Níveis séricos e intraoculares de eritropoetina e VEGF em pacientes com diabetes tipo 2 e retinopatia proliferativa (UVA-EVA)

Alguns estudos mostraram recentemente que a concentração de eritropoietina no humor vítreo de pacientes diabéticos que sofrem de retinopatia diabética é maior do que em pacientes não diabéticos. Foi relatada maior concentração de eritropoetina no humor vítreo do que no sangue, indicando uma produção local. Em alguns casos também foi encontrada uma associação positiva entre as concentrações de Eritropoietina e o Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF). Ambos os fatores, eritropoetina e VEGF, mostram importante atividade angiogênica e podem desempenhar um papel no desenvolvimento da retinopatia diabética.

Este estudo incluiu pacientes diabéticos tipo 2 com PDR que tiveram que se submeter a vitrectomia durante o período de maio de 2011 a janeiro de 2012 na Unidade de Oftalmologia, A.O. Hospital Civil e Universidade de Brescia. Os critérios de inclusão foram os seguintes: diabetes tipo 2, idade superior a 18 anos e PDR; os critérios de exclusão foram: idade inferior a 18 anos, diabetes tipo 1, RD inicial, pacientes com PDR sem necessidade de cirurgia, vitrectomia anterior no olho sob exame ou outra cirurgia oftalmológica ou terapia a laser nos 3 meses anteriores.

Pacientes não diabéticos submetidos a vitrectomia para buraco macular ou pucker representaram o grupo controle (CTRLs); seus critérios de inclusão foram: idade superior a 18 anos e presença de pucker macular ou buraco macular com necessidade de vitrectomia. Os critérios de exclusão foram: idade inferior a 18 anos, diagnóstico de diabetes mellitus e vitrectomia prévia no olho sob exame ou outra cirurgia oftalmológica ou terapia a laser nos últimos 3 meses. Todos os pacientes foram submetidos a exame oftalmológico completo (acuidade visual, lâmpada de fenda, tonometria, angiofluoresceinografia de retina e tomografia de coerência óptica -OCT-). O consentimento informado foi obtido de todos os pacientes após uma descrição detalhada dos objetivos e procedimentos do estudo.

Os seguintes dados foram registrados para cada paciente:

1. População: idade (anos), sexo (M/F);
2. Clínica: diabetes (Ausente ou Tipo 2); tempo desde o diagnóstico inicial de diabetes (anos); tipo de terapia para DM: dieta, hipoglicemiantes orais, misto (agentes orais e insulina, insulina); hipertensão (definida como pressão arterial sistólica > 140 e pressão arterial diastólica > 90 mmHg ou em uso de anti-hipertensivos); terapia anti-hipertensiva atual (Sim/Não); uso de bloqueadores dos receptores da angiotensina II (BRA) ou inibidores da enzima conversora de angiotensina (ECA-i); presença de hipercolesterolemia, comorbidades, terapia com estatinas (Sim/Não), anticoagulantes (Sim/Não), terapia antiplaquetária (Sim/Não); outras terapias realizadas, tabagismo (não fumante, fumante ativo); complicações do diabetes mellitus presentes no momento da avaliação (cardiopatia, nefropatia, neuropatia);
3. Ocular: olho (OD/OS); acuidade visual; presença e grau de retinopatia diabética; presença de emovítreo; presença de edema macular diabético; presença de catarata ou implante de lente; intervenção com facoemulsificação durante a vitrectomia; presença de doenças retinianas ou quaisquer outras doenças oculares concomitantes; realização de laserterapia retiniana prévia, injeção intravítrea de Avastin antes da vitrectomia;
4. Bioquímico: Hemoglobina (g/dL); glicose (mg/dL); hemoglobina glicada (%); plaquetas (N/mmc); creatinina (mg/dL); albuminúria (mg/dia), depuração de creatinina (mL/min), calculada pela fórmula Modification of Diet in Renal Disease (MDRD); colesterol total (mg/dL); HDL e LDL; triglicerídeos (mg/dL).

Todos os pacientes foram submetidos a vitrectomia pars plana calibre 23 ou 25. O resultado primário do estudo foi a medição das concentrações de EPO e VEGF no soro e humor vítreo e aquoso. Amostras de sangue, colhidas antes da cirurgia, foram centrifugadas a 3.000 rpm por 10 minutos para separação da fração sérica, que foi armazenada a -80°C. Os humores aquoso e vítreo foram colhidos durante a cirurgia e imediatamente congelados a -80°C. Ambas as concentrações de EPO e VEGF foram medidas no soro e no humor vítreo; no entanto, devido à pequena quantidade de amostra, apenas as concentrações de EPO foram determinadas no humor aquoso. A EPO foi dosada por radioimunoensaio (Immulite EPO 200, Siemens), com o menor limite de detecção de 1,0 mIU/mL. O VEGF foi testado por ELISA (Human VEGF Immunoassay, R & D Systems Europe, Abingdon, Reino Unido) com um limite inferior de detecção de 10,0 pg/mL. As concentrações de VEGF abaixo do limite inferior de detecção foram definidas para 5 pg/mL para realizar a análise estatística. Valores de VEGF acima de 2.000 pg/mL foram fixados em 2.500 pg/mL; testes estatísticos também foram realizados após a exclusão dos dados acima de 2000 pg/mL.