Karakterisering af uterin fibroid vævsstivhed

Mål og mål Målet med dette projekt er at forstå, om og hvordan uterin fibroid vævsstivhed, målt ved SWE, kan bruges til at forudsige og monitorere respons på medicinsk behandling hos patienter med symptomatiske uterine fibromer.

Mål 1: At vurdere gennemførligheden af ​​at bruge SWE til måling af stivhed af ikke-neoplastisk myometrium og uterint fibroid væv hos præmenopausale kvinder. livmoderfibromer og 60 raske matchede kontroldeltagere.

Mål 1.2: Ved hjælp af data indhentet fra de 60 kvinder med uterusfibromer, vil validiteten af ​​SWE blive vurderet ved at sammenligne in vivo uterinvævsstivhed målt ved SWE med stivheden af ​​kirurgisk udskårne livmodervævsprøver målt ex vivo af en mekanisk tester.

Mål 1.3: At vurdere den forvirrende effekt af alder, paritet, svangerskabsforebyggende brug og tilstedeværelse af fibromer på myometriel stivhed målt ved SWE hos 60 kvinder med uterine fibromer og 60 raske matchede kontroldeltagere.

Mål 2: At vurdere den kliniske anvendelighed af at bruge vævsstivhed målt af SWE til klassificering og monitorering af uterusfibromer hos præmenopausale kvinder.

Mål 2.1: Bestem, om SWE er følsom nok til at identificere forskelle i vævsstivhed mellem ikke-degenerative og degenerative fibromer, som valideret af histologi fra kirurgisk udskårne vævsprøver fra 60 kvinder.

Mål 2.2: Bestem, om SWE er følsom nok til at identificere forskelle i fibroidvævsstivhed hos 60 kvinder med uterine fibromer før og efter to 3-måneders forløb med SPRM-behandling, og vurder, om medicinsk reaktionsevne (dvs. symptomlindring) er relateret til baseline SWE-mål.

Undersøgelsesdesign: Dette vil være et prospektivt case-kontrolstudie, der vil bruge en blandet model (inden for og mellem fag) undersøgelsesdesign (figur 1). Kvinder med uterusfibromer og raske matchede kontroldeltagere vil blive rekrutteret og deltage i to eller tre amerikanske billeddiagnostiske sessioner (afhængigt af gruppeopgaven). Deltagere med fibromer vil få målt både deres myometrium og fibroidstivhed ved hjælp af SWE. Sunde, matchede kontroller vil kun få deres myometrium målt. Deltagere med fibromer, der modtager kirurgisk indgreb, vil gennemgå en hysterektomi eller myomektomi, og vævsprøver vil blive høstet og testet i en jig, der måler stivhed under mekanisk spænding. Deltagere med fibromer, der søger medicinsk behandling, vil have en amerikansk billedbehandlingssession før og efter to 3-måneders kurser med ulipristalacetat (UPA; en SPRM ordineret i Canada20).

Deltagere: Tre grupper på 60 præmenopausale kvinder over 18 år vil blive rekrutteret:

1. Patienter, der søger kirurgisk behandling for uterine fibromer (FIB-Sx), vil blive rekrutteret fra en liste over patienter, der har givet samtykke til operation (hysterektomi eller myomektomi med primær indikation af fibromer) af et medlem af Ottawa Hospital Minimally Invasive Gynecology Group (ledet af nomineret hovedansøger). , S. Singh). FIB-Sx vil blive udelukket, hvis de har >5 fibromer identificeret ved UL eller mistanke om leiomyosarkom baseret på klinisk, kirurgisk eller grov patologisk undersøgelse.
2. Patienter, der søger medicinsk behandling for uterine fibromer (FIB-Mx) vil blive screenet fra en liste over henvisninger til Shirley E. Greenberg Women's Health Center (SEGWHC) på Ottawa Hospital og rekrutteret på konsultationstidspunktet, hvis de har fået ordineret et kursus af UPA af deres behandlende læge. FIB-Mx vil blive udelukket, hvis de har >5 fibromer identificeret på US eller tidligere forløb med SPRM/GnRH-analoger inden for 3 måneder efter rekruttering.
3. Sunde kontroldeltagere (CON) (matchet til FIB i alder, paritet og BMI) vil blive rekrutteret fra Ottawa-samfundet gennem reklameplakater, mund til mund og sociale medier. CON vil blive udelukket, hvis de har en historie med livmoderpatologi (f.eks. adenomyose, hyperplasi, endometriose), har uregelmæssig menstruationscyklus, er i øjeblikket gravid eller har været gravid inden for de sidste seks måneder før rekruttering.

Indledende vurdering: Kvinder med samtykke i kontrol (CON) og kirurgiske (FIB-Sx) strømme vil deltage i to evalueringer. Kvinder med samtykke i den medicinske strøm (FIB-Mx) vil deltage i ét besøg ved deres tidligste bekvemmelighed efter rekruttering, et andet tre måneder efter behandlingsstart og tredje besøg 6 måneder efter behandlingsstart. Ved hvert besøg vil kvinder gennemgå shear wave elastography (SWE) og 3D US (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Canada) vurderinger af deres livmoder som helhed, på 10 sunde steder og på op til 5 fibroide steder. SWE og volumener vil blive optaget i serier på 10 rammeklip. Morfologiske målinger af livmoderen og udvalgte fibromer vil blive foretaget, og fibromer vil blive tildelt identifikationsnumre baseret på en 3D størrelse og placeringskort. SWE vil blive brugt til at tage relevante mål for vævsstivhed på alle steder af interesse. Der udføres tre gentagelser af hver måling. Kvinder i CON- og FIB-Sx-strømmene vil modtage en anden identisk billedbehandlingssession under deres første besøg og en enkelt billedbehandlingssession under det andet besøg. Deltagere i FIB-Mx-strømmen vil modtage en enkelt billedbehandlingssession ved hvert besøg.

Kirurgisk indgreb: Den kirurgiske tilgang (abdominal vs laparoskopisk) vil blive registreret såvel som sekundære resultater, herunder operationstid, blodtab, kirurgiske teknikkonverteringer, mislykkede/ufuldstændige udskæringer og yderligere udførte procedurer. Disse data vil blive brugt til beskrivende formål og bidrage til udviklingen af ​​en database til vores langsigtede forskningsmål.

Vævsprøvetagning: For deltagere i FIB-Sx-strømmen, den kirurgiske tilgang (myomektomi eller hysterektomi + abdominal eller laparoskopisk), resektionsforløb og sekundære udfald inklusive operationstid, blodtab, kirurgisk teknik, mislykkede/ufuldstændige excisioner, intra- eller post -operativ komplikation og yderligere procedurer vil blive registreret til beskrivende formål. Morcellerede vævsprøver vil blive udelukket. Alt kirurgisk udskåret væv vil blive sendt til patologi til grov inspektion og behandling efter standardprocedurer. I tilfælde af hysterektomi vil en patologiassistent (uddannet og under opsyn af samarbejdspartner S. Strickland) udskære fem 1 cm3 prøver af ikke-neoplastisk væv fra myometriske steder af interesse og 1 cm3 snit fra hvert fibroid af interesse. For myomektomi tilfælde vil 1 cm3 snit fra hvert fibroid af interesse på samme måde blive skåret ud. I kirurgiske tilfælde med >3 fibromer udskåret, vil den deltagende kirurg inkludere det undersøgelsesspecifikke fibroid-identifikationsnummer, der er givet ved den amerikanske billeddiagnostiksession i patologirekvisitionen. Et medlem af forskerholdet vil møde patologiassistenten på dissektionstidspunktet for at sikre, at hver prøve placeres i individuelle flasker med isotonisk saltvand og mærkes med dets unikke undersøgelsesidentifikationsnummer. Prøver vil blive transporteret til M. Labrosses (samarbejdspartner) laboratorium på Ottawa Heart Institute til mekanisk testning.

Medicinsk intervention: Medicinsk behandling vil blive registreret såvel som sekundære resultater relateret til patientsymptomer og livskvalitet. Disse data vil blive brugt til beskrivende formål og bidrage til udviklingen af ​​en database til vores langsigtede forskningsmål.

Mekanisk testning: Alle prøver vil blive opbevaret i saltvand og testet inden for 24 timer efter udskæring. Prøver vil blive yderligere dissekeret i 2x10 mm skiver og indlæst i en mekanisk jig (Biotester, CellScale, Waterloo, Canada) på samarbejdspartner M. Labrosses laboratorium og testet ved 37°C, cyklisk i spænding (1Hz, 2-3% belastning) efter procedurer udviklet i litteraturen til mekanisk test på livmodervæv. Elasticitetsmodulet (E, kPa), analogt med stivhed, og stivhedskontrastforhold (E_fibroid/E_myometrium) vil blive beregnet tre gange for hver prøve og beregnet som gennemsnit. Den mekaniske testprotokol vil tage cirka 2 timer at gennemføre. Mekanisk belastning vil være under forskydningskontrol (2-3 % belastning) for at eliminere risikoen, der beskadiger væv, hvilket giver mulighed for gentagne målinger og histologisk analyse. Alle prøver vil blive placeret i 10 % neutral bufferet formalin umiddelbart efter testning og returneret til patologi for endelig diagnose. Patologirapporter og dias vil blive gennemgået retrospektivt for at udtrække beskrivende fibroidkarakteristika. Medlemmer af forskerholdet, der erhverver efterfølgende SWE-målinger, mekaniske stivhedsmålinger og gennemgår patologirapporter, vil blive blindet for resultaterne af den indledende SWE-måling.

Statistiske analyser: Alle data vil blive testet for normalitet, og tilsvarende ikke-parametriske test til dem, der er beskrevet nedenfor, vil blive brugt efter behov. Alle tests vil blive udført ved hjælp af SPSS statistisk software (v25, IMB Corp., Armonk, USA), og signifikans vil blive accepteret som p<0,05. Der vil blive udført passende post-hoc sammenligninger. Afhængige variabler for SWE-top og middelstivhed antages at være indbyrdes forbundne.

Mål 1.1: Tovejs (3x2) multivariate variansanalyser (MANOVA'er) vil teste for signifikante forskelle i middel- og topstivhed (kPa), da de relaterer sig til den uafhængige variabel af testtid (gentagelse og session) for hvert målested. Envejs-variansanalyser (ANOVA'er) og afhængige t-tests vil blive brugt til post-hoc Bonferroni-korrigeret evaluering af væsentlige hovedeffekter. Afhængige t-tests vil afgøre, om måleplanet signifikant påvirker SWE-stivhedsmålene. Intra-klasse korrelationskoefficienter og standardfejl ved målinger vil evaluere intra- og inter-session og mellem-plan pålidelighed af SWE-stivhedsmålinger.

Mål 1.2: Univariate lineære regressioner vil kortlægge forholdet mellem SWE middelværdi og topstivhed og det komplekse elasticitetsmodul, hvor det komplekse elasticitetsmodul betragtes som kriteriestandarden. For ikke-lineære sammenhænge vil passende transformationer blive foretaget.

Mål 1.3: To-vejs multivariate analyser af kovarians vil teste virkningen af ​​stedet (cervikal overgang, isthmus, fundus) og gruppe (FIB vs CON) på peak og middel myometrial stivhed og de forstyrrende virkninger af alder, paritet og brug af prævention på justeret gruppemiddelforskel. Uafhængige t-tests vil blive brugt til post-hoc evaluering, hvis der observeres en væsentlig hovedeffekt/interaktion. Logistiske regressioner vil kortlægge forholdet mellem alder, paritet og brug af prævention til myometriel stivhed på hvert målested. Acceptable regressioner vil forklare >80 % af variansen i dataene. For ikke-lineære sammenhænge vil passende transformationer blive foretaget.

Mål 2.1: Baseret på patologirapporten vil fibromer blive klassificeret som enten ikke-degenerative (dvs. normal) eller degenerativ (inklusive alle variationer i præsentationen). Envejs MANOVA'er vil evaluere mellem gruppeforskelle i fibroid type (ikke-degenerativ vs degenerativ) og livmodervævs peak og gennemsnitlig stivhed målt med SWE, mens post-hoc evaluering af signifikante hovedeffekter vil involvere uafhængige t-tests ved brug af passende Bonferroni korrektioner.

Mål 2.2: SWE-målinger vil være ensemblegennemsnitlige på tværs af intra-session gentagelser for hvert sted. To-vejs MANOVA'er vil evaluere sted og tid (før, efter forløb 1, efter forløb 2) forskelle i middel- og maksimal stivhed målt med SWE One-way ANOVA'er og afhængige t-tests vil blive brugt til post-hoc Bonferroni korrigeret evaluering væsentlige hovedeffekter.