Estudio OxiCLEAR (Tasa de Adsorción de Citocinas y Endotoxinas Oxiris) (OxiCLEAR)

Este es un estudio observacional prospectivo y unicéntrico diseñado para caracterizar la capacidad de adsorción y la dinámica de saturación de la membrana AN69-poliethylenimina (hemofiltro Oxiris®) durante la hemofiltración veno-venosa continua (CVVH) en pacientes adultos con shock séptico.

El hemofiltro Oxiris® está aprobado para terapia de reemplazo renal continua (CRRT) hasta 72 horas en pacientes con lesión renal aguda asociada a sepsis; sin embargo, en la práctica clínica rutinaria el filtro se reemplaza comúnmente después de 12-24 horas debido a preocupaciones sobre la disminución de la eficiencia de adsorción. La base biológica para esta práctica sigue estando insuficientemente definida. Este estudio tiene como objetivo proporcionar evidencia cuantitativa in vivo sobre cómo la adsorción de endotoxinas y citoquinas por la membrana Oxiris® cambia con el tiempo y si la depuración de citoquinas persiste a través del transporte convectivo cuando la capacidad de adsorción se reduce.

El objetivo principal es cuantificar la capacidad de adsorción de la membrana AN69-poliethylenimina para endotoxinas y mediadores inflamatorios durante un período de tratamiento CVVH continuo de 24 horas. Los objetivos secundarios son determinar si la eficiencia de adsorción de la membrana disminuye con el tiempo de manera consistente con la saturación, cuantificar la depuración de citoquinas a través del transporte convectivo hacia el efluente, y evaluar si la reducción de la adsorción de la membrana se asocia con la evolución clínica y los resultados en el shock séptico.

Se incluirán pacientes adultos (≥18 años) con shock séptico ingresados en la unidad de cuidados intensivos del Hospital Clínico Universitario Pauls Stradiņš. Todos los pacientes recibirán CVVH con el hemofiltro Oxiris® como parte del manejo estándar de atención. La elegibilidad requiere cumplir con los criterios de shock séptico Sepsis-3, una puntuación del Sistema de Puntuación Dinámica (DSS) de 6-8, y tratamiento con CVVH durante al menos 24 horas. La concentración basal de endotoxina se utilizará para definir la cohorte analítica primaria.

Todos los pacientes serán tratados utilizando CVVH con la plataforma PrisMax y la membrana Oxiris® bajo condiciones estandarizadas para garantizar la comparabilidad de la cinética de adsorción: flujo sanguíneo 100-150 mL/min, dosis de filtración 25-30 mL/kg/h, anticoagulación regional con citrato, líquido de reemplazo 1000-1500 mL/h con 50% de predilución y postdilución, y ultrafiltración neta de 0 mL/h.

Se recolectarán muestras de sangre y efluente al inicio (T0) y a las 1, 3, 6, 12 y 24 horas después del inicio de la CVVH. En cada punto de tiempo, se obtendrán plasma de entrada (línea arterial), plasma de salida (línea venosa) y efluente. Se recolectarán un total de 17 muestras por paciente. Las muestras se centrifugarán inmediatamente y se almacenarán a -80 °C hasta el análisis.

Las concentraciones de endotoxina se medirán utilizando un ensayo ELISA competitivo con alta sensibilidad analítica. Los mediadores inflamatorios, incluyendo IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, IFN-γ, MCP-1, VEGF y EGF, se cuantificarán utilizando un analizador de biochip multiplex.

Para las endotoxinas, la eliminación ocurre exclusivamente mediante adsorción. La tasa de adsorción se calculará a partir de la diferencia de concentración de entrada-salida multiplicada por la tasa de flujo plasmático y normalizada al área de superficie de la membrana (U/cm²/min). Para las citoquinas, la depuración plasmática total se calculará a partir de las concentraciones de entrada y salida, la depuración convectiva a partir de la concentración del efluente multiplicada por la tasa de flujo del efluente, y la depuración adsorbente como la diferencia entre la depuración plasmática y la del efluente. Este enfoque permite separar la eliminación de citoquinas por adsorción y convección y permite determinar si la depuración de citoquinas persiste cuando la capacidad de adsorción de la membrana disminuye.

Los datos clínicos incluirán demografía, comorbilidades, puntuaciones SOFA y Dinámica, fuente de infección, terapia antimicrobiana, variables hemodinámicas, dosis de vasopresores, lactato, PCR, procalcitonina, función renal y hepática, y parámetros técnicos de CRRT incluyendo flujo sanguíneo, presión transmembrana y gradientes de presión del filtro. Los resultados clínicos incluyen mortalidad a 28 días, recuperación renal, días libres de vasopresores y duración de la estancia en UCI.

El criterio de valoración principal es la tasa de adsorción de endotoxinas y mediadores inflamatorios. El análisis principal evalúa la relación entre la concentración de endotoxina de entrada y la tasa de adsorción a través de puntos de tiempo repetidos. Se calcularán coeficientes de correlación de Pearson y se transformarán utilizando la transformación Z de Fisher para obtener una estimación agrupada de la correlación a lo largo del tiempo. Una disminución en esta relación se interpretará como evidencia de una capacidad de adsorción de la membrana reducida consistente con la saturación. Los cambios dependientes del tiempo en la adsorción también se analizarán utilizando modelos lineales de efectos mixtos con el paciente como efecto aleatorio y el tiempo, la concentración de entrada, la presión transmembrana y la edad del filtro como efectos fijos.

Para las citoquinas, la contribución relativa de la depuración convectiva versus la adsorbente se modelará a lo largo del tiempo para determinar si el transporte convectivo sigue siendo efectivo cuando la adsorción disminuye. Las asociaciones entre la saturación temprana de la membrana y los resultados clínicos (por ejemplo, reducción de lactato, requerimientos de vasopresores, puntuación SOFA, recuperación renal y mortalidad a 28 días) se explorarán utilizando regresión de efectos mixtos, regresión logística y modelos de riesgos proporcionales de Cox según corresponda.

Veintinueve pacientes proporcionan suficiente potencia para detectar cambios clínicamente significativos en la dinámica de adsorción basados en estimaciones preliminares de correlación. Las variables continuas se resumirán como media ± desviación estándar o mediana con rango intercuartílico, y las variables categóricas como recuentos y porcentajes. Los datos faltantes se manejarán utilizando análisis de casos completos, con imputación múltiple aplicada si la falta supera el 5%.

Todos los datos se almacenarán en una base de datos electrónica segura con controles de rango y consistencia predefinidos. Los valores de laboratorio se verificarán contra registros de laboratorio certificados y los datos clínicos contra registros médicos de la UCI. Los procedimientos operativos estándar rigen la inclusión de pacientes, el manejo de muestras, el análisis de laboratorio, la gestión de datos y la evaluación estadística.