongepaarde Student's t-tests.

ART-groep:

Vrouwen in ART-behandeling vanwege mannelijke of eileidersfactor zullen worden opgenomen. De hormoonspiegel op dag 3 (E2, progesteron, FSH, LH, TSH, prolactine, inhibine A, inhibine B en activine) en bloeddruk worden een maand voor de ART-behandeling gemeten. Na toediening van gonadotropine worden alle hormoon- en bloeddrukveranderingen gemeten en geregistreerd op dag 3, dag 7 en de dag vóór de hCG-injectie, evenals op de dag van de eicelpunctie. Alle biofysische en biochemische kenmerken zullen verder worden opgevolgd op de 15e dag na embryotransfer en tot het einde van het eerste trimester in de zwangerschapsgroep.