子宫肌瘤组织硬度的表征

目的和目标 本项目的目标是了解是否以及如何使用 SWE 测量的子宫肌瘤组织硬度来预测和监测有症状的子宫肌瘤患者对药物治疗的反应。

目标 1：评估使用 SWE 测量绝经前妇女非肿瘤性子宫肌层和子宫肌瘤组织硬度的可行性 目标 1.1：评估 60 名患有子宫肌瘤的女性使用 SWE 测量子宫组织硬度的疗程间和疗程内可靠性子宫肌瘤和 60 名健康匹配的对照参与者。

目标 1.2：使用从 60 名患有子宫肌瘤的女性中获得的数据，通过比较 SWE 测量的体内子宫组织硬度与机械测试仪在体外测量的手术切除的子宫组织样本的硬度来评估 SWE 的有效性。

目标 1.3：在 60 名患有子宫肌瘤的女性和 60 名健康匹配的对照参与者中，评估年龄、胎次、避孕药具使用和肌瘤的存在对 SWE 测量的肌层硬度的混杂影响。

目标 2：评估使用 SWE 测量的组织硬度对绝经前妇女子宫肌瘤的分类和监测的临床适用性。

目标 2.1：确定 SWE 是否足够敏感以识别非退行性和退行性肌瘤之间的组织刚度差异，正如 60 名女性手术切除组织样本的组织学所验证的那样。

目标 2.2：确定 SWE 是否足够敏感以识别 60 名患有子宫肌瘤的女性在两个 3 个月的 SPRM 治疗前后的肌瘤组织硬度差异，并评估药物反应性（即 症状缓解）与基线 SWE 措施有关。

研究设计：这将是一项前瞻性病例对照研究，将使用混合模型（受试者内和受试者间）研究设计（图 1）。 将招募患有子宫肌瘤的女性和健康匹配的对照参与者并参加两到三个美国成像会议（取决于小组分配）。 患有肌瘤的参与者将使用 SWE 测量其子宫肌层和肌瘤硬度。 健康匹配的对照将仅测量其子宫肌层。 接受外科手术的患有肌瘤的参与者将接受子宫切除术或肌瘤切除术，组织样本将被采集并在夹具中进行测试，该夹具可测量机械张力下的刚度。 患有肌瘤寻求医疗管理的参与者将在两个为期 3 个月的醋酸乌利司他疗程（UPA；加拿大规定的 SPRM20）之前和之后进行美国影像学检查。

参与者：将招募三组 60 名 18 岁以上的绝经前女性：

1. 寻求子宫肌瘤 (FIB-Sx) 手术治疗的患者将从同意接受手术（子宫切除术或子宫肌瘤切除术，主要指征为肌瘤）的患者名单中招募，由渥太华医院微创妇科组的一名成员（由指定的主要申请人领导） , S. 辛格）。 如果 FIB-Sx 在 US 上发现 >5 个肌瘤或根据临床、手术或肉眼病理检查怀疑为平滑肌肉瘤，则 FIB-Sx 将被排除在外。
2. 寻求子宫肌瘤 (FIB-Mx) 医疗管理的患者将从转介名单中筛选到渥太华医院的雪莉 E.格林伯格妇女健康中心 (SEGWHC)，如果他们已开出疗程，则在咨询时招募UPA 由他们的主治医师。 如果他们在招募后 3 个月内在美国或之前的 SPRM/GnRH 类似物疗程中发现 >5 个肌瘤，则 FIB-Mx 将被排除在外。
3. 将通过广告海报、口耳相传和社交媒体从渥太华社区招募健康对照参与者 (CON)（在年龄、胎次和 BMI 方面与 FIB 相匹配）。 CON 将被排除在外，因为他们有子宫病理学病史（例如 子宫腺肌病、增生、子宫内膜异位症）、月经周期不规律、目前怀孕或在招聘前的最后六个月内怀孕。

初步评估：控制组 (CON) 和手术组 (FIB-Sx) 中同意的女性将参加两项评估。 医疗流 (FIB-Mx) 中同意的女性将在招募后尽早方便时参加一次访问，在治疗开始后三个月进行第二次访问，在治疗开始后 6 个月进行第三次访问。 每次就诊时，女性将在 10 个健康部位和最多 5 个肌瘤部位接受剪切波弹性成像 (SWE) 和 3D US（Supersonic UltrafastTM Aixplorer®，Apexium Medical，加拿大）对其子宫进行整体评估。 SWE 和体积将记录在 10 帧剪辑系列中。 将对子宫和选定的肌瘤进行形态学测量，并根据 3D 尺寸和位置图为肌瘤赋予识别号。 SWE 将用于对所有感兴趣的部位的组织硬度进行相关测量。 每次测量重复三次。 CON 和 FIB-Sx 流中的女性将在第一次访问期间接受第二次相同的成像会议，并在第二次访问期间接受一次成像会议。 FIB-Mx 流的参与者将在每次访问时收到一个成像会话。

手术干预：将记录手术方法（腹部与腹腔镜）以及次要结果，包括手术时间、失血量、手术技术转换、失败/不完全切除以及执行的其他程序。 这些数据将用于描述目的，并有助于为我们的长期研究目标开发数据库。

组织取样：对于 FIB-Sx 流的参与者，手术方法（子宫肌瘤切除术或子宫切除术 + 腹部或腹腔镜）、切除过程和次要结果，包括手术时间、失血量、手术技术、失败/不完全切除、术中或术后-手术并发症和额外程序将被记录以用于描述目的。 粉碎的组织标本将被排除在外。 所有手术切除的组织都将按照标准程序送往病理学进行全面检查和处理。 对于子宫切除术病例，病理学助理（经过培训并在合作者 S. Strickland 的监督下）将从感兴趣的子宫肌层切除五个 1cm3 的非肿瘤组织样本，并从每个感兴趣的肌瘤切除 1cm3 的切片。 对于子宫肌瘤切除术病例，同样会从每个感兴趣的肌瘤中切除 1cm3 的切片。 在切除了 3 个以上肌瘤的手术病例中，参与的外科医生将在病理检查单中包括在美国成像会议上给出的研究特定肌瘤识别号。 研究小组的一名成员将在解剖时与病理学助理会面，以确保将每个样本放入装有等渗盐水的单独瓶子中，并贴上其唯一的研究识别号。 样品将被运送到渥太华心脏研究所的 M. Labrosse（合作者）实验室进行机械测试。

医疗干预：将记录医疗以及与患者症状和生活质量相关的次要结果。这些数据将用于描述目的，并有助于为我们的长期研究目标开发数据库。

机械测试：所有样品将保存在盐水中并在切除后 24 小时内进行测试。 样品将被进一步切割成 2x10mm 的切片，并在合作者 M. Labrosse 的实验室中装入机械夹具（Biotester，CellScale，加拿大滑铁卢），并按照程序在 37°C 下进行周期性张力测试（1Hz，2-3% 应变）在文献中开发用于对子宫组织进行机械测试。 弹性模量（E，kPa），类似于刚度，和刚度对比度（E_fibroid/E_myometrium）将为每个样本计算三次并取平均值。 完成机械测试协议大约需要 2 小时。 机械载荷将在位移控制下（2-3% 应变）以消除损伤组织的风险，从而允许重复测量和组织学分析。 所有样品在测试后将立即置于 10% 中性缓冲福尔马林中，并送回病理学进行明确诊断。 将对病理报告和幻灯片进行回顾性审查，以提取描述性肌瘤​​特征。 获得后续 SWE 测量、机械刚度测量和审查病理报告的研究团队成员将不知道初始 SWE 测量的结果。

统计分析：将对所有数据进行正态性测试，并酌情使用与下文所述的等效的非参数测试。 所有测试都将使用 SPSS 统计软件（v25，IMB Corp.，Armonk，USA）进行，显着性将被接受为 p<0.05。 将进行适当的事后比较。 假定 SWE 峰值和平均刚度的因变量是相互关联的。

目标 1.1：双向 (3x2) 多变量方差分析 (MANOVA) 将测试平均和峰值刚度 (kPa) 的显着差异，因为它们与每个测量站点的测试时间（重复和会话）的自变量相关。 单向方差分析 (ANOVA) 和相关 t 检验将用于对显着主效应进行事后 Bonferroni 校正评估。 相关 t 检验将确定测量平面是否显着影响 SWE 刚度测量。 类内相关系数和测量标准误差将评估会话内和会话间以及 SWE 刚度测量的平面间可靠性。

目标 1.2：单变量线性回归将绘制 SWE 平均值和峰值刚度与复弹性模量之间的关系，其中复弹性模量被视为标准。 对于非线性关系，将进行适当的变换。

目标 1.3：协方差的双向多变量分析将检验部位（宫颈交界处、峡部、眼底）和组别（FIB 与 CON）对峰值和平均肌层硬度的影响以及年龄、胎次和避孕药具使用对子宫肌层硬度的混杂影响调整后的组均值差。 如果观察到显着的主效应/交互作用，则将使用独立的 t 检验进行事后评估。 逻辑回归将绘制年龄、胎次和避孕药具使用与每个测量部位子宫肌层硬度的关系。 可接受的回归将解释数据中 >80% 的方差。 对于非线性关系，将进行适当的变换。

目标 2.1：根据病理报告，肌瘤将被归类为非退行性（即 正常）或退行性（包括表现的所有变化）。 单向 MANOVA 将评估肌瘤类型（非退行性与退行性）和子宫组织峰值以及使用 SWE 测量的平均硬度的组间差异，而显着主效应的事后评估将涉及使用适当的 Bonferroni 校正的独立 t 检验。

目标 2.2：SWE 测量值将在每个站点的会话内重复中进行整体平均。 双向 MANOVA 将评估地点和时间（课程前、课程后 1、课程后 2）用 SWE 测量的平均和峰值刚度差异 单向方差分析和相关 t 检验将用于事后 Bonferroni 校正评估的显着主效应。