用于辐射诱发的口干症的间充质干细胞 (MESRIX)

设计随机、对照盲法试验。 为了保持分配的隐蔽性，除血库工作人员外，所有参与者、护理人员、试验调查员和结果评估员都将对干预不知情。 血库工作人员不会直接接触患者（以下简称参与者）。

项目计划 为了纳入研究，参与者将根据哥本哈根大学医院 Rigshospitalet 耳鼻喉外科的指南获取他们的日常病史。

所有参与者都将接受小型吸唇术，MSCs 将在良好生产规范 (GMP) 批准的洁净室设施中离体扩增（血库，2014 节）。 当细胞到达血库时，参与者将被随机分配到间充质干细胞的体外扩增或冷冻以备后用。 预计离体扩增阶段为 3-4 周。 纯化和分离将基于先前批准用于临床的协议。

注射所需的 MSC 量 根据已发表的动物研究，给予小鼠口干症的量为 2 x 105 至 2 x 106 [19]。 为了将这些小鼠数据转换为人类的实际剂量，我们根据以下数据进行了推断：下颌下腺的体积密度非常接近 1 (1.06-1.07 毫克/立方毫米) [27]。 在放射治疗的小鼠研究中，平均腺体重量约为 350 毫克，相当于大约 350 立方毫米的体积。 因此鼠标剂量公关。 腺体体积约为 286.000-2.860.000 个细胞 公关 cm3 压盖（从 1 x 105 到 1 x 106 计算）。 人体放疗后颌下腺体积为6.6-7.9cm3 [28]。 这对应于近似剂量 pr。 1.9 x 106 至 2.2 x 106，或 1.9 x 107 至 2.2 x 107 个细胞 pr 的患者。 颌下腺。 根据上述假设，为了不给少数细胞，我们选择了对应于 2.8*10^6 MSC/cm^3 腺体的最大剂量，即每位患者的最大总剂量约为 4,6 * 10 ^7 个间充质干细胞。 然而，为了使给予患者的剂量标准化，给予的量将根据患者下颌下腺的大小进行标准化，如下所述。

将 MSC 注射到下颌下腺中 受试者将前往耳鼻喉科 2073 部分进行住院治疗。 手术过程是在局部麻醉下使用超声引导和无菌技术完成的。 在收到 MSC 悬液或安慰剂悬液后，外科医生将识别下颌下腺并注射悬液 MSC。 计算注射的 MSC 数量 pr。 参与者基于以下计算： ，其中体积是下颌下腺的体积，以及 app 的腺体体积。 7-8cm3 是常态。 因此，给予每个参与者的细胞数量将是应用程序。总共。 之后，将为参与者提供创可贴和非处方止痛药。 MSC 将悬浮在等渗 NaCl (0.9 mg/ml) 和 1% 人白蛋白 (HA) 中，最终体积为 2ml。 安慰剂为 2ml 等渗 NaCl (0.9mg/ml) 和 HA 1%。

将在术后 3-4 周和 3-4 个月后对受区进行 MRI 随访。 MRI 用于唾液腺体积测定和受区控制。

3-4 个月后，从两个唾液腺中的一个随机取小活检。 该过程在局部麻醉下进行。 确定组织学（样品对病理学家不知情）。

当最后的 MRI、活检和唾液功能测试已经进行了大约。 治疗后 3-4 个月完成特定研究相关的测试和活动。 为了检测晚期并发症或晚期不良事件，邀请所有接受 MSC 治疗的研究参与者在治疗后 1 年和 3 年进行检查。

MSC 的安全性、分离和繁殖 血库的细胞组织获得了丹麦卫生和药物管理局的批准（根据丹麦组织法），以及制造商/进口商关于人类医药产品的授权，必要的物理设施，根据良好生产规范 (GMP) 生产 MSC 的人员和运营资源。

MSC 产品将使用流式细胞术测试公认的表面标记（CD73、CD90、CD105），并在最终发布前进行一般质量检查（细胞活力和微生物测试）。 关于 MSC 的培养，我们将使用补充有来自健康献血者的人血小板裂解物的基础培养基，而不是以前使用的动物来源血清（胎牛血清，FBS）。 这具有以下好处：1) 不可能转染已知和未知的动物病原体，也没有异种免疫的风险 2) 批次间差异小，因此生长性能更一致，因为每组都是从大约 50 名健康捐献者。

MSC的所有收获、分离、扩增等都将按照GMP规定进行。 血库拥有经丹麦卫生和药品管理局批准的洁净室设施，用于临床使用的符合 GMP 的细胞扩增，所有研究都将由经过专门培训的人员进行。

口干症和主观治疗结果的评估 治疗的主观效果是通过患者填写的 100 mm 口干症视觉模拟量表 [31] 和医生评定问卷 [32] 评估的，两者均在治疗前后进行治疗。 根据 UKU 副作用评定量表项目 3.3 [29]，还将询问每位参与者有关口干的日常症状。 该量表包括四个分数，其中 0 表示没有口干的感觉，1 表示有轻微的口干感觉，2 表示有严重的口干感觉，3 表示令人讨厌的口干感觉，使说话和进食困难。

唾液流速评估和客观治疗结果 口腔中未受刺激的全唾液分泌率的变化可能是口腔干燥症和伴随的病理性口腔病症的生物学发展的最重要参数。 整个唾液，例如来自大唾液腺和小唾液腺的混合分泌物在口腔中混合。 正确确定该值对于评估本项目的处理结果至关重要。 为了评估唾液流速，将在上午 9 点到 12 点之间收集全部唾液。 受试者将在收集前 2 小时内避免进食、饮水、吸烟和口腔卫生。 在直立坐在椅子上后，他们放松 5 分钟，然后被指示在收集期间尽可能少做动作，包括吞咽。

治疗前后未受刺激的全部唾液将使用随地吐痰法 [33] 收集，参与者在 15 分钟内将唾液吐入收集容器中。 唾液流速 (SFR) (ml/min) 确定为容器重量的增加除以收集时间（分钟）。

收集未受刺激的唾液后，指示受试者咀嚼 1 克无菌石蜡。 他们将被要求在咀嚼过程中闭上嘴巴，避免吞咽。 每隔 60 秒，他们将被要求在开始新的咀嚼期之前吐到新的唾液收集器中。 这将重复 5 分钟。

为了评估下颌下腺的治疗效果，还直接从未刺激和刺激状态下的口腔底部收集唾液。 下颌下腺未受刺激的全唾液流速将通过拭子法评估，棉卷放置在每个上颌磨牙区域的颊侧和舌下的口腔底部。 在开始收集之前，他们将被要求吞咽，以防万一，唾液将被吸管吸出。 收集在随后的两个 3 分钟的时间段内进行，并且在每个时间段结束时，将用餐巾擦拭下巴和嘴唇。 唾液流速由重量决定（1 克等于 1 毫升唾液），在收集前对卷筒和餐巾纸称重并在收集后重新称重。 流速计算为收集期间重量的增量并表示为每分钟毫升数。 来自棉卷的唾液将通过离心（1500g）提取并分析其成分。 这个刺激的收集过程将在之后用含有柑橘的面包卷进行，以最大程度地刺激下颌下腺。 从这些唾液集合中的每一个中，唾液将被等分并储存在-800C。

唾液的化学分析 整个唾液中含有大量的细菌和上皮细胞，以及龈沟液。 因此，整个唾液通常不适合敏感化学参数的分析。 为此，从单个腺体中选择性地收集唾液要好得多。 因此，大多数分析可以从腮腺和下颌下腺/舌下唾液中进行。 将对收集的唾液进行以下分析：通过离子平衡估计的 pH 值和碳酸氢盐 [34]、钠、钾、钙、磷酸盐、氯化物和氟化物 [35]、总蛋白质和选定蛋白质 [36] 以及淀粉酶 [37] . 这些研究的目的是评估治疗后唾液是否会正常化，从而提供治疗前后唾液牙齿和粘膜保护能力的估计值。

数据收集和分析 源数据：病例报告表 (CRF) 中将包含所有数据的源文档。

研究主任允许直接访问研究数据和研究文件，以供科学伦理委员会、丹麦卫生和药物管理局或其他国家类似机构的监测、审计和检查。 根据丹麦数据保护法，处理个人数据需要获得 DPA 的许可。 申请将通过法律秘书处 Rigshospitalet 发送。