Karakterisering av uterin fibroid vevsstivhet

Mål og mål Målet med dette prosjektet er å forstå om og hvordan uterin fibroid vevsstivhet, målt ved SWE, kan brukes til å forutsi og overvåke respons på medisinsk behandling hos pasienter med symptomatiske uterine fibroider.

Mål 1: Å vurdere gjennomførbarheten av å bruke SWE for måling av stivhet av ikke-neoplastisk myometrium og uterint fibroid vev hos premenopausale kvinner. livmorfibromer og 60 friske matchede kontrolldeltakere.

Mål 1.2: Ved å bruke data innhentet fra de 60 kvinnene med uterine fibroider, vil validiteten til SWE bli vurdert ved å sammenligne in vivo livmorvevsstivhet målt med SWE med stivheten til kirurgisk utklippede livmorvevsprøver målt ex vivo av en mekanisk tester.

Mål 1.3: Å vurdere den forvirrende effekten av alder, paritet, prevensjonsbruk og tilstedeværelse av myomer på myometrial stivhet målt ved SWE hos 60 kvinner med livmorfibroider og 60 friske matchede kontrolldeltakere.

Mål 2: Å vurdere den kliniske anvendeligheten av å bruke vevsstivhet målt ved SWE for klassifisering og overvåking av uterine fibroider hos premenopausale kvinner.

Mål 2.1: Bestem om SWE er sensitiv nok til å identifisere forskjeller i vevsstivhet mellom ikke-degenerative og degenerative fibroider, som validert av histologi fra kirurgisk utskårne vevsprøver av 60 kvinner.

Mål 2.2: Finn ut om SWE er sensitiv nok til å identifisere forskjeller i fibroidvevsstivhet hos 60 kvinner med livmorfibroider før og etter to 3-måneders kurer med SPRM-behandling, og evaluer om medisinsk respons (dvs. symptomlindring) er relatert til baseline SWE-tiltak.

Studiedesign: Dette vil være en prospektiv case-control studie som vil bruke en blandet modell (innenfor og mellom fag) studiedesign (Figur 1). Kvinner med uterine fibromer og sunne matchede kontrolldeltakere vil bli rekruttert og delta på to eller tre amerikanske bildediagnostiske økter (avhengig av gruppeoppdrag). Deltakere med myom vil få målt både myometrium og fibroidstivhet med SWE. Sunne matchede kontroller vil kun få målt myometrium. Deltakere med myom som får kirurgisk inngrep vil gjennomgå en hysterektomi eller myomektomi og vevsprøver vil bli høstet og testet i en pilk som måler stivhet under mekanisk spenning. Deltakere med myom som søker medisinsk behandling vil ha en amerikansk bildebehandlingsøkt før og etter to 3-måneders kurs med ulipristalacetat (UPA; en SPRM foreskrevet i Canada20).

Deltakere: Tre grupper på 60 premenopausale kvinner over 18 år vil bli rekruttert:

1. Pasienter som søker kirurgisk behandling for uterine fibromer (FIB-Sx) vil bli rekruttert fra en liste over pasienter som har samtykket til kirurgi (hysterektomi eller myomektomi med primær indikasjon på myom) av et medlem av The Ottawa Hospital Minimally Invasive Gynecology Group (ledet av nominert hovedsøker) , S. Singh). FIB-Sx vil bli ekskludert hvis de har >5 fibromer identifisert ved UL eller mistanke om leiomyosarkom basert på klinisk, kirurgisk eller grov patologisk undersøkelse.
2. Pasienter som søker medisinsk behandling for uterine fibroider (FIB-Mx) vil bli screenet fra en liste over henvisninger til Shirley E. Greenberg Women's Health Center (SEGWHC) ved Ottawa Hospital og rekruttert på konsultasjonstidspunktet hvis de har blitt foreskrevet et kurs av UPA av deres behandlende lege. FIB-Mx vil bli ekskludert hvis de har >5 fibroider identifisert på US eller tidligere kur med SPRM/GnRH-analoger innen 3 måneder etter rekruttering.
3. Friske kontrolldeltakere (CON) (matchet med FIB i alder, paritet og BMI) vil bli rekruttert fra Ottawa-samfunnet gjennom annonseplakater, jungeltelegrafen og sosiale medier. CON vil bli ekskludert hvis de har en historie med livmorpatologi (f.eks. adenomyose, hyperplasi, endometriose), har uregelmessige menstruasjonssykluser, er for tiden gravid eller har vært gravid i løpet av de siste seks månedene før rekruttering.

Innledende vurdering: Kvinner med samtykke fra kontroll (CON) og kirurgisk (FIB-Sx) vil delta på to evalueringer. Samtykkede kvinner i den medisinske strømmen (FIB-Mx) vil delta på ett besøk så tidlig som mulig etter rekruttering, et annet tre måneder etter behandlingsstart og tredje besøk 6 måneder etter behandlingsstart. Ved hvert besøk vil kvinner gjennomgå skjærbølgeelastografi (SWE) og 3D US (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Canada) vurderinger av livmoren som helhet, på 10 friske steder og på opptil 5 fibroidsteder. SWE og volumer vil bli tatt opp i serier på 10 rammeklipp. Morfologiske målinger av livmoren og utvalgte myomer vil bli foretatt og myom vil bli gitt identifikasjonsnummer basert på en 3D-størrelse og stedskart. SWE vil bli brukt til å ta relevante mål for vevsstivhet på alle steder av interesse. Tre repetisjoner av hver måling vil bli utført. Kvinner i CON- og FIB-Sx-strømmene vil motta en andre identisk bildebehandlingsøkt under deres første besøk og en enkelt bildebehandlingsøkt under det andre besøket. Deltakere i FIB-Mx-strømmen vil motta en enkelt bildebehandlingsøkt ved hvert besøk.

Kirurgisk intervensjon: Den kirurgiske tilnærmingen (abdominal vs laparoskopisk) vil bli registrert så vel som sekundære utfall inkludert operasjonstid, blodtap, kirurgiske teknikkkonverteringer, mislykkede/ufullstendige eksisjoner og ytterligere prosedyrer utført. Disse dataene vil bli brukt til beskrivende formål og bidra til utviklingen av en database for vårt langsiktige forskningsmål.

Vevsprøvetaking: For deltakere i FIB-Sx-strømmen, den kirurgiske tilnærmingen (myomektomi eller hysterektomi + abdominal eller laparoskopisk), reseksjonsforløp og sekundære utfall inkludert operasjonstid, blodtap, kirurgisk teknikk, mislykkede/ufullstendige eksisjoner, intra- eller post -Operativ komplikasjon og tilleggsprosedyrer vil bli registrert for beskrivende formål. Morcellated vevsprøver vil bli ekskludert. Alt kirurgisk utskåret vev vil bli sendt til patologi for grov inspeksjon og behandling etter standardprosedyrer. For hysterektomitilfeller vil en patologiassistent (opplært og under tilsyn av samarbeidspartner S. Strickland) fjerne fem 1 cm3 prøver av ikke-neoplastisk vev fra myometriske steder av interesse og 1 cm3 seksjoner fra hvert fibroid av interesse. For myomektomitilfeller vil 1 cm3 seksjoner fra hvert fibroid av interesse på samme måte bli skåret ut. I kirurgiske tilfeller med utskåret >3 fibromer, vil den deltakende kirurgen inkludere det studiespesifikke fibroid-identifikasjonsnummeret gitt ved den amerikanske bildediagnostikken i patologirekvisisjonen. Et medlem av forskerteamet vil møte patologiassistenten på tidspunktet for disseksjon for å sikre at hver prøve er plassert i individuelle flasker med isotonisk saltvann og merket med sitt unike studieidentifikasjonsnummer. Prøver vil bli fraktet til M. Labrosses (samarbeidspartner) laboratorium ved Ottawa Heart Institute for mekanisk testing.

Medisinsk intervensjon: Medisinsk behandling vil bli registrert samt sekundære utfall knyttet til pasientsymptomer og livskvalitet. Disse dataene vil bli brukt til beskrivende formål og bidra til utviklingen av en database for vårt langsiktige forskningsmål.

Mekanisk testing: Alle prøver vil bli lagret i saltvann og testet innen 24 timer etter eksisjon. Prøver vil bli videre dissekert i 2x10 mm skiver og lastet inn i en mekanisk jigg (Biotester, CellScale, Waterloo, Canada) ved samarbeidspartneren M. Labrosses laboratorium og testet ved 37°C, syklisk i spenning (1Hz, 2-3 % belastning) etter prosedyrer. utviklet i litteraturen for mekanisk testing på livmorvev. Elastisitetsmodulen (E, kPa), analogt med stivhet, og stivhetskontrastforhold (E_fibroid/E_myometrium) vil bli beregnet tre ganger for hver prøve og gjennomsnittet. Den mekaniske testprotokollen vil ta omtrent 2 timer å fullføre. Mekanisk belastning vil være under forskyvningskontroll (2-3 % belastning) for å eliminere risikoen som skader vev, noe som muliggjør gjentatte målinger og histologisk analyse. Alle prøver vil bli plassert i 10 % nøytral bufret formalin umiddelbart etter testing og returnert til patologi for endelig diagnose. Patologirapporter og lysbilder vil bli gjennomgått retrospektivt for å trekke ut beskrivende fibroidkarakteristikker. Medlemmer av forskerteamet som innhenter påfølgende SWE-målinger, mekaniske stivhetsmålinger og gjennomgår patologirapporter, vil bli blindet for resultatene av første SWE-måling.

Statistiske analyser: Alle data vil bli testet for normalitet og tilsvarende ikke-parametriske tester til de som er beskrevet nedenfor vil bli brukt etter behov. Alle tester vil bli utført med SPSS statistisk programvare (v25, IMB Corp., Armonk, USA) og signifikans vil bli akseptert som p<0,05. Passende post-hoc sammenligninger vil bli utført. Avhengige variabler for SWE-topp og gjennomsnittlig stivhet antas å henge sammen.

Mål 1.1: Toveis (3x2) multivariate variansanalyser (MANOVA) vil teste for signifikante forskjeller i gjennomsnitt og toppstivhet (kPa) ettersom de er relatert til den uavhengige variabelen for testtid (repetisjon og økt) for hvert målested. Enveis variansanalyser (ANOVA) og avhengige t-tester vil bli brukt for post-hoc Bonferroni korrigert evaluering av signifikante hovedeffekter. Avhengige t-tester vil avgjøre om måleplanet påvirker SWE-stivhetsmålene signifikant. Intra-klasse korrelasjonskoeffisienter og standard feil for målinger vil evaluere intra- og inter-sesjon, og mellom-plan-pålitelighet av SWE-stivhetsmålinger.

Mål 1.2: Univariate lineære regresjoner vil kartlegge forholdet mellom SWE gjennomsnitt og toppstivhet og den komplekse elastisitetsmodulen, med den komplekse elastisitetsmodulen betraktet som kriteriestandarden. For ikke-lineære sammenhenger vil passende transformasjoner bli gjort.

Mål 1.3: Toveis multivariate analyser av kovarians vil teste effekten av sted (cervical junction, isthmus, fundus) og gruppe (FIB vs CON) på topp og gjennomsnittlig myometrial stivhet og de forstyrrende effektene av alder, paritet og prevensjonsbruk på justert gruppemiddelforskjell. Uavhengige t-tester vil bli brukt for post-hoc evaluering dersom en signifikant hovedeffekt/interaksjon observeres. Logistiske regresjoner vil kartlegge forholdet mellom alder, paritet og prevensjonsbruk til myometrial stivhet på hvert målested. Akseptable regresjoner vil forklare >80 % av variansen i dataene. For ikke-lineære sammenhenger vil passende transformasjoner bli gjort.

Mål 2.1: Basert på patologirapporten vil myomer bli klassifisert som enten ikke-degenerative (dvs. normal) eller degenerativ (inkludert alle variasjoner i presentasjonen). Enveis MANOVA vil evaluere mellom gruppeforskjeller i fibroid type (ikke-degenerativ vs degenerativ) og livmorvevstopp og gjennomsnittlig stivhet målt med SWE, mens post-hoc evaluering av signifikante hovedeffekter vil involvere uavhengige t-tester ved bruk av passende Bonferroni-korreksjoner.

Mål 2.2: SWE-målinger vil være ensemble-gjennomsnitt over gjentakelser i løpet av økten for hvert sted. Toveis MANOVA vil evaluere sted og tid (før, etter kurs 1, post-kurs 2) forskjeller i gjennomsnitt og toppstivhet målt med SWE One-way ANOVA og avhengige t-tester vil bli brukt for post-hoc Bonferroni korrigert evaluering av betydelige hovedeffekter.