Charakterizace tuhosti děložní myomové tkáně

Cíle a cíle Cílem tohoto projektu je porozumět tomu, zda a jak lze tuhost tkáně děložních myomů, měřenou pomocí SWE, použít k predikci a sledování odpovědi na medikamentózní terapii u pacientek se symptomatickými děložními myomy.

Cíl 1: Posoudit proveditelnost použití SWE pro měření tuhosti nenádorového myometria a děložní fibroidní tkáně u premenopauzálních žen Cíl 1.1: Posoudit mezisezení a spolehlivost měření tuhosti děložní tkáně pomocí SWE u 60 žen s děložní myomy a 60 zdravých odpovídajících kontrolních účastníků.

Cíl 1.2: Pomocí dat získaných od 60 žen s děložními myomy bude validita SWE hodnocena porovnáním in vivo tuhosti děložní tkáně měřené pomocí SWE s tuhostí chirurgicky vyříznutých vzorků děložní tkáně měřené ex vivo mechanickým testerem.

Cíl 1.3: Zhodnotit matoucí účinek věku, parity, užívání antikoncepce a přítomnosti myomů na tuhost myometria měřený pomocí SWE u 60 žen s děložními myomy a 60 zdravých účastnic odpovídající kontroly.

Cíl 2: Posoudit klinickou použitelnost použití tuhosti tkáně měřené pomocí SWE pro klasifikaci a monitorování děložních myomů u premenopauzálních žen.

Cíl 2.1: Zjistit, zda je SWE dostatečně citlivý na to, aby identifikoval rozdíly v tuhosti tkáně mezi nedegenerativními a degenerativními myomy, jak bylo ověřeno histologií z chirurgicky vyříznutých vzorků tkáně 60 žen.

Cíl 2.2: Zjistit, zda je SWE dostatečně citlivá na to, aby identifikovala rozdíly ve ztuhlosti myomové tkáně u 60 žen s děložními myomy před a po dvou 3měsíčních kúře SPRM terapie a vyhodnotit, zda lékařská reakce (tj. úleva od symptomů) souvisí se základními měřeními SWE.

Návrh studie: Toto bude prospektivní případová-kontrolní studie, která bude používat smíšený model studie (v rámci a mezi subjekty) (obrázek 1). Ženy s děložními myomy a zdravé kontrolní účastnice budou přijaty a zúčastní se dvou nebo tří zobrazovacích sezení v USA (v závislosti na přidělení skupiny). U účastníků s myomy bude pomocí SWE změřena ztuhlost myometria i myomu. Zdravým odpovídajícím kontrolám bude změřeno pouze myometrium. Účastníci s fibroidy podstupující chirurgický zákrok podstoupí hysterektomii nebo myomektomii a vzorky tkáně budou odebrány a testovány v přípravku, který měří tuhost při mechanickém napětí. Účastníci s fibroidy, kteří hledají lékařskou péči, absolvují vyšetření v USA před a po dvou 3měsíčních cyklech ulipristal acetátu (UPA; SPRM předepsaný v Kanadě20).

Účastníci: Budou přijaty tři skupiny 60 premenopauzálních žen starších 18 let:

1. Pacientky, které hledají chirurgickou léčbu děložních myomů (FIB-Sx), budou vybrány ze seznamu pacientek, které schválily operaci (hysterektomii nebo myomektomii s primární indikací fibroidů) členem skupiny minimálně invazivní gynekologie The Ottawa Hospital (vedené jmenovaným hlavním žadatelem). , S. Singh). FIB-Sx bude vyloučen, pokud mají >5 fibroidů identifikovaných na UZ nebo podezření na leiomyosarkom na základě klinického, chirurgického nebo makroskopického patologického vyšetření.
2. Pacientky, které hledají lékařskou péči pro děložní myomy (FIB-Mx), budou podrobeny screeningu ze seznamu doporučení do Shirley E. Greenberg Women's Health Center (SEGWHC) v Ottawské nemocnici a budou přijaty v době konzultace, pokud jim byl předepsán kurz UPA jejich ošetřujícím lékařem. FIB-Mx bude vyloučena, pokud mají >5 fibroidů identifikovaných během US nebo předchozího cyklu analogů SPRM/GnRH do 3 měsíců od náboru.
3. Účastníci zdravé kontroly (CON) (ve věku, paritě a BMI odpovídající FIB) budou rekrutováni z komunity Ottawy prostřednictvím reklamních plakátů, ústního podání a sociálních médií. CON bude vyloučeno, pokud mají v anamnéze děložní patologii (např. adenomyóza, hyperplazie, endometrióza), mají nepravidelné menstruační cykly, jsou v současné době těhotné nebo byly těhotné během posledních šesti měsíců před náborem.

Počáteční hodnocení: Souhlasné ženy v kontrolním (CON) a chirurgickém (FIB-Sx) proudu se zúčastní dvou hodnocení. Souhlasné ženy v lékařském proudu (FIB-Mx) se zúčastní jedné návštěvy co nejdříve po náboru, další tři měsíce po zahájení léčby a třetí návštěvy 6 měsíců po zahájení léčby. Při každé návštěvě podstoupí ženy elastografii smykovou vlnou (SWE) a 3D US (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Kanada) hodnocení jejich dělohy jako celku, na 10 zdravých místech a až na 5 místech myomů. SWE a svazky budou zaznamenány v sérii klipů po 10 snímcích. Budou provedena morfologická měření dělohy a vybraných myomů a myomům budou přidělena identifikační čísla na základě 3D mapy velikosti a umístění. SWE bude použit k provedení příslušných měření tuhosti tkáně na všech místech zájmu. Provedou se tři opakování každého měření. Ženy v proudech CON a FIB-Sx absolvují druhé identické zobrazovací sezení během své první návštěvy a jediné zobrazovací sezení během druhé návštěvy. Účastníci streamu FIB-Mx obdrží při každé návštěvě jedno zobrazení.

Chirurgická intervence: bude zaznamenáván chirurgický přístup (abdominální vs laparoskopický) i sekundární výsledky včetně operační doby, krevních ztrát, konverzí operační techniky, neúspěšných/neúplných excizí a dalších provedených výkonů. Tyto údaje budou použity pro popisné účely a přispějí k rozvoji databáze pro náš dlouhodobý výzkumný cíl.

Odběr vzorků tkáně: Pro účastníky proudu FIB-Sx, chirurgický přístup (myomektomie nebo hysterektomie + abdominální nebo laparoskopický), průběh resekce a sekundární výsledky včetně operační doby, krevní ztráty, chirurgické techniky, neúspěšných/neúplných excizí, intra- nebo post -pro popisné účely budou zaznamenány operační komplikace a další postupy. Vzorky morcellované tkáně budou vyloučeny. Veškerá chirurgicky vyříznutá tkáň bude odeslána na patologii k celkové kontrole a zpracování podle standardních postupů. U případů hysterektomie asistent patologie (vyškolený a pod dohledem spolupracovníka S. Stricklanda) vyřízne pět vzorků nenádorové tkáně o objemu 1 cm3 ze zájmových myometriálních míst a 1 cm3 řezů z každého zájmového myomu. U případů myomektomie se podobně vyříznou řezy 1 cm3 z každého fibroidu, který nás zajímá. V chirurgických případech s vyříznutými > 3 fibroidy zahrne zúčastněný chirurg do žádosti o patologii specifické identifikační číslo fibroidu uvedené pro studii v USA. Člen výzkumného týmu se setká s patologickým asistentem v době pitvy, aby zajistil, že každý vzorek bude umístěn do jednotlivých lahviček s izotonickým fyziologickým roztokem a označen jedinečným identifikačním číslem studie. Vzorky budou dopraveny do laboratoře M. Labrosse (spolupracovníka) v Ottawa Heart Institute k mechanickému testování.

Lékařský zásah: Lékařské ošetření bude zaznamenáno stejně jako sekundární výsledky týkající se symptomů pacienta a kvality života. Tyto údaje budou použity pro popisné účely a přispějí k rozvoji databáze pro náš dlouhodobý výzkumný cíl.

Mechanické testování: Všechny vzorky budou uloženy ve fyziologickém roztoku a testovány do 24 hodin po excizi. Vzorky budou dále rozřezány na plátky 2x10 mm a vloženy do mechanického přípravku (Biotester, CellScale, Waterloo, Kanada) v laboratoři spolupracovníka M. Labrosse a testovány při 37 °C, cyklicky v tahu (1 Hz, 2-3% napětí) podle postupů vyvinuté v literatuře pro mechanické testování na děložní tkáni. Modul pružnosti (E, kPa), analogický s tuhostí, a kontrastní poměr tuhosti (E_fibroid/E_myometrium ) budou vypočteny třikrát pro každý vzorek a zprůměrovány. Dokončení protokolu mechanického testování bude trvat přibližně 2 hodiny. Mechanické zatížení bude pod kontrolou posunu (2-3% napětí), aby se eliminovalo riziko poškození tkání, což umožní opakovaná měření a histologické analýzy. Všechny vzorky budou ihned po testování umístěny do 10% neutrálního pufrovaného formalínu a vráceny na patologii pro definitivní diagnózu. Patologické zprávy a sklíčka budou retrospektivně přezkoumány, aby se extrahovaly popisné charakteristiky fibroidů. Členové výzkumného týmu, kteří získají následná měření SWE, měření mechanické tuhosti a přezkoumání patologických zpráv, budou zaslepeni výsledky počátečního měření SWE.

Statistické analýzy: Všechna data budou testována na normalitu a podle potřeby budou použity ekvivalentní neparametrické testy, které jsou popsány níže. Všechny testy budou provedeny pomocí statistického softwaru SPSS (v25, IMB Corp., Armonk, USA) a významnost bude přijata jako p<0,05. Budou provedena příslušná post-hoc srovnání. Předpokládá se, že závislé proměnné vrcholu SWE a střední tuhosti spolu souvisí.

Cíl 1.1: Dvoucestné (3x2) vícerozměrné analýzy rozptylu (MANOVA) budou testovat významné rozdíly ve střední a maximální tuhosti (kPa), protože se vztahují k nezávislé proměnné času testu (opakování a relace) pro každé místo měření. Jednocestné analýzy rozptylu (ANOVAs) a závislé t-testy budou použity pro post-hoc Bonferroniho korigované hodnocení významných hlavních účinků. Závislé t-testy určí, zda rovina měření významně ovlivňuje měření tuhosti SWE. Korelační koeficienty uvnitř třídy a směrodatná chyba měření vyhodnotí spolehlivost měření tuhosti SWE uvnitř a mezi relacemi a mezi rovinami.

Cíl 1.2: Jednorozměrné lineární regrese zmapují vztah mezi střední a maximální tuhostí SWE a komplexním modulem pružnosti, přičemž komplexní modul pružnosti bude považován za standard kritéria. Pro nelineární vztahy budou provedeny příslušné transformace.

Cíl 1.3: Dvoucestné multivariační analýzy kovariance otestují vliv místa (cervikální junkce, isthmus, fundus) a skupiny (FIB vs CON) na maximální a střední tuhost myometria a matoucí účinky věku, parity a užívání antikoncepce na upravený průměrný rozdíl skupiny. Nezávislé t-testy budou použity pro post-hoc hodnocení, pokud bude pozorován významný hlavní účinek/interakce. Logistické regrese budou mapovat vztah věku, parity a užívání antikoncepce k myometriální ztuhlosti v každém místě měření. Přijatelné regrese vysvětlí > 80 % rozptylu v datech. Pro nelineární vztahy budou provedeny příslušné transformace.

Cíl 2.1: Na základě zprávy o patologii budou myomy klasifikovány buď jako nedegenerativní (tj. normální) nebo degenerativní (včetně všech variací v prezentaci). Jednosměrné MANOVA budou vyhodnocovat mezi skupinovými rozdíly v typu fibroidu (nedegenerativní vs degenerativní) a vrcholem a střední tuhostí děložní tkáně měřenou pomocí SWE, zatímco post-hoc hodnocení významných hlavních účinků bude zahrnovat nezávislé t-testy s použitím vhodných Bonferroniho korekcí.

Cíl 2.2: Měření SWE budou souhrnně zprůměrována během opakování v rámci relace pro každé místo. Dvoucestné MANOVA vyhodnotí místo a čas (před, po 1. kurzu, po 2. kurzu) rozdíly ve střední a maximální tuhosti měřené pomocí SWE Jednocestné ANOVA a závislé t-testy budou použity pro post-hoc Bonferroniho opravené vyhodnocení významných hlavních efektů.