Caracterização da Rigidez do Tecido Fibróide Uterino

Metas e objetivos O objetivo deste projeto é entender se e como a rigidez do tecido mioma uterino, medida por SWE, pode ser usada para prever e monitorar a resposta à terapia médica em pacientes com miomas uterinos sintomáticos.

Objetivo 1: Avaliar a viabilidade do uso do SWE para medir a rigidez do miométrio não neoplásico e do tecido fibroide uterino em mulheres na pré-menopausa. miomas uterinos e 60 participantes de controle pareados saudáveis.

Objetivo 1.2: Usando dados adquiridos de 60 mulheres com miomas uterinos, a validade do SWE será avaliada comparando a rigidez do tecido uterino in vivo medida pelo SWE com a rigidez de amostras de tecido uterino extirpadas cirurgicamente medidas ex vivo por um testador mecânico.

Objetivo 1.3: Avaliar o efeito de confusão da idade, paridade, uso de anticoncepcionais e presença de miomas na rigidez miometrial medida por SWE em 60 mulheres com miomas uterinos e 60 participantes de controle pareados saudáveis.

Objetivo 2: Avaliar a aplicabilidade clínica do uso da rigidez tecidual medida por SWE para a classificação e monitoramento de miomas uterinos em mulheres na pré-menopausa.

Objetivo 2.1: Determinar se o SWE é sensível o suficiente para identificar diferenças na rigidez do tecido entre miomas não degenerativos e degenerativos, conforme validado pela histologia de amostras de tecido extirpadas cirurgicamente de 60 mulheres.

Objetivo 2.2: Determinar se o SWE é sensível o suficiente para identificar diferenças na rigidez do tecido fibróide em 60 mulheres com miomas uterinos antes e depois de dois cursos de 3 meses de terapia com SPRM e avaliar se a resposta médica (ou seja, alívio dos sintomas) está relacionado às medidas de linha de base SWE.

Desenho do estudo: Este será um estudo de caso-controle prospectivo que usará um desenho de estudo de modelo misto (dentro e entre sujeitos) (Figura 1). Mulheres com miomas uterinos e participantes de controle pareados saudáveis ​​serão recrutadas e participarão de duas ou três sessões de imagem dos EUA (dependendo da designação do grupo). Os participantes com miomas terão o miométrio e a rigidez dos miomas medidos usando o SWE. Os controles pareados saudáveis ​​terão seu miométrio medido apenas. Os participantes com miomas que recebem intervenção cirúrgica serão submetidos a uma histerectomia ou miomectomia e as amostras de tecido serão colhidas e testadas em um gabarito que mede a rigidez sob tensão mecânica. As participantes com miomas que procuram tratamento médico terão uma sessão de imagem dos EUA antes e depois de dois cursos de 3 meses de acetato de ulipristal (UPA; um SPRM prescrito no Canadá20).

Participantes: Serão recrutados três grupos de 60 mulheres na pré-menopausa com mais de 18 anos:

1. As pacientes que buscam tratamento cirúrgico para miomas uterinos (FIB-Sx) serão recrutadas de uma lista de pacientes com consentimento para cirurgia (histerectomia ou miomectomia com indicação primária de miomas) por um membro do Grupo de Ginecologia Minimamente Invasiva do Ottawa Hospital (liderado pelo Requerente Principal Nomeado , S. Singh). FIB-Sx serão excluídos se tiverem > 5 miomas identificados na US ou suspeita de leiomiossarcoma com base em exame clínico, cirúrgico ou patológico macroscópico.
2. As pacientes que procuram tratamento médico para miomas uterinos (FIB-Mx) serão selecionadas de uma lista de encaminhamentos para o Shirley E. Greenberg Women's Health Center (SEGWHC) no Ottawa Hospital e recrutadas no momento da consulta se tiverem sido prescritos um curso da UPA por seu médico assistente. FIB-Mx serão excluídos se tiverem > 5 miomas identificados em US ou curso anterior de análogos de SPRM/GnRH dentro de 3 meses após o recrutamento.
3. Participantes de controle saudáveis ​​(CON) (correspondentes ao FIB em idade, paridade e IMC) serão recrutados na comunidade de Ottawa por meio de cartazes de propaganda, boca a boca e mídia social. CON serão excluídos se tiverem histórico de patologia uterina (por exemplo, adenomiose, hiperplasia, endometriose), têm ciclos menstruais irregulares, estão grávidas ou estiveram grávidas nos últimos seis meses antes do recrutamento.

Avaliação inicial: As mulheres consentidas nos fluxos de controle (CON) e cirúrgico (FIB-Sx) participarão de duas avaliações. As mulheres consentidas no fluxo médico (FIB-Mx) comparecerão a uma consulta assim que possível após o recrutamento, outra aos três meses após o início do tratamento e a terceira visita aos 6 meses após o início do tratamento. Em cada visita, as mulheres serão submetidas a avaliações de elastografia por ondas de cisalhamento (SWE) e US 3D (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Canadá) de seu útero como um todo, em 10 locais saudáveis ​​e em até 5 locais com miomas. SWE e volumes serão gravados em séries de 10 clipes de quadros. Medições morfológicas do útero e miomas selecionados serão feitas e os miomas receberão números de identificação com base em tamanho 3D e mapa de localização. SWE será usado para tomar medidas relevantes de rigidez do tecido em todos os locais de interesse. Serão realizadas três repetições de cada medição. As mulheres nos fluxos CON e FIB-Sx receberão uma segunda sessão de imagem idêntica durante a primeira visita e uma única sessão de imagem durante a segunda visita. Os participantes do fluxo FIB-Mx receberão uma única sessão de imagem em cada visita.

Intervenção cirúrgica: a abordagem cirúrgica (abdominal vs laparoscópica) será registrada, bem como os resultados secundários, incluindo tempo de operação, perda de sangue, conversões de técnicas cirúrgicas, excisões incompletas/com falha e procedimentos adicionais realizados. Esses dados serão usados ​​para fins descritivos e contribuirão para o desenvolvimento de um banco de dados para nosso objetivo de pesquisa de longo prazo.

Amostragem de tecidos: Para participantes do fluxo FIB-Sx, a abordagem cirúrgica (miomectomia ou histerectomia + abdominal ou laparoscópica), curso da ressecção e resultados secundários, incluindo tempo de operação, perda de sangue, técnica cirúrgica, excisões incompletas/com falha, intra ou pós - complicação operatória e procedimentos adicionais serão registrados para fins descritivos. Amostras de tecido morcelado serão excluídas. Todo tecido extirpado cirurgicamente será enviado para a patologia para inspeção grosseira e processamento de acordo com os procedimentos padrão. Para casos de histerectomia, um assistente de patologia (treinado e sob a supervisão do colaborador S. Strickland) irá extirpar cinco amostras de 1cm3 de tecido não neoplásico de locais de interesse do miométrio e seções de 1cm3 de cada mioma de interesse. Para casos de miomectomia, seções de 1 cm3 de cada mioma de interesse serão extirpadas de forma semelhante. Em casos cirúrgicos com >3 miomas excisados, o cirurgião participante incluirá o número de identificação do mioma específico do estudo fornecido na sessão de imagem de US na requisição de patologia. Um membro da equipe de pesquisa se encontrará com o assistente de patologia no momento da dissecação para garantir que cada amostra seja colocada em frascos individuais com solução salina isotônica e rotulada com seu número de identificação de estudo exclusivo. As amostras serão transportadas para o laboratório de M. Labrosse (colaborador) no Ottawa Heart Institute para testes mecânicos.

Intervenção médica: O tratamento médico será registrado, bem como os resultados secundários relacionados aos sintomas e à qualidade de vida do paciente. Esses dados serão usados ​​para fins descritivos e contribuirão para o desenvolvimento de um banco de dados para nosso objetivo de pesquisa de longo prazo.

Teste Mecânico: Todas as amostras serão armazenadas em solução salina e testadas dentro de 24 horas após a excisão. As amostras serão dissecadas em fatias de 2x10mm e carregadas em um gabarito mecânico (Biotester, CellScale, Waterloo, Canadá) no laboratório do colaborador M. Labrosse e testadas a 37°C, ciclicamente em tensão (1Hz, 2-3% de tensão) seguindo os procedimentos desenvolvido na literatura para testes mecânicos em tecido uterino. O módulo de elasticidade (E, kPa), análogo à rigidez, e a relação de contraste de rigidez (E_fibróide/E_miométrio) serão calculados três vezes para cada amostra e a média será calculada. O protocolo de teste mecânico levará aproximadamente 2 horas para ser concluído. A carga mecânica estará sob controle de deslocamento (2-3% de tensão) para eliminar o risco de danificar os tecidos, permitindo medições repetidas e análises histológicas. Todas as amostras serão colocadas em formalina tamponada neutra a 10% imediatamente após o teste e retornadas à patologia para diagnóstico definitivo. Relatórios e slides de patologia serão revisados ​​retrospectivamente para extrair características descritivas dos miomas. Os membros da equipe de pesquisa que adquirirem medições subsequentes de SWE, medições de rigidez mecânica e revisarem relatórios de patologia não terão acesso aos resultados da medição inicial de SWE.

Análises estatísticas: Todos os dados serão testados quanto à normalidade e testes não paramétricos equivalentes aos descritos abaixo serão usados ​​conforme apropriado. Todos os testes serão realizados no software estatístico SPSS (v25, IMB Corp., Armonk, EUA) e a significância será aceita como p<0,05. Comparações post-hoc apropriadas serão realizadas. Variáveis ​​dependentes de pico de SWE e rigidez média são consideradas inter-relacionadas.

Objetivo 1.1: Análises multivariadas de duas vias (3x2) de variância (MANOVAs) testarão diferenças significativas na rigidez média e de pico (kPa) conforme se relacionam com a variável independente do tempo de teste (repetição e sessão) para cada local de medição. Análises de variância de uma via (ANOVAs) e testes t dependentes serão usados ​​para avaliação corrigida de Bonferroni post-hoc de efeitos principais significativos. Os testes t dependentes determinarão se o plano de medição afeta significativamente as medidas de rigidez do SWE. Os coeficientes de correlação intraclasse e o erro padrão das medições avaliarão a confiabilidade intra e intersessões e entre planos das medições de rigidez SWE.

Objetivo 1.2: Regressões lineares univariadas mapearão a relação entre a média do SWE e a rigidez de pico e o módulo de elasticidade complexo, sendo o módulo de elasticidade complexo considerado o critério padrão. Para relacionamentos não lineares, as transformações apropriadas serão feitas.

Objetivo 1.3: Análises multivariadas de duas vias de covariância testarão o efeito do local (junção cervical, istmo, fundo) e grupo (FIB vs CON) no pico e na rigidez média do miométrio e os efeitos de confusão da idade, paridade e uso de contraceptivos no diferença média ajustada do grupo. Testes t independentes serão usados ​​para avaliação post-hoc se for observado um efeito/interação principal significativo. As regressões logísticas mapearão a relação entre idade, paridade e uso de anticoncepcionais com a rigidez miometrial em cada local de medição. Regressões aceitáveis ​​explicarão >80% da variância dos dados. Para relacionamentos não lineares, as transformações apropriadas serão feitas.

Objetivo 2.1: Com base no relatório da patologia, os miomas serão classificados como não degenerativos (ou seja, normal) ou degenerativa (incluindo todas as variações na apresentação). As MANOVAs unidirecionais avaliarão entre as diferenças de grupo no tipo de mioma (não degenerativo vs degenerativo) e pico de tecido uterino e rigidez média medida com SWE, enquanto a avaliação post-hoc de efeitos principais significativos envolverá testes t independentes usando correções de Bonferroni apropriadas.

Objetivo 2.2: As medições de SWE serão calculadas com base nas repetições intra-sessão para cada local. MANOVAs de duas vias avaliarão as diferenças de local e tempo (pré, pós-curso 1, pós-curso 2) na rigidez média e de pico medida com SWE ANOVAs unidirecionais e testes t dependentes serão usados ​​para avaliação corrigida de Bonferroni post-hoc de efeitos principais significativos.