Efeitos da Sucralose na Sensibilidade à Insulina, Microbiota Intestinal e GLP-1 Pós-prandial

Design de estudo:

Este é um ensaio clínico randomizado, triplo-cego, paralelo, controlado por placebo.

Tamanho da amostra:

O tamanho da amostra foi calculado para observar uma diferença de 15% na sensibilidade à insulina com base em dois resultados: taxa de aparecimento de glicose (Ra) e taxa de desaparecimento de glicose (Rd) obtida do clamp de glicose hiperinsulinêmica-euglicêmica para medir o fígado e o músculo esquelético sensibilidade à insulina.

O cálculo foi feito considerando uma probabilidade de erro tipo I (α) de 5%, com poder de 90% e acrescentando 20% a mais para possíveis perdas no seguimento.

O tamanho amostral estimado para o estudo é de 24 sujeitos, 12 por grupo.

Randomization:

Os participantes serão aleatoriamente designados para um dos dois grupos (sucralose ou placebo) usando o site Randomization.com (http://www.randomization.com) com um design de bloco balanceado de 4 blocos com 6 assuntos cada. A sequência de alocação aleatória será feita por um pesquisador externo.

Intervenção:

A intervenção consistirá em cápsulas contendo sucralose pura ou placebo (amido de milho) de acordo com a alocação do grupo. Cada cápsula conterá 90 mg de sucralose ou placebo. Os participantes serão solicitados a consumir uma cápsula em cada refeição (três por dia) para atingir uma ingestão de 270 mg de sucralose ou placebo, esta quantidade corresponde aproximadamente a 30% da ingestão diária aceitável (IDA) de sucralose para um pessoa magra. Isso foi calculado com base na ADI estabelecida pelo comitê de especialistas em aditivos alimentares (JECFA) da Organização das Nações Unidas para Agricultura e Alimentação (FAO)/Organização Mundial da Saúde (OMS) de 15 mg por kg de peso corporal por dia de sucralose.

A utilização de cápsulas idênticas permitirá o cegamento, as cápsulas serão depositadas em frascos numerados sequencialmente de acordo com o processo de inscrição e nem os participantes nem os pesquisadores saberão o conteúdo das cápsulas ou o grupo designado.

Visita 1

Um teste oral de tolerância à glicose (OGTT) será realizado para confirmar que os participantes não têm diabetes ou pré-diabetes. Insulina de jejum, perfil lipídico e hemoglobina glicada serão medidos. Além disso, serão documentados antropometria (peso, altura, circunferência da cintura e do quadril), pressão arterial e frequência cardíaca. A composição corporal será avaliada com absorciometria dupla de raios-X (DXA) já disponível na Unidade de Pesquisa e bioimpedância elétrica. A atividade física será registrada com o questionário da Universidade de Laval que mede o gasto energético em Kcal por dia. Será fornecido um formato de registro alimentar de três dias para ser registrado prospectivamente pelos participantes.

Visita 2

O primeiro grampo de glicose euglicêmica hiperinsulinêmica (HEGC) será feito nesta visita. Os rastreadores serão administrados durante as primeiras 3,5 horas. A primeira fase do HEGC usará uma infusão de insulina de 14 miliunidades (mU)/m2 de BSA/min para avaliar a sensibilidade hepática à insulina. A segunda fase do HEGC usará uma infusão de insulina de 50 mU/m2 de área de superfície corporal (ASC)/min para avaliar a sensibilidade à insulina do músculo esquelético. Cada fase tem uma duração aproximada de duas a três horas.

Visita 3

O recordatório alimentar de três dias será solicitado e revisado para avaliação dos hábitos de consumo alimentar. Um teste de tolerância de refeição mista será realizado durante duas horas. A refeição será composta por 523 kcal (49% de carboidratos, 17% de proteínas, 34% de lipídios). Amostras de sangue serão coletadas em 0, 30, 60, 90 e 120 minutos para medir as concentrações de glicose, insulina e peptídeo semelhante ao glucagon tipo 1 (GLP-1). Além disso, as concentrações de lipopolissacarídeo (LPS), proteína C-reativa (PCR), interleucina 6 (IL-6) e fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α) serão medidas no tempo basal. Dez minutos antes do teste, os participantes consumirão uma cápsula contendo sucralose ou placebo (120 mg).

Os participantes fornecerão a primeira amostra de fezes para avaliar a microbiota intestinal.

Os pesquisadores irão proporcionar o frasco com as cápsulas que cada participante irá consumir durante o período de intervenção (30 ± 2 dias) nesta visita. Além disso, cada participante será solicitado a registrar no formulário de adesão se consumiu a cápsula no café da manhã, almoço e jantar em cada dia do período de intervenção e registrar qualquer sintoma relacionado à ingestão das cápsulas. Outro formato para registrar novamente o consumo alimentar de três dias será dado.

Visita 4

O segundo HEGC será feito nesta visita seguindo o mesmo procedimento explicado na visita 2. Os participantes irão dosar a segunda amostra de fezes para avaliar as mudanças na microbiota intestinal. Além disso, o questionário de atividade física será aplicado novamente e o segundo registro alimentar de 3 dias será obtido para avaliar mudanças na atividade física e nos hábitos alimentares, respectivamente.

Visita 5

O segundo teste de tolerância à refeição mista será realizado seguindo os mesmos procedimentos da visita 3. Os participantes serão solicitados a devolver os frascos vazios para quantificar a adesão à intervenção. Além disso, serão coletados formatos de adesão e sintomas.

Visita 6

Os participantes serão solicitados a comparecer um mês após a visita 5 para fazer uma avaliação final das concentrações de glicose em jejum, insulina e perfil lipídico. O questionário de atividade física será aplicado novamente e um terceiro registro alimentar de 3 dias será coletado para avaliar mudanças na atividade física e nos hábitos alimentares, respectivamente.