Kohdun fibroidikudoksen jäykkyyden luonnehdinta

Tavoitteet ja tavoitteet Tämän projektin tavoitteena on ymmärtää, voidaanko ja miten SWE:n mittaamaa kohdun fibroidikudoksen jäykkyyttä voidaan käyttää ennustamaan ja seuraamaan vastetta lääkehoitoon potilailla, joilla on oireinen kohdun fibroidi.

Tavoite 1: Arvioida SWE:n käyttökelpoisuutta ei-neoplastisen myometriumin ja kohdun fibroidikudoksen jäykkyyden mittaamiseen premenopausaalisilla naisilla Tavoite 1.1: Arvioida kohdun kudoksen jäykkyyden mittaamisen istuntojen välinen ja sisäinen luotettavuus SWE:llä 60 naisella kohdun fibroidit ja 60 tervettä verrokkiosapuolta.

Tavoite 1.2: Käyttämällä 60 naiselta, joilla on kohdun fibroideja, saatuja tietoja, SWE:n validiteetti arvioidaan vertaamalla SWE:n mittaamaa in vivo kohdun kudosjäykkyyttä kirurgisesti leikattujen kohdun kudosnäytteiden jäykkyyteen, joka mitataan ex vivo mekaanisella testerillä.

Tavoite 1.3: Arvioida iän, pariteetin, ehkäisyvälineiden käytön ja fibroidien esiintymisen hämmentävää vaikutusta SWE:llä mitattuun myometriumin jäykkyyteen 60 naisella, joilla on kohdun fibroideja, ja 60 terveellä vastaavalla kontrollihenkilöllä.

Tavoite 2: Arvioida SWE:n mittaaman kudosjäykkyyden käytön kliinistä soveltuvuutta kohdun fibroidien luokitteluun ja seurantaan premenopausaalisilla naisilla.

Tavoite 2.1: Selvitä, onko SWE riittävän herkkä tunnistamaan erot kudosten jäykkyydessä ei-degeneratiivisten ja rappeuttavien fibroidien välillä, mikä on validoitu histologialla 60 naisen kirurgisesti leikatuista kudosnäytteistä.

Tavoite 2.2: Selvitä, onko SWE riittävän herkkä tunnistamaan erot fibroidikudoksen jäykkyydessä 60 naisella, joilla on kohdun fibroideja ennen ja jälkeen kahden 3 kuukauden SPRM-hoitojakson ja arvioida, onko lääketieteellinen vaste (ts. oireiden lievitys) liittyy SWE:n perusmittauksiin.

Tutkimuksen suunnittelu: Tämä on prospektiivinen tapaus-verrokkitutkimus, jossa käytetään sekamallia (aiheiden sisällä ja välillä) tutkimussuunnittelua (kuva 1). Naiset, joilla on kohdun fibroidit ja terveet verrokkiosallistujat, rekrytoidaan, ja he osallistuvat kahteen tai kolmeen Yhdysvaltain kuvantamisistuntoon (riippuen ryhmätehtävästä). Osallistujien, joilla on fibroideja, sekä myometriumin että fibroidin jäykkyys mitataan SWE:llä. Terveillä vastaavilla verrokeilla mitataan vain niiden myometrium. Leikkaukseen saaville osallistujille, joilla on fibroideja, suoritetaan kohdun tai myomektomia ja kudosnäytteitä kerätään ja testataan jigissä, joka mittaa jäykkyyttä mekaanisen jännityksen alaisena. Lääketieteellistä hoitoa hakeville osallistujille, joilla on fibroideja, suoritetaan USA:n kuvantamisistunto ennen ja jälkeen kahden kolmen kuukauden ulipristaaliasetaattikurssin (UPA; Kanadassa määrätty SPRM20).

Osallistujat: Rekrytoidaan kolme 60 yli 18-vuotiaan premenopausaalisen naisen ryhmää:

1. Kohdun fibroidien (FIB-Sx) kirurgista hoitoa hakevat potilaat rekrytoidaan niiden potilaiden luettelosta, joille Ottawan sairaalan Minimally Invassive Gynecology Groupin jäsen (johon nimitetty päähakija johtaa) , S. Singh). FIB-Sx suljetaan pois, jos heillä on yli 5 fibroidia, jotka on tunnistettu usa:ssa tai jos heillä on epäilys leiomyosarkoomasta kliinisen, kirurgisen tai vakavan patologisen tutkimuksen perusteella.
2. Kohdun fibroidien (FIB-Mx) lääketieteellistä hoitoa hakevat potilaat seulotaan läheteluettelosta Ottawan sairaalan Shirley E. Greenbergin naisten terveyskeskukseen (SEGWHC) ja rekrytoidaan konsultaatiohetkellä, jos heille on määrätty kurssi. hoitava lääkäri. FIB-Mx suljetaan pois, jos heillä on > 5 fibroidia, jotka on tunnistettu USA:ssa tai aiemmassa SPRM/GnRH-analogikurssissa kolmen kuukauden sisällä värväämisestä.
3. Terveet kontrollin osallistujat (CON) (vastaavat FIB:hen iän, pariteetin ja BMI:n suhteen) rekrytoidaan Ottawan yhteisöstä mainosjulisteiden, suullisesti ja sosiaalisessa mediassa. CON suljetaan pois, jos heillä on ollut kohdun patologia (esim. adenomyoosi, hyperplasia, endometrioosi), joilla on epäsäännölliset kuukautiskierrot, olet tällä hetkellä raskaana tai olet ollut raskaana viimeisen kuuden kuukauden aikana ennen rekrytointia.

Alkuarviointi: Suostumuksen saaneet naiset kontrollivirrassa (CON) ja kirurgiassa (FIB-Sx) osallistuvat kahteen arviointiin. Suostumuksen saaneet lääkärivirrassa (FIB-Mx) olevat naiset osallistuvat yhteen käyntiin mahdollisimman aikaisintaan rekrytoinnin jälkeen, toiselle kolme kuukautta hoidon aloittamisen jälkeen ja kolmannelle käynnille 6 kuukauden kuluttua hoidon aloittamisesta. Jokaisella käynnillä naisille tehdään leikkausaaltoelalastografia (SWE) ja 3D US (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Kanada) kohtuunsa kokonaisuutena, 10 terveessä kohdassa ja jopa 5 fibroidikohdassa. SWE ja volyymit tallennetaan 10 kehyksen sarjoiksi. Kohtusta ja valituista fibroideista tehdään morfologiset mittaukset ja fibroideille annetaan tunnistenumerot 3D-koon ja sijaintikartan perusteella. SWE:tä käytetään kudosten jäykkyyden mittaamiseen kaikissa kiinnostavissa kohdissa. Jokaisesta mittauksesta suoritetaan kolme toistoa. CON- ja FIB-Sx-virtojen naiset saavat toisen identtisen kuvantamisistunnon ensimmäisen käynnin aikana ja yhden kuvantamisen toisen käynnin aikana. FIB-Mx-streamin osallistujat saavat yhden kuvantamisistunnon jokaisella vierailulla.

Kirurginen interventio: Kirurginen lähestymistapa (vatsan vs laparoskooppinen) kirjataan sekä toissijaiset tulokset, mukaan lukien leikkausaika, verenhukka, kirurgisen tekniikan muutokset, epäonnistuneet/epätäydelliset leikkaukset ja suoritetut lisätoimenpiteet. Näitä tietoja käytetään kuvaileviin tarkoituksiin, ja ne edistävät pitkän aikavälin tutkimustavoitteemme tietokannan kehittämistä.

Kudosnäytteenotto: FIB-Sx-virtaan osallistujille kirurginen lähestymistapa (myomektomia tai kohdunpoisto + vatsan tai laparoskooppinen), resektion kulku ja toissijaiset tulokset, mukaan lukien leikkausaika, verenhukka, kirurginen tekniikka, epäonnistuneet/epätäydelliset leikkaukset, intra- tai post- -leikkauskomplikaatiot ja lisätoimenpiteet kirjataan kuvaustarkoituksiin. Morcelloituja kudosnäytteitä ei oteta huomioon. Kaikki kirurgisesti leikattu kudos lähetetään patologiaan yleistä tarkastusta ja käsittelyä varten vakiomenettelyjä noudattaen. Kohdunpoistotapauksissa patologia-assistentti (koulutettu ja yhteistyökumppanin S. Stricklandin valvonnassa) leikkaa viisi 1 cm3:n näytettä ei-neoplastista kudosta mielenkiinnon kohteena olevista myometriaalisista kohdista ja 1 cm3:n leikkeet kustakin kiinnostavasta fibroidista. Myomektomiatapauksissa 1 cm3 leikkeitä kustakin kiinnostavasta fibroidista leikataan samalla tavalla pois. Leikkaustapauksissa, joissa on leikattu >3 fibroidia, osallistuva kirurgi sisällyttää patologiahakemukseen USA:n kuvantamisistunnossa annetun tutkimuskohtaisen fibroidin tunnusnumeron. Tutkimusryhmän jäsen tapaa patologia-avustajan leikkauksen aikana varmistaakseen, että jokainen näyte laitetaan yksittäisiin pulloihin, joissa on isotonista suolaliuosta, ja merkitään yksilöllisellä tutkimuksen tunnistenumerolla. Näytteet kuljetetaan M. Labrossen (yhteistyökumppani) laboratorioon Ottawa Heart Institutessa mekaanista testausta varten.

Lääketieteellinen interventio: Lääketieteellinen hoito sekä potilaan oireisiin ja elämänlaatuun liittyvät toissijaiset tulokset tallennetaan. Näitä tietoja käytetään kuvaileviin tarkoituksiin, ja ne edistävät tietokannan kehittämistä pitkän aikavälin tutkimustavoitteemme saavuttamiseksi.

Mekaaninen testaus: Kaikki näytteet säilytetään suolaliuoksessa ja testataan 24 tunnin sisällä leikkauksesta. Näytteet leikataan edelleen 2x10 mm:n viipaleiksi ja ladataan mekaaniseen jigiin (Biotester, CellScale, Waterloo, Kanada) yhteistyökumppanin M. Labrossen laboratoriossa ja testataan 37 °C:ssa, syklisesti jännityksessä (1 Hz, 2-3 % jännitys) seuraavien toimenpiteiden mukaisesti. kehitetty kirjallisuudessa kohdun kudoksen mekaanista testausta varten. Kimmomoduuli (E, kPa), joka on analoginen jäykkyyden kanssa, ja jäykkyyden kontrastisuhde (E_fibroid/E_myometrium ) lasketaan kolme kertaa kullekin näytteelle ja lasketaan keskiarvo. Mekaanisen testausprotokollan suorittaminen kestää noin 2 tuntia. Mekaaninen kuormitus on siirtymähallinnassa (2-3 % jännitys) kudosten vahingoittumisen riskin eliminoimiseksi, mikä mahdollistaa toistuvat mittaukset ja histologiset analyysit. Kaikki näytteet asetetaan 10 % neutraaliin puskuroituun formaliiniin välittömästi testauksen jälkeen ja palautetaan patologiaan lopullista diagnoosia varten. Patologiaraportit ja diat tarkastetaan jälkikäteen, jotta voidaan erottaa kuvailevat fibroidin ominaisuudet. Tutkimusryhmän jäsenet, jotka hankkivat myöhempiä SWE-mittauksia, mekaanisia jäykkyysmittauksia ja tarkistavat patologiaraportteja, sokeutuvat alkuperäisen SWE-mittauksen tuloksiin.

Tilastolliset analyysit:Kaikki tiedot testataan normaaliuden suhteen ja käytetään tarvittaessa alla kuvattuja vastaavia ei-parametrisia testejä. Kaikki testit suoritetaan SPSS-tilastoohjelmistolla (v25, IMB Corp., Armonk, USA) ja merkitsevyyden arvoksi hyväksytään p<0,05. Asianmukaiset post hoc -vertailut suoritetaan. SWE-huipun ja keskijäykkyyden riippuvien muuttujien oletetaan olevan yhteydessä toisiinsa.

Tavoite 1.1: Kaksisuuntaiset (3x2) monimuuttujavarianssianalyysit (MANOVA:t) testaavat merkittäviä eroja keski- ja huippujäykkyydessä (kPa), koska ne liittyvät testiajan (toiston ja istunnon) riippumattomaan muuttujaan kussakin mittauspaikassa. Yksisuuntaisia ​​varianssianalyysejä (ANOVA) ja riippuvaisia ​​t-testejä käytetään merkittävien päävaikutusten post-hoc Bonferroni-korjatussa arvioinnissa. Riippuvat t-testit määrittävät, vaikuttaako mittaustaso merkittävästi SWE-jäykkyysmittauksiin. Luokan sisäiset korrelaatiokertoimet ja mittausten keskivirhe arvioivat SWE-jäykkyysmittausten sisäistä ja välistä sekä tasojen välistä luotettavuutta.

Tavoite 1.2: Yksimuuttujat lineaariset regressiot kartoittavat SWE-keskiarvon ja huippujäykkyyden sekä kompleksisen kimmomoduulin välisen suhteen, jolloin kompleksista kimmomoduulia pidetään kriteerin standardina. Epälineaarisille suhteille tehdään asianmukaiset muunnokset.

Tavoite 1.3: Kovarianssin kaksisuuntaiset monimuuttuja-analyysit testaavat paikan (kohdunkaulan liitoskohta, kannas, silmänpohja) ja ryhmän (FIB vs. CON) vaikutusta myometriumin huippu- ja keskijäykkyyteen sekä iän, pariteetin ja ehkäisyn käytön hämmentäviä vaikutuksia mukautettu ryhmän keskimääräinen ero. Riippumattomia t-testejä käytetään jälkiarviointiin, jos havaitaan merkittävä päävaikutus/vuorovaikutus. Logistiset regressiot kartoittavat iän, pariteetin ja ehkäisyn käytön suhteen myometriumin jäykkyyteen kussakin mittauskohdassa. Hyväksyttävät regressiot selittävät > 80 % datan varianssista. Epälineaarisille suhteille tehdään asianmukaiset muunnokset.

Tavoite 2.1: Patologiaraportin perusteella fibroidit luokitellaan joko ei-degeneratiivisiksi (ts. normaali) tai rappeuttava (mukaan lukien kaikki esitysmuodon vaihtelut). Yksisuuntaiset MANOVA-tutkimukset arvioivat ryhmien välisiä eroja fibroidityypissä (ei-degeneratiivinen vs. rappeuttava) ja kohdun kudoshuipun ja keskimääräisen jäykkyyden välillä mitattuna SWE:llä, kun taas merkittävien päävaikutusten post-hoc-arviointi sisältää riippumattomia t-testejä käyttäen asianmukaisia ​​Bonferroni-korjauksia.

Tavoite 2.2: SWE-mittaukset lasketaan kokonaiskeskiarvoisesti istunnon sisäisistä toistoista jokaisessa paikassa. Kaksisuuntaiset MANOVA-testit arvioivat paikan ja ajan (ennen, kurssin 1 jälkeen, kurssin 2 jälkeen) keski- ja huippujäykkyyden erot mitattuna SWE:llä. Yksisuuntaisia ​​ANOVA-testejä ja riippuvaisia ​​t-testejä käytetään post-hoc Bonferroni-korjatussa arvioinnissa. merkittävistä päävaikutuksista.