Karakterisering van baarmoederfibroid-weefselstijfheid

Doelstellingen Het doel van dit project is te begrijpen of en hoe de stijfheid van baarmoederfibroomweefsel, gemeten met SWE, kan worden gebruikt om de respons op medische therapie bij patiënten met symptomatische baarmoederfibromen te voorspellen en te volgen.

Doel 1: De haalbaarheid beoordelen van het gebruik van SWE voor het meten van de stijfheid van niet-neoplastisch myometrium en baarmoederfibroomweefsel bij premenopauzale vrouwen Doelstelling 1.1: Beoordelen van de inter- en intra-sessie betrouwbaarheid van het meten van baarmoederweefselstijfheid met SWE bij 60 vrouwen met baarmoederfibromen en 60 gezonde gematchte controledeelnemers.

Doelstelling 1.2: Aan de hand van gegevens die zijn verkregen van de 60 vrouwen met baarmoederfibromen, zal de validiteit van SWE worden beoordeeld door in vivo de stijfheid van baarmoederweefsel gemeten door SWE te vergelijken met de stijfheid van chirurgisch weggesneden baarmoederweefselmonsters ex vivo gemeten door een mechanische tester.

Doelstelling 1.3: Het bepalen van het verwarrende effect van leeftijd, pariteit, anticonceptiegebruik en aanwezigheid van vleesbomen op myometriumstijfheid gemeten door SWE bij 60 vrouwen met baarmoederfibromen en 60 gezonde gematchte controledeelnemers.

Doel 2: De klinische toepasbaarheid beoordelen van het gebruik van weefselstijfheid gemeten door SWE voor de classificatie en monitoring van baarmoederfibromen bij premenopauzale vrouwen.

Doelstelling 2.1: Vaststellen of SWE gevoelig genoeg is om verschillen in weefselstijfheid tussen niet-degeneratieve en degeneratieve vleesbomen te identificeren, zoals gevalideerd door histologie van chirurgisch weggesneden weefselmonsters van 60 vrouwen.

Doelstelling 2.2: Vaststellen of SWE gevoelig genoeg is om verschillen in vleesboomstijfheid te identificeren bij 60 vrouwen met baarmoederfibromen voor en na twee kuren van 3 maanden SPRM-therapie en evalueren of medische responsiviteit (d.w.z. symptoomverlichting) is gerelateerd aan basislijn SWE-maatregelen.

Onderzoeksopzet: Dit zal een prospectieve case-control studie zijn die gebruik zal maken van een gemengd model (binnen en tussen proefpersonen) onderzoeksopzet (Figuur 1). Vrouwen met baarmoederfibromen en gezonde gematchte controledeelnemers zullen worden geworven en zullen twee of drie beeldvormingssessies in de VS bijwonen (afhankelijk van de groepsopdracht). Bij deelnemers met vleesbomen wordt zowel hun myometrium- als vleesboomstijfheid gemeten met behulp van SWE. Bij gezonde gematchte controles wordt alleen het myometrium gemeten. Deelnemers met vleesbomen die een chirurgische ingreep ondergaan, ondergaan een hysterectomie of myomectomie en weefselmonsters worden geoogst en getest in een mal die de stijfheid onder mechanische spanning meet. Deelnemers met vleesbomen die medisch behandeld willen worden, krijgen een beeldvormingssessie in de VS voor en na twee kuren van 3 maanden met ulipristalacetaat (UPA; een SPRM voorgeschreven in Canada20).

Deelnemers: Er worden drie groepen van 60 premenopauzale vrouwen ouder dan 18 jaar geworven:

1. Patiënten die chirurgisch behandeld willen worden voor baarmoederfibromen (FIB-Sx) zullen worden geworven uit een lijst van patiënten die toestemming hebben gegeven voor een operatie (hysterectomie of myomectomie met primaire indicatie van vleesbomen) door een lid van The Ottawa Hospital Minimally Invasive Gynecology Group (geleid door genomineerde hoofdaanvrager , S Singh). FIB-Sx wordt uitgesloten als ze >5 vleesbomen hebben geïdentificeerd op US of verdenking van leiomyosarcoom op basis van klinisch, chirurgisch of grof pathologisch onderzoek.
2. Patiënten die medische behandeling zoeken voor baarmoederfibromen (FIB-Mx) zullen worden gescreend op een lijst met verwijzingen naar het Shirley E. Greenberg Women's Health Center (SEGWHC) in het Ottawa Hospital en op het moment van consult worden gerekruteerd als ze een cursus hebben gekregen van UPA door hun behandelende arts. FIB-Mx wordt uitgesloten als ze binnen 3 maanden na rekrutering >5 vleesbomen hebben geïdentificeerd op US of eerdere kuren met SPRM/GnRH-analogen.
3. Gezonde controledeelnemers (CON) (gematcht aan FIB in leeftijd, pariteit en BMI) zullen worden gerekruteerd uit de Ottawa-gemeenschap via reclameposters, mond-tot-mondreclame en sociale media. CON zal worden uitgesloten als ze een voorgeschiedenis van uteriene pathologie hebben (bijv. adenomyose, hyperplasie, endometriose), een onregelmatige menstruatiecyclus heeft, momenteel zwanger bent of in de laatste zes maanden voorafgaand aan de werving zwanger bent geweest.

Eerste beoordeling: Toegestane vrouwen in de controle- (CON) en chirurgische (FIB-Sx) streams zullen twee evaluaties bijwonen. Toegestemde vrouwen in de medische stroom (FIB-Mx) zullen zo snel mogelijk na rekrutering één bezoek bijwonen, een ander drie maanden na de start van de behandeling en het derde bezoek zes maanden na de start van de behandeling. Bij elk bezoek ondergaan vrouwen shear wave elastography (SWE) en 3D US (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Canada) beoordelingen van hun baarmoeder als geheel, op 10 gezonde locaties en op maximaal 5 vleesbomen. SWE en volumes worden opgenomen in series van 10 frameclips. Morfologische metingen van de baarmoeder en geselecteerde vleesbomen zullen worden gemaakt en vleesbomen zullen identificatienummers krijgen op basis van een 3D-grootte en locatiekaart. SWE zal worden gebruikt om relevante metingen van weefselstijfheid te nemen op alle interessante locaties. Er worden drie herhalingen van elke meting uitgevoerd. Vrouwen in de CON- en FIB-Sx-streams krijgen een tweede identieke beeldvormingssessie tijdens hun eerste bezoek en een enkele beeldvormingssessie tijdens het tweede bezoek. Deelnemers aan de FIB-Mx-stream krijgen bij elk bezoek een enkele beeldvormingssessie.

Chirurgische interventie: de chirurgische benadering (abdominaal versus laparoscopisch) wordt geregistreerd, evenals secundaire resultaten, waaronder operatietijd, bloedverlies, conversies van chirurgische technieken, mislukte/onvolledige excisies en aanvullende procedures die worden uitgevoerd. Deze gegevens zullen worden gebruikt voor beschrijvende doeleinden en bijdragen aan de ontwikkeling van een database voor ons langetermijnonderzoeksdoel.

Weefselbemonstering: voor deelnemers aan de FIB-Sx-stroom, de chirurgische benadering (myomectomie of hysterectomie + abdominaal of laparoscopisch), resectieverloop en secundaire uitkomsten, waaronder operatietijd, bloedverlies, chirurgische techniek, mislukte/onvolledige excisies, intra- of postoperatieve -operatieve complicaties en aanvullende procedures worden geregistreerd voor beschrijvende doeleinden. Gemorcelleerde weefselspecimens worden uitgesloten. Al het chirurgisch weggesneden weefsel wordt naar de pathologie gestuurd voor grove inspectie en verwerking volgens standaardprocedures. Voor gevallen van hysterectomie zal een pathologie-assistent (getraind en onder supervisie van medewerker S. Strickland) vijf monsters van 1 cm3 niet-neoplastisch weefsel wegsnijden van myometriumlocaties die van belang zijn en secties van 1 cm3 van elke vleesboom van belang. Voor gevallen van myomectomie worden secties van 1 cm3 van elke fibroid van belang op dezelfde manier weggesneden. In chirurgische gevallen waarbij >3 vleesbomen zijn weggesneden, zal de deelnemende chirurg het studiespecifieke vleesboomidentificatienummer dat tijdens de beeldvormingssessie in de VS is gegeven, opnemen in de pathologieaanvraag. Een lid van het onderzoeksteam zal de pathologie-assistent ontmoeten op het moment van dissectie om ervoor te zorgen dat elk monster in afzonderlijke flessen met isotone zoutoplossing wordt geplaatst en wordt gelabeld met het unieke studie-identificatienummer. Monsters zullen worden vervoerd naar het laboratorium van M. Labrosse (medewerker) in het Ottawa Heart Institute voor mechanisch testen.

Medische interventie: medische behandeling wordt geregistreerd, evenals secundaire uitkomsten met betrekking tot symptomen van de patiënt en kwaliteit van leven. Deze gegevens zullen worden gebruikt voor beschrijvende doeleinden en bijdragen aan de ontwikkeling van een database voor ons langetermijnonderzoeksdoel.

Mechanisch testen: alle monsters worden in zoutoplossing bewaard en binnen 24 uur na uitsnijding getest. Monsters zullen verder worden ontleed in plakjes van 2 x 10 mm en in een mechanische mal (Bioster, CellScale, Waterloo, Canada) worden geladen in het laboratorium van medewerker M. Labrosse en getest bij 37 ° C, cyclisch onder spanning (1 Hz, 2-3% spanning) volgens procedures ontwikkeld in de literatuur voor mechanisch testen op baarmoederweefsel. De elasticiteitsmodulus (E, kPa), analoog aan de stijfheid, en de contrastverhouding van de stijfheid (E_fibroid/E_myometrium) worden voor elk monster drie keer berekend en gemiddeld. Het mechanische testprotocol duurt ongeveer 2 uur. Mechanische belasting vindt plaats onder verplaatsingscontrole (2-3% belasting) om het risico op weefselbeschadiging te elimineren, waardoor herhaalde metingen en histologische analyse mogelijk zijn. Alle monsters worden onmiddellijk na het testen in 10% neutraal gebufferde formaline geplaatst en teruggestuurd naar de pathologie voor definitieve diagnose. Pathologierapporten en dia's zullen achteraf worden beoordeeld om beschrijvende fibroid-kenmerken te extraheren. Leden van het onderzoeksteam die daaropvolgende SWE-metingen, mechanische stijfheidsmetingen doen en pathologierapporten beoordelen, zijn blind voor de resultaten van de initiële SWE-meting.

Statistische analyses: alle gegevens worden getest op normaliteit en indien van toepassing worden equivalente niet-parametrische tests gebruikt die hieronder worden beschreven. Alle tests worden uitgevoerd met behulp van statistische SPSS-software (v25, IMB Corp., Armonk, VS) en de significantie wordt geaccepteerd als p<0,05. Passende post-hoc vergelijkingen zullen worden uitgevoerd. Afhankelijke variabelen van SWE-piek en gemiddelde stijfheid worden verondersteld onderling gerelateerd te zijn.

Doelstelling 1.1: Tweewegs (3x2) multivariate variantieanalyses (MANOVA's) zullen testen op significante verschillen in gemiddelde en piekstijfheid (kPa) in relatie tot de onafhankelijke variabele testtijd (herhaling en sessie) voor elke meetplaats. One-way variantieanalyses (ANOVA's) en afhankelijke t-testen zullen worden gebruikt voor post-hoc Bonferroni-gecorrigeerde evaluatie van significante hoofdeffecten. Afhankelijke t-testen zullen bepalen of het meetvlak de SWE-stijfheidsmetingen aanzienlijk beïnvloedt. Intra-class correlatiecoëfficiënten en standaardfout van metingen zullen de intra- en intersessie- en tussenvlakbetrouwbaarheid van SWE-stijfheidsmetingen evalueren.

Doelstelling 1.2: Univariate lineaire regressies zullen de relatie tussen SWE gemiddelde en piekstijfheid en de complexe elasticiteitsmodulus in kaart brengen, waarbij de complexe elasticiteitsmodulus als de criteriumstandaard wordt beschouwd. Voor niet-lineaire relaties zullen passende transformaties worden gemaakt.

Doelstelling 1.3: Tweeweg multivariate analyses van covariantie testen het effect van plaats (cervicale overgang, landengte, fundus) en groep (FIB versus CON) op piek- en gemiddelde myometriumstijfheid en de verstorende effecten van leeftijd, pariteit en anticonceptiegebruik op de aangepast groepsgemiddeld verschil. Onafhankelijke t-toetsen zullen worden gebruikt voor post-hoc evaluatie als er een significant hoofdeffect/interactie wordt waargenomen. Logistische regressies zullen de relatie tussen leeftijd, pariteit en gebruik van anticonceptie en myometriumstijfheid op elke meetplaats in kaart brengen. Aanvaardbare regressies verklaren >80% van de variantie in de gegevens. Voor niet-lineaire relaties zullen passende transformaties worden gemaakt.

Doelstelling 2.1: Op basis van het pathologierapport worden vleesbomen geclassificeerd als niet-degeneratief (d.w.z. normaal) of degeneratief (inclusief alle variaties in presentatie). One-way MANOVA's zullen evalueren tussen groepsverschillen in fibroid-type (niet-degeneratief versus degeneratief) en baarmoederweefselpiek en gemiddelde stijfheid gemeten met SWE, terwijl post-hoc evaluatie van significante hoofdeffecten onafhankelijke t-tests zal omvatten met behulp van geschikte Bonferroni-correcties.

Doelstelling 2.2: SWE-metingen zullen voor elke locatie worden gemiddeld over herhalingen binnen de sessie. Tweezijdige MANOVA's evalueren plaats en tijd (vóór, na cursus 1, na cursus 2) verschillen in gemiddelde en piekstijfheid gemeten met SWE One-way ANOVA's en afhankelijke t-testen zullen worden gebruikt voor post-hoc Bonferroni gecorrigeerde evaluatie van belangrijke hoofdeffecten.