Исследование OxiCLEAR (Скорость адсорбции цитокинов и эндотоксина Oxiris) (OxiCLEAR)

Это проспективное одноцентровое обсервационное исследование, предназначенное для характеристики адсорбционной способности и динамики насыщения мембраны AN69-полиэтиленимин (гемофильтр Oxiris®) во время непрерывной вено-венозной гемофильтрации (НВВГ) у взрослых пациентов с септическим шоком.

Гемофильтр Oxiris® одобрен для непрерывной почечно-заместительной терапии (НПЗТ) сроком до 72 часов у пациентов с острым повреждением почек, ассоциированным с сепсисом; однако в рутинной клинической практике фильтр обычно заменяют через 12–24 часа из-за опасений относительно снижения адсорбционной эффективности. Биологическое обоснование этой практики остается недостаточно определенным. Данное исследование направлено на получение количественных доказательств in vivo о том, как со временем изменяется адсорбция эндотоксинов и цитокинов мембраной Oxiris® и сохраняется ли клиренс цитокинов за счет конвективного транспорта при снижении адсорбционной способности.

Основная цель — количественно оценить адсорбционную способность мембраны AN69-полиэтиленимин в отношении эндотоксинов и воспалительных медиаторов в течение непрерывного 24-часового периода лечения НВВГ. Второстепенными целями являются определение того, снижается ли со временем эффективность адсорбции мембраны способом, соответствующим насыщению, количественная оценка клиренса цитокинов за счет конвективного транспорта в эффлюэнт, а также оценка того, связано ли снижение адсорбции мембраны с клиническим течением и исходами при септическом шоке.

В исследование будут включены взрослые пациенты (≥18 лет) с септическим шоком, госпитализированные в отделение интенсивной терапии Клинической университетской больницы им. Паула Страдыня. Все пациенты будут получать НВВГ с гемофильтром Oxiris® в рамках стандартного лечения. Критериями включения являются соответствие критериям септического шока по Sepsis-3, оценка по Динамической системе оценки (DSS) 6–8 баллов и проведение НВВГ не менее 24 часов. Исходная концентрация эндотоксина будет использоваться для определения основной аналитической когорты.

Все пациенты будут лечиться с использованием НВВГ на платформе PrisMax и мембраны Oxiris® в стандартизированных условиях для обеспечения сопоставимости кинетики адсорбции: скорость кровотока 100–150 мл/мин, доза фильтрации 25–30 мл/кг/ч, региональная антикоагуляция цитратом, замещающий раствор 1000–1500 мл/ч с 50% пред- и постдилюцией и чистая ультрафильтрация 0 мл/ч.

Образцы крови и эффлюэнта будут собираться на исходном уровне (T0) и через 1, 3, 6, 12 и 24 часа после начала НВВГ. В каждой временной точке будут получены плазма на входе (артериальная линия), плазма на выходе (венозная линия) и эффлюэнт. Всего на каждого пациента будет собрано 17 образцов. Образцы будут немедленно центрифугированы и храниться при -80 °C до анализа.

Концентрации эндотоксинов будут измеряться с помощью конкурентного ИФА-анализа с высокой аналитической чувствительностью. Воспалительные медиаторы, включая IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, IFN-γ, MCP-1, VEGF и EGF, будут количественно определены с помощью мультиплексного биочипового анализатора.

Для эндотоксинов удаление происходит исключительно за счет адсорбции. Скорость адсорбции будет рассчитана на основе разницы концентраций на входе и выходе, умноженной на скорость плазмотока и нормированной на площадь поверхности мембраны (Ед/см²/мин). Для цитокинов общий плазменный клиренс будет рассчитан на основе концентраций на входе и выходе, конвективный клиренс — на основе концентрации в эффлюэнте, умноженной на скорость потока эффлюэнта, а адсорбционный клиренс — как разница между плазменным и эффлюэнтным клиренсом. Этот подход позволяет разделить удаление цитокинов за счет адсорбции и конвекции и определить, сохраняется ли клиренс цитокинов при снижении адсорбционной способности мембраны.

Клинические данные будут включать демографические показатели, сопутствующие заболевания, баллы по шкалам SOFA и Dynamic, источник инфекции, антимикробную терапию, гемодинамические переменные, дозу вазопрессоров, лактат, СРБ, прокальцитонин, функцию почек и печени, а также технические параметры НПЗТ, включая скорость кровотока, трансмембранное давление и градиенты давления в фильтре. Клинические исходы включают 28-дневную летальность, восстановление функции почек, дни без вазопрессоров и продолжительность пребывания в ОРИТ.

Первичной конечной точкой является скорость адсорбции эндотоксинов и воспалительных медиаторов. Первичный анализ оценивает взаимосвязь между концентрацией эндотоксина на входе и скоростью адсорбции в повторяющиеся моменты времени. Коэффициенты корреляции Пирсона будут рассчитаны и преобразованы с помощью Z-преобразования Фишера для получения объединенной оценки корреляции во времени. Снижение этой взаимосвязи будет интерпретировано как свидетельство уменьшения адсорбционной способности мембраны, соответствующего насыщению. Временные изменения адсорбции также будут проанализированы с использованием линейных моделей со смешанными эффектами, где пациент является случайным эффектом, а время, концентрация на входе, трансмембранное давление и возраст фильтра — фиксированными эффектами.

Для цитокинов относительный вклад конвективного и адсорбционного клиренса будет смоделирован во времени, чтобы определить, остается ли конвективный транспорт эффективным при снижении адсорбции. Взаимосвязь между ранним насыщением мембраны и клиническими исходами (например, снижение лактата, потребность в вазопрессорах, оценка по шкале SOFA, восстановление функции почек и 28-дневная летальность) будет исследована с использованием регрессии со смешанными эффектами, логистической регрессии и моделей пропорциональных рисков Кокса по мере необходимости.

Двадцать девять пациентов обеспечивают достаточную мощность для выявления клинически значимых изменений в динамике адсорбции на основе предварительных оценок корреляции. Непрерывные переменные будут обобщены как среднее ± стандартное отклонение или медиана с межквартильным размахом, а категориальные переменные — как количество и процент. Пропущенные данные будут обработаны с использованием анализа полных случаев, с применением множественного импутирования, если доля пропусков превышает 5%.

Все данные будут храниться в защищенной электронной базе данных с предопределенными проверками диапазона и согласованности. Лабораторные значения будут проверены по сертифицированным лабораторным записям, а клинические данные — по медицинским записям ОРИТ. Стандартные операционные процедуры регулируют включение пациентов, обработку образцов, лабораторный анализ, управление данными и статистическую оценку.