Копенгаген, Бостон, Сидней (COBOS)

Субъекты будут выполнять два испытания (испытание A и B).

Испытание A: Во время испытания A испытуемый будет есть утренний прием пищи в 6:00 утра. соответствует 5% суточной потребности в энергии и прибудет в исследовательскую лабораторию в 8:00 утра. Требуется, чтобы испытуемый прибыл на автомобиле или на общественном транспорте. После прибытия субъект исследования будет отдыхать в течение 1 часа, и в это время катетеры вставляются в обе бедренные вены и бедренную артерию на одной из ног. В 9:00 испытуемые будут выполнять упражнение на разгибание колена на одной ноге в течение 1 часа с интенсивностью 80% от максимальной работоспособности. В этот рабочий протокол включены 3 интервала продолжительностью 5 минут, когда испытуемый работает на 100% от максимальной интенсивности с целью обеспечения полной активации/рекрутирования всех мышечных волокон. Биопсия мышц m. Латеральные широкие мышцы обеих ног будут взяты до (в 8:45), сразу после (в 10:00) и через 2 часа после завершения упражнения (в 12:00) (всего 6 биопсий). Легочное потребление кислорода измеряется с помощью онлайн-системы до, во время и после тренировки и используется для определения метаболизма субстрата. Забор крови из бедренных вен на обеих ногах и бедренной артерии на одной из ног производят до (в 8:20, 8:40 и 9:00), во время физической нагрузки (в 9:20, 9:00). 40:00 и 10:00) и в период восстановления после нагрузки (в 10:10, 10:30, 11:00, 11:30 и 12:00). Одновременно измеряют кровоток в бедренных артериях обеих ног с помощью допплеровской методики. Определение артериовенозной разницы (АВ-разницы) путем одновременного измерения кровотока позволяет рассчитать поглощение скелетными мышцами глюкозы и поглощение/высвобождение соответствующих веществ (белков, пептидов, метаболитов и т. д.). Экспериментальная часть испытания А завершается в 12:00. Испытуемому дадут еду и питье и будут наблюдать за ним в течение часа, прежде чем он сможет покинуть исследовательскую лабораторию.

Испытание B: Во время пробного испытания B испытуемые будут есть утренний прием пищи в 6:00 утра. соответствует 5% суточной потребности в энергии и прибудет в исследовательскую лабораторию в 8:00 утра. Требуется, чтобы испытуемый прибыл на автомобиле или на общественном транспорте.

Во время испытания B испытуемые будут выполнять тот же протокол упражнения на разгибание колена на одной ноге, что и в испытании A. В 9:00 утра испытуемый начинает выполнять упражнение на разгибание колена на одной ноге в течение 1 часа при 80% максимальной работоспособности с 3 интервалы продолжительностью 5 минут, когда нагрузка составляет 100% от максимальной работоспособности. Этот рабочий протокол обеспечивает полную активацию/рекрутирование всех мышечных волокон. После того, как упражнение с ногами завершено, испытуемый будет отдыхать в положении лежа на спине в течение 6 часов. В начале этого периода покоя в бедренные вены обеих ног и в бедренную артерию одной ноги вставляют катетеры. Также в каждую вену предплечья (антекубитальные вены) вводят катетеры для внутривенной инфузии инсулина, глюкозы и стабильной 13C(u)-глюкозы. Внутривенную инфузию 13C(u)-глюкозы начинают через 2 часа после окончания физической нагрузки для достижения 10%-го обогащения крови глюкозой. Через 4 часа после прекращения физической нагрузки начинают гиперинсулинемический эугликемический клэмп продолжительностью 120 минут. Это подразумевает внутривенное вливание инсулина и глюкозы в течение 120 минут, чтобы определить чувствительность к инсулину для поглощения глюкозы и метаболизма глюкозы. Зажим начинают с болюсной инъекции инсулина (9,0 мЕд/кг) с последующей постоянной инфузией (1,42 мЕд/кг/мин). Одновременно скорость инфузии глюкозы будет регулироваться таким образом, чтобы поддерживать эугликемию. Непосредственно перед, через 30 мин и через 120 мин инфузии инсулина берут биопсию мышц из латеральной широкой мышцы обеих ног (всего 6 биопсий). Образцы крови из обеих бедренных вен и одной бедренной артерии берут до (в 12:00, 12:30, 13:00, 13:30 и 14:00) и во время (в 14:15, 2 часа). :30, 14:45, 15:00, 15:15, 15:30, 15:45 и 16:00) гиперинсулинемический эугликемический зажим. Одновременно измеряют кровоток в обеих бедренных артериях с использованием допплеровского метода. Определение артериовенозной разницы (АВ-разницы) путем одновременного измерения кровотока позволяет рассчитать поглощение глюкозы и поглощение/высвобождение соответствующих веществ (белков, пептидов, метаболитов и т. д.). Непрямая калориметрия для определения метаболизма всего тела проводится одновременно, начиная через 2 часа после окончания тренировки. Экспериментальная часть испытания B завершается в 16:00. Субъекты исследования получают еду и питье и наблюдают за ними в течение часа, прежде чем они могут покинуть исследовательскую лабораторию.

Мышечные биоптаты и образцы крови из испытаний A и B хранятся в закрытой морозильной камере при температуре -80ºC. Образцы мышц и образцы крови впоследствии будут использоваться для различных анализов, описанных в разделе «Основные сведения».

Испытания (А и В) будут проводиться в рандомизированном порядке и будут разделены минимум 14 днями.