A influência da dieta “washoku” na microbiota intestinal de mulheres na pós-menopausa

As mulheres que atenderem aos critérios de inclusão no estudo por um período de 4 semanas serão distribuídas aleatoriamente em um dos dois grupos: 1. O grupo intervenção seguirá os princípios do prato de alimentação saudável, que será complementado com elementos da dieta washoku (30 g de soja preta torrada e 5 g de wakame); 2. O grupo controle será contemplado apenas pelos princípios do prato de alimentação saudável.

Todos os participantes receberão um folheto com informações sobre porções recomendadas de grupos individuais de produtos na alimentação diária, receitas de pratos à base de soja preta torrada e wakame. Antes e depois do estudo, além das medidas antropométricas (peso corporal, circunferência da cintura, circunferência do quadril), composição corporal e densidade mineral óssea, foi realizada avaliação da dieta (por meio de questionário semiquantitativo de frequência alimentar, bem como a atual método de registro dos últimos 4 dias) e o nível de atividade física serão realizados. Além disso, as mulheres serão solicitadas a coletar uma porção diária de urina para avaliar a concentração de isoflavonas de soja e determinar o teor de sódio, potássio e magnésio. As mulheres também terão seu sangue (18 ml) coletado para avaliar parâmetros bioquímicos selecionados (glicose, insulina, colesterol total (CT), colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL-C), colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL-C), colesterol não HDL colesterol (não-HDL-C) e triglicerídeos). Também será coletada uma amostra de fezes para avaliar a composição da microbiota intestinal e seus metabólitos, ou seja, ácidos graxos de cadeia curta. O recrutamento ocorrerá através de sites de redes sociais, ou seja, Facebook.

Foram planejadas as seguintes análises específicas:

• Avaliação dos parâmetros antropométricos (altura, peso corporal, circunferência do quadril e cintura)
• Análise da composição corporal e densidade mineral óssea
• Avaliação do estado nutricional (parâmetros metabólicos selecionados, como metabolismo da glicose (glicose, concentração de insulina), metabolismo lipídico (colesterol total (T-C), colesterol LDL (LDL-C), colesterol HDL (HDL-C), colesterol não HDL (não -HDL-C) e triglicerídeos).
• Avaliação dos hábitos alimentares (questionário semiquantitativo sobre a frequência de ingestão alimentar, complementado adicionalmente pelo método de registo atual dos últimos 4 dias).
• Avaliação da composição da microbiota intestinal
• Avaliação da concentração fecal de ácidos graxos de cadeia curta
• Avaliação da concentração de isoflavonas de soja na urina

A normalidade da distribuição dos dados obtidos será testada através do teste de Shapiro-Wilk. O teste Kruskal-Wallis será então usado para dados distribuídos não normalmente e o teste Tukey HSD será usado para dados normalmente distribuídos. Foi considerado estatisticamente um valor de p inferior a 0,05. A composição da microbiota será analisada usando RStudio (R versão 4.0.3 (2020-10-10)) com pacotes incluindo phyloseq, microbiome e vegan. Os taxa serão filtrados removendo todos aqueles não atribuídos a nenhum filo. Apenas táxons com abundâncias superiores a 0,25% em pelo menos uma amostra permanecerão no conjunto de dados. Todas as análises da composição da microbiota intestinal serão realizadas com base nas abundâncias relativas (RA) das OTUs (Unidades Taxonômicas Operacionais).

Os dados coletados nos estudos planejados incluirão os resultados das medições e suas análises estatísticas. Todos os dados serão coletados diretamente pelos membros da equipe e codificados. Instruções detalhadas sobre a coleta de dados serão preparadas pelo líder da equipe e cada membro deverá ler e receber treinamento apropriado. Todas as medidas bioquímicas e antropométricas serão realizadas em pelo menos duas repetições e serão verificadas por outro membro da equipe. Todos os equipamentos especializados utilizados serão devidamente calibrados antes de cada utilização (balança, analisador de composição corporal, espectrofotômetro Nanodrop).