OxiCLEAR (Oxiris-sytokiinien ja endotoksiinin adsorptioasteen) tutkimus (OxiCLEAR)

Tämä on prospektiivinen, yksikeskuksinen havainnointitutkimus, jonka tarkoituksena on kuvata AN69-polyetyleeniminikalvon (Oxiris® hemofiltri) adsorptiokapasiteettia ja kyllästymisdynamiikkaa jatkuvan venovenoösen hemofiltraation (CVVH) aikana septisen shokin aikuispotilailla.

Oxiris® hemofiltri on hyväksytty jatkuvaan munuaisten korvaushoitoon (CRRT) jopa 72 tunniksi sepsariin liittyvän akuutin munuaisvaurion potilailla; kuitenkin käytännön kliinisessä toiminnassa suodatin vaihdetaan yleisesti 12–24 tunnin jälkeen huolista adsorptiotehokkuuden heikkenemisestä. Tämän käytännön biologinen perusta on edelleen riittämättömästi määritelty. Tämä tutkimus pyrkii tarjoamaan in vivo -kvantitatiivista näyttöä siitä, kuinka Oxiris® -kalvon endotoksiini- ja sytokiiniadsorptio muuttuu ajan myötä ja jatkuuko sytokiinien poisto konvektiivisen kuljetuksen kautta, kun adsorptiokapasiteetti vähenee.

Ensisijainen tavoite on kvantifioida AN69-polyetyleeniminikalvon endotoksiinien ja tulehdusvälittäjäaineiden adsorptiokapasiteetti 24 tunnin jatkuvan CVVH-hoidon aikana. Toissijaisia tavoitteita ovat määrittää, vähenevätkö kalvon adsorptiotehokkuus ajan myötä kyllästymistä vastaavalla tavalla, kvantifioida sytokiinien poisto konvektiivisen kuljetuksen kautta ulosvirtaukseen ja arvioida, onko vähentynyt kalvon adsorptio yhteydessä septisen shokin kliiniseen kulkuun ja lopputuloksiin.

Aikuispotilaat (≥18 vuotta), joilla on septinen shokki ja jotka on otettu Pauls Stradiņšin Kliinisen yliopistosairaalan tehohoitoon, otetaan mukaan tutkimukseen. Kaikki potilaat saavat CVVH-hoitoa Oxiris® -hemofiltriin osana standardoitua hoitoa. Kelpoisuus edellyttää Sepsis-3 septisen shokin kriteerien täyttymistä, Dynamic Scoring System (DSS) -pisteytyksen 6–8 ja CVVH-hoidon vähintään 24 tunnin ajan. Perustason endotoksiinipitoisuutta käytetään ensisijaisen analyyttisen kohortin määrittämiseen.

Kaikkia potilaita hoidetaan käyttäen CVVH:ta PrisMax-alustalla ja Oxiris® -kalvolla standardoiduissa olosuhteissa varmistaakseen adsorptiokinetiikan vertailukelpoisuuden: verenvirtaus 100–150 ml/min, filtraatioannos 25–30 ml/kg/h, alueellinen sitraatti-antikoagulaatio, korvausneste 1000–1500 ml/h, jossa 50 % esi- ja jälkilaimentamisesta, ja nettoultafiltraatio 0 ml/h.

Veren ja ulosvirtauksen näytteet kerätään perustasolla (T0) ja 1, 3, 6, 12 ja 24 tuntia CVVH:n aloittamisen jälkeen. Jokaisella aikapisteellä otetaan sisääntuloplasmaa (arteriaalilinja), ulostuloplasmaa (venoosilinja) ja ulosvirtausta. Yhteensä 17 näytettä kerätään per potilas. Näytteet sentrifugoidaan välittömästi ja säilytetään –80 °C:ssa analyysiin asti.

Endotoksiinipitoisuudet mitataan käyttäen kilpailevaa ELISA-testiä, jolla on korkea analyyttinen herkkyys. Tulehdusvälittäjäaineet, mukaan lukien IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, IFN-γ, MCP-1, VEGF ja EGF, kvantifioidaan monikanavaisen biopirutkianalysaattorin avulla.

Endotoksiinien poisto tapahtuu yksinomaan adsorptiota. Adsorptionopeus lasketaan sisääntulo- ja ulostulopitoisuusero kerrottuna plasman virtausnopeudella ja normalisoituna kalvon pinta-alaan (U/cm²/min). Sytokiineille kokonaisplasmanpoisto lasketaan sisääntulo- ja ulostulopitoisuuksista, konvektiivinen poisto ulosvirtauksen pitoisuudesta kerrottuna ulosvirtausnopeudella ja adsorptiivinen poisto plasman ja ulosvirtauksen poiston erotuksena. Tämä lähestymistapa mahdollistaa sytokiinien poiston erottamisen adsorptiosta ja konvektiosta ja mahdollistaa määrittää, jatkuuko sytokiinien poisto, kun kalvon adsorptiokapasiteetti vähenee.

Kliininen data sisältää demografiset tiedot, komorbiditeetit, SOFA- ja Dynamic-pisteet, infektion lähde, antimikrobinen hoito, hemodynaamiset muuttujat, vasopressori-annos, laktaatti, CRP, prokalsitoniini, munuais- ja maksatoiminta sekä CRRT:n tekniset parametrit, kuten verenvirtaus, transmembraanipaine ja suodattimen painegradientit. Kliiniset lopputulokset sisältävät 28 päivän kuolleisuuden, munuaisten toipumisen, vasopressori-vapaat päivät ja teho-osaston oleskelun keston.

Ensisijainen päätepiste on endotoksiinien ja tulehdusvälittäjäaineiden adsorptionopeus. Ensisijainen analyysi arvioi suhdetta sisääntulovirtauksen endotoksiinipitoisuuden ja adsorptionopeuden välillä toistuvilla aikapisteillä. Pearsonin korrelaatiokertoimet lasketaan ja muunnetaan käyttäen Fisherin Z-muunnosta saadakseen korrelaation yhdistetyn arvion ajan myötä. Tämän suhteen heikkeneminen tulkitaan todisteeksi vähentyneestä kalvon adsorptiokapasiteetista, joka on yhdenmukainen kyllästymisen kanssa. Aikariippuvaisia muutoksia adsorptiossa analysoidaan myös käyttäen lineaarista sekavaikutusmallia, jossa potilas on satunnainen vaikutus ja aika, sisääntulopitoisuus, transmembraanipaine ja suodattimen ikä kiinteitä vaikutuksia.

Sytokiineille konvektiivisen ja adsorptiivisen poiston suhteellinen osuus mallinnetaan ajan myötä määrittääkseen, pysyykö konvektiivinen kuljetus tehokkaana, kun adsorptio vähenee. Yhteyksiä varhaisen kalvon kyllästymisen ja kliinisten lopputulosten (esim. laktaatin väheneminen, vasopressori-tarve, SOFA-pisteet, munuaisten toipuminen ja 28 päivän kuolleisuus) välillä tutkitaan käyttäen sekavaikutusregressiota, logistista regressiota ja Coxin suhteellisten riskien malleja tarpeen mukaan.

Kaksikymmentäyhdeksän potilasta tarjoaa riittävän tehon havaitsemaan kliinisesti merkityksellisiä muutoksia adsorptiodynamiikassa perustuen alustaviin korrelaatioarvioihin. Jatkuvat muuttujat tiivistetään keskiarvona ± keskihajontana tai mediaanina kvartiilivälillä, ja luokittelu muuttujat lukumäärinä ja prosentteina. Puuttuvia tietoja käsitellään käyttäen täydellistä tapaustutkimusta, ja moninkertaista imputaatiota sovelletaan, jos puuttuvuus ylittää 5 %.

Kaikki tiedot tallennetaan turvalliseen sähköiseen tietokantaan ennalta määritellyillä alue- ja johdonmukaisuustarkistuksilla. Laboratorioarvot varmistetaan sertifioitujen laboratoriotietojen ja kliininen data teho-osaston lääketieteellisten tietojen perusteella. Vakiotoimintamenettelyt ohjaavat potilaan rekrytointia, näytteenkäsittelyä, laboratorioanalyysiä, tiedonhallintaa ja tilastollista arviointia.