Interesse da readthrough induzida por gentamicina em pacientes com fibrose cística

Antecedentes: Este estudo foi conduzido para determinar se a gentamicina intravenosa pode suprimir os códons de parada em pacientes com fibrose cística (FC) e, em caso afirmativo, se tem algum benefício clínico.

Métodos: Primeiro usamos um sistema de repórter de gene duplo para determinar o nível de readthrough induzido por gentamicina das mutações de parada de CFTR mais frequentes na população francesa. Em seguida, investigamos a eficiência da leitura em resposta a perfusões de gentamicina intravenosa de 10 mg/kg uma vez ao dia em pacientes com mutações stop e em um grupo controle de pacientes sem mutações stop. A função respiratória, a concentração de cloreto no suor, a diferença de potencial nasal (NPD) e a expressão de CFTR em células epiteliais nasais foram medidas no início e após 15 dias de tratamento.

Resultados: Após incubação in vitro com gentamicina, a eficiência de leitura para a mutação Y122X foi pelo menos cinco vezes maior do que para G542X, R1162X e W1282X. Em seis dos nove pacientes com a mutação Y122X, a imunodetecção de CFTR mostrou expressão de proteína na membrana das células ciliadas nasais e a secreção de cloreto dependente de CFTR em suas medições de NPD aumentou significativamente. O estado respiratório também melhorou nesses pacientes, independentemente da sensibilidade à gentamicina dos germes presentes no escarro. A concentração média de cloreto no suor diminuiu significativamente e normalizou em dois pacientes. Essas medições não se alteraram nos pacientes Y122X sem expressão da proteína, em pacientes com as outras mutações stop investigadas in vitro (n=4) e naqueles sem mutações stop (n=5).

Conclusão: A supressão de mutações stop no gene CFTR com gentamicina parenteral pode ser prevista in vitro e está associada a benefício clínico e modificação significativa do transporte de cloreto mediado por CFTR no epitélio nasal e das glândulas sudoríparas.