Исследование LAVA (подтверждение и применимость антигена латерального потока) для COVID-19 (LAVA)

Во время продолжающейся пандемии COVID-19 тестирование детей на COVID-19 стало областью существенной потребности и пристального внимания. В настоящее время золотым стандартом для обнаружения SARS-CoV-2 является полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) в режиме реального времени, проводимая на образце из дыхательной системы. Этот диагностический тест идентифицирует фрагменты вирусной РНК, специфичные для SARS-CoV-2, и амплифицирует их. Он может обнаруживать даже относительно низкие уровни РНК у людей, которые заразились вирусом, но у которых еще не развилась высокая вирусная нагрузка или симптомы. Он также может обнаруживать РНК после того, как живой вирус очистился, но фрагменты РНК вируса остаются. Этот тест обладает высокой аналитической чувствительностью и специфичностью. Однако получить адекватный образец у детей сложнее, так как тест неудобен и не всегда хорошо переносится. Это означает, что диагностическая чувствительность составляет примерно 80% (1). Тем не менее, ОТ-ПЦР в настоящее время остается наиболее точным методом обнаружения SARS-CoV-2. Однако логистические проблемы, связанные с ОТ-ПЦР, означают, что доступность и удобство использования теста снижаются. Это связано с сочетанием факторов, включая вместимость испытательного полигона, мощность обработки и время, необходимое для обработки и представления результатов централизованными лабораториями. Конечным результатом является то, что высокая чувствительность и специфичность ПЦР компенсируются задержкой во времени для сообщения результатов. В больницах неотложной помощи эти задержки могут привести к плохому потоку пациентов через клинические зоны, чрезмерному использованию средств индивидуальной защиты (СИЗ) или позднему распознаванию внутрибольничной передачи. Таким образом, экспресс-тестирование имеет особое значение при выявлении лиц с высокой контагиозностью, например людей, которым предстоит пройти процедуру, связанную с образованием аэрозолей высокого риска, поступить в переполненное отделение неотложной помощи или при быстром расследовании локальных вспышек.

Поэтому были изучены альтернативные методы и способы тестирования, в частности использование мазков из передней части носа для обнаружения SARS-CoV-2. ОТ-ПЦР слюны также изучается (2, 3), но на нее влияют некоторые ограничения проведения ОТ-ПЦР на любом образце, как описано выше. Альтернативным методом обнаружения SARS-CoV-2 является использование тестирования на антиген с помощью анализа латерального потока (LFA) (4). Диагностический тест на обнаружение антигена предназначен для прямого обнаружения белков SARS-CoV-2, продуцируемых репликацией вируса в респираторных выделениях. В большинстве экспресс-тестов на антигены используется сэндвич-метод иммунодетекции с использованием простого в использовании формата теста с боковым потоком, аналогичного тесту на беременность. Тесты на обнаружение антигена имеют несколько преимуществ по сравнению с ОТ-ПЦР; 1) это может быть выполнено на мазках из передней части носа - образец, который гораздо более приемлемо получить у детей - 2) результаты могут быть быстро обработаны с использованием коммерческого набора у постели больного, при этом результат будет доступен в течение 30 минут после взятия. образец берется, и 3) проведение теста на антиген дешевле по сравнению с ОТ-ПЦР. Компромиссом за простоту использования и быстроту выполнения тестов на антигены является снижение чувствительности по сравнению с ОТ-ПЦР, особенно если у человека низкая вирусная нагрузка (например, заболевание на ранней или поздней стадии), поскольку уровни антигенов, присутствующих в верхних дыхательных путях, могут упасть ниже порога обнаружения. Аналитическая чувствительность в целом составляет примерно 50%, но она увеличивается в периоды ожидаемой инфекционности, когда вирусная нагрузка составляет >60 000 (порог времени цикла ОТ-ПЦР <27), примерно до 90%. Постоянно сообщалось, что специфичность тестов на антигены очень высока (> 97%). Таким образом, если тест на антиген положительный, то очень вероятно, что это верный результат, и у человека действительно есть COVID-19. Таким образом, тесты на обнаружение антигена в основном используются для выявления инфекционности человека, а не в качестве клинического диагностического теста на COVID-19.

Потенциальное применение LFA для победы над Covid-19 очевидно: несколько клинических сценариев ниже демонстрируют области, в которых сравнение эффективности RT-PCR с LFA может улучшить уход за детьми и повысить безопасность персонала в больнице. Тем не менее, оценка использования этих тестов в клинических условиях необходима, прежде чем будет рекомендовано их полное внедрение в рутинную клиническую практику.

В настоящее время всех детей тестируют на COVID-19 с помощью ОТ-ПЦР при поступлении в больницу, независимо от их симптомов. В зимние месяцы, когда все больше детей с респираторными симптомами будут обращаться за медицинской помощью, текущее руководство рекомендует изолировать или группировать этих пациентов в больнице до тех пор, пока их тест на SARS-CoV-2 не вернется (5). Однако у большинства детей, вероятно, есть альтернативная причина симптомов, например, респираторно-синцитиальный вирус, аденовирус или грипп. Раннее выявление заразных детей с COVID-19 с помощью теста по месту оказания медицинской помощи позволит провести более эффективную когорту или изоляцию и потенциально снизить распространение COVID-19 в больничных условиях не только от детей, но и от их родителей, которые, вероятно, заразиться контактно-бытовым путем. Кроме того, раннее выявление детей с COVID-19 с помощью LFA будет способствовать соблюдению строгого режима использования СИЗ медицинскими работниками, осуществляющими уход за такими детьми.

Дети, госпитализированные для плановых процедур, в настоящее время также регулярно проходят тестирование на COVID-19 с помощью мазка из носоглотки перед госпитализацией. Это делается для того, чтобы снизить вероятность того, что они будут укрываться от SARS-CoV-2 во время проведения процедуры с высоким риском образования аэрозолей (AGP), когда риск передачи SARS-CoV-2 персоналу повышен. Как правило, эти дети бессимптомны, так как наличие симптомов ГПЗ часто препятствует проведению анестезии. В этой популяции LFA можно использовать для выявления детей, у которых на момент взятия мазка была инкубация SARS-CoV-2, но не выделялся вирус, у которых впоследствии прогрессировало начало выделения вируса (таблица 1). Выполнение LFA потенциально позволяет идентифицировать заразных детей и может использоваться для принятия решений относительно продолжения процедуры и использования СИЗ у детей, когда процедура будет продолжена.

Наконец, LFA можно использовать в больничных зонах с «высоким риском», особенно в отделениях интенсивной терапии и интенсивной терапии, где обычно выполняются AGP высокого риска и где у детей с большей вероятностью будут симптомы, соответствующие COVID-19. Наблюдение за SARS-CoV-2 с помощью ОТ-ПЦР регулярно проводится в некоторых подразделениях, но задержка результата на 24–48 часов оказывает минимальное влияние на практику работы в районе AGP. МАФ могут использоваться в качестве инструмента скрининга инфекционных пациентов в этих районах для поддержки использования соответствующих СИЗ.

Можно также рассмотреть возможность дальнейшего использования этих тестов в рамках скрининга медицинских работников (МР) на инфекционность после известных контактов с заболевшими Covid-19, чтобы ограничить количество отсутствующих медицинских работников из-за потенциального заражения как снаружи, так и внутри больницы. Потенциально их также можно использовать в сообществе, например, в школах и спортивных клубах, для выявления заразных людей. Перед использованием в более широком сообществе рекомендуется валидация и удобство использования в контролируемых клинических условиях. Математический анализ LFA показывает, что из-за их высокой специфичности отрицательная прогностическая ценность хороша во времена как высокой, так и низкой распространенности, даже когда чувствительность теста низкая.