Charakterisierung der Myomgewebesteifigkeit des Uterus

Ziele und Ziele Das Ziel dieses Projekts ist es zu verstehen, ob und wie die Steifheit des Uterusmyomgewebes, gemessen durch SWE, verwendet werden kann, um das Ansprechen auf eine medizinische Therapie bei Patientinnen mit symptomatischen Uterusmyomen vorherzusagen und zu überwachen.

Ziel 1: Bewertung der Durchführbarkeit der Verwendung von SWE zur Messung der Steifheit von nicht-neoplastischem Myometrium und Uterusmyomgewebe bei prämenopausalen Frauen Uterusmyomen und 60 gesunden Kontrollteilnehmerinnen.

Ziel 1.2: Anhand der Daten von 60 Frauen mit Uterusmyomen wird die Gültigkeit von SWE bewertet, indem die in vivo-Steifigkeit des Uterusgewebes, gemessen durch SWE, mit der Steifheit von chirurgisch entfernten Uterusgewebeproben verglichen wird, die ex vivo von einem mechanischen Tester gemessen wurden.

Ziel 1.3: Bewertung der verwirrenden Wirkung von Alter, Parität, Verwendung von Verhütungsmitteln und Vorhandensein von Myomen auf die Myometriumsteifigkeit, gemessen durch SWE, bei 60 Frauen mit Uterusmyomen und 60 gesunden, passenden Kontrollteilnehmerinnen.

Ziel 2: Bewertung der klinischen Anwendbarkeit der Verwendung der durch SWE gemessenen Gewebesteifigkeit zur Klassifizierung und Überwachung von Uterusmyomen bei Frauen vor der Menopause.

Ziel 2.1: Bestimmen Sie, ob SWE empfindlich genug ist, um Unterschiede in der Gewebesteifigkeit zwischen nicht-degenerativen und degenerativen Myomen zu identifizieren, wie durch Histologie von chirurgisch entfernten Gewebeproben von 60 Frauen validiert.

Ziel 2.2: Bestimmen Sie, ob SWE empfindlich genug ist, um Unterschiede in der Steifigkeit des Myomgewebes bei 60 Frauen mit Uterusmyomen vor und nach zwei 3-monatigen SPRM-Therapiezyklen zu identifizieren, und bewerten Sie, ob das medizinische Ansprechen (d.h. Symptomlinderung) steht im Zusammenhang mit den SWE-Grundlinienmessungen.

Studiendesign: Dies wird eine prospektive Fall-Kontroll-Studie sein, die ein Studiendesign mit gemischtem Modell (innerhalb und zwischen Subjekten) verwendet (Abbildung 1). Frauen mit Uterusmyomen und gesunde, passende Kontrollteilnehmerinnen werden rekrutiert und nehmen an zwei oder drei US-Bildgebungssitzungen teil (je nach Gruppenzuordnung). Bei Teilnehmern mit Myomen wird sowohl ihr Myometrium als auch ihre Myomsteifigkeit mit SWE gemessen. Bei gesunden gematchten Kontrollen wird nur das Myometrium gemessen. Teilnehmer mit Myomen, die einen chirurgischen Eingriff erhalten, werden einer Hysterektomie oder Myomektomie unterzogen, und Gewebeproben werden geerntet und in einer Spannvorrichtung getestet, die die Steifigkeit unter mechanischer Spannung misst. Teilnehmer mit Myomen, die eine medizinische Behandlung wünschen, erhalten vor und nach zwei dreimonatigen Kuren mit Ulipristalacetat (UPA; ein in Kanada verschriebenes SPRM20) eine US-Bildgebungssitzung.

Teilnehmer: Drei Gruppen von 60 prämenopausalen Frauen über 18 Jahren werden rekrutiert:

1. Patienten, die eine chirurgische Behandlung von Uterusmyomen (FIB-Sx) anstreben, werden aus einer Liste von Patienten rekrutiert, die für eine Operation (Hysterektomie oder Myomektomie mit primärer Indikation von Myomen) von einem Mitglied der The Ottawa Hospital Minimally Invasive Gynecology Group (unter der Leitung des nominierten Hauptantragstellers) zugelassen wurden , S. Singh). FIB-Sx wird ausgeschlossen, wenn sie > 5 Myome haben, die im US identifiziert wurden, oder der Verdacht auf Leiomyosarkom aufgrund einer klinischen, chirurgischen oder makroskopischen Untersuchung besteht.
2. Patientinnen, die eine medizinische Behandlung für Uterusmyome (FIB-Mx) suchen, werden aus einer Liste von Überweisungen an das Shirley E. Greenberg Women's Health Center (SEGWHC) im The Ottawa Hospital ausgewählt und zum Zeitpunkt der Konsultation rekrutiert, wenn ihnen ein Kurs verschrieben wurde der UPA durch ihren behandelnden Arzt. FIB-Mx wird ausgeschlossen, wenn sie innerhalb von 3 Monaten nach der Rekrutierung > 5 Myome haben, die in den USA oder in einem früheren Kurs mit SPRM / GnRH-Analoga identifiziert wurden.
3. Gesunde Kontrollteilnehmer (CON) (abgestimmt auf FIB in Alter, Parität und BMI) werden aus der Ottawa-Community durch Werbeplakate, Mundpropaganda und soziale Medien rekrutiert. CON wird ausgeschlossen, wenn sie eine Vorgeschichte von Uteruspathologien haben (z. Adenomyose, Hyperplasie, Endometriose), haben unregelmäßige Menstruationszyklen, sind derzeit schwanger oder waren innerhalb der letzten sechs Monate vor der Einstellung schwanger.

Anfängliche Bewertung: Eingewilligte Frauen in den Kontroll- (CON) und chirurgischen (FIB-Sx) Streams werden an zwei Bewertungen teilnehmen. Eingewilligte Frauen in der medizinischen Abteilung (FIB-Mx) nehmen an einem Besuch so bald wie möglich nach der Rekrutierung, einem weiteren drei Monate nach Behandlungsbeginn und einem dritten Besuch 6 Monate nach Behandlungsbeginn teil. Bei jedem Besuch werden die Frauen einer Scherwellen-Elastographie (SWE) und 3D US (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Kanada) Bewertungen ihrer gesamten Gebärmutter an 10 gesunden Stellen und an bis zu 5 Myomstellen unterzogen. SWE und Volumen werden in Serien von 10 Frame-Clips aufgezeichnet. Es werden morphologische Messungen des Uterus und ausgewählter Myome durchgeführt, und Myome werden anhand einer 3D-Größen- und Lagekarte mit Identifikationsnummern versehen. SWE wird verwendet, um relevante Messungen der Gewebesteifigkeit an allen interessierenden Stellen vorzunehmen. Es werden drei Wiederholungen jeder Messung durchgeführt. Frauen in den Streams CON und FIB-Sx erhalten während ihres ersten Besuchs eine zweite identische Bildgebungssitzung und während des zweiten Besuchs eine einzelne Bildgebungssitzung. Teilnehmer am FIB-Mx-Stream erhalten bei jedem Besuch eine einzelne Bildgebungssitzung.

Chirurgischer Eingriff: Der chirurgische Ansatz (abdominell vs. laparoskopisch) wird aufgezeichnet sowie sekundäre Ergebnisse, einschließlich Operationszeit, Blutverlust, Umstellung der Operationstechnik, fehlgeschlagene/unvollständige Exzisionen und zusätzliche durchgeführte Eingriffe. Diese Daten werden zu Beschreibungszwecken verwendet und tragen zum Aufbau einer Datenbank für unser langfristiges Forschungsziel bei.

Gewebeentnahme: Für Teilnehmer am FIB-Sx-Stream der chirurgische Ansatz (Myomektomie oder Hysterektomie + abdominal oder laparoskopisch), Resektionsverlauf und sekundäre Ergebnisse, einschließlich Operationszeit, Blutverlust, Operationstechnik, fehlgeschlagene/unvollständige Exzisionen, intra- oder post -Operationskomplikationen und zusätzliche Verfahren werden zu beschreibenden Zwecken aufgezeichnet. Morzellierte Gewebeproben werden ausgeschlossen. Alle chirurgisch entfernten Gewebe werden zur groben Untersuchung und Verarbeitung nach Standardverfahren an die Pathologie geschickt. Bei Hysterektomie-Fällen wird ein Pathologieassistent (geschult und unter der Aufsicht von S. Strickland) fünf 1-cm3-Proben von nicht-neoplastischem Gewebe aus interessierenden Myometriumstellen und 1-cm3-Schnitte von jedem interessierenden Myom herausschneiden. Bei Myomektomie-Fällen werden in ähnlicher Weise 1-cm3-Schnitte von jedem interessierenden Myom entnommen. In chirurgischen Fällen mit >3 exzidierten Myomen wird der teilnehmende Chirurg die studienspezifische Myom-Identifikationsnummer, die bei der US-Bildgebungssitzung angegeben wurde, in die Pathologieanforderung aufnehmen. Ein Mitglied des Forschungsteams trifft sich zum Zeitpunkt der Sezierung mit dem Pathologieassistenten, um sicherzustellen, dass jede Probe in einzelne Flaschen mit isotonischer Kochsalzlösung gegeben und mit ihrer eindeutigen Studienidentifikationsnummer gekennzeichnet wird. Die Proben werden für mechanische Tests in das Labor von M. Labrosse (Mitarbeiter) am Ottawa Heart Institute transportiert.

Medizinische Intervention: Die medizinische Behandlung wird ebenso erfasst wie sekundäre Ergebnisse in Bezug auf Patientensymptome und Lebensqualität. Diese Daten werden zu beschreibenden Zwecken verwendet und tragen zum Aufbau einer Datenbank für unser langfristiges Forschungsziel bei.

Mechanische Prüfung: Alle Proben werden in Kochsalzlösung gelagert und innerhalb von 24 Stunden nach der Exzision getestet. Die Proben werden weiter in 2x10-mm-Scheiben zerlegt und im Labor des Mitarbeiters M. Labrosse in eine mechanische Spannvorrichtung (Biotester, CellScale, Waterloo, Kanada) geladen und bei 37 °C zyklisch unter Spannung (1 Hz, 2-3 % Dehnung) gemäß den Verfahren getestet in der Literatur für mechanische Tests an Uterusgewebe entwickelt. Der Elastizitätsmodul (E, kPa), analog zur Steifigkeit, und das Steifigkeitskontrastverhältnis (E_fibroid/E_myometrium) werden dreimal für jede Probe berechnet und gemittelt. Das mechanische Testprotokoll dauert etwa 2 Stunden. Die mechanische Belastung erfolgt unter Verdrängungskontrolle (2-3 % Belastung), um das Risiko einer Gewebeschädigung auszuschließen, was wiederholte Messungen und histologische Analysen ermöglicht. Alle Proben werden unmittelbar nach dem Test in 10 % neutral gepuffertes Formalin gelegt und zur endgültigen Diagnose in die Pathologie zurückgeschickt. Pathologische Berichte und Objektträger werden nachträglich überprüft, um beschreibende Merkmale von Myomen zu extrahieren. Mitglieder des Forschungsteams, die nachfolgende SWE-Messungen, mechanische Steifigkeitsmessungen und die Überprüfung von Pathologieberichten vornehmen, sind gegenüber den Ergebnissen der anfänglichen SWE-Messung blind.

Statistische Analysen: Alle Daten werden auf Normalität getestet und es werden gegebenenfalls gleichwertige nichtparametrische Tests wie die unten beschriebenen verwendet. Alle Tests werden mit SPSS-Statistiksoftware (v25, IMB Corp., Armonk, USA) durchgeführt und die Signifikanz wird als p < 0,05 akzeptiert. Es werden entsprechende Post-hoc-Vergleiche durchgeführt. Es wird angenommen, dass abhängige Variablen der SWE-Spitzen- und mittleren Steifigkeit miteinander in Beziehung stehen.

Ziel 1.1: Zweifache (3x2) multivariate Varianzanalysen (MANOVAs) testen auf signifikante Unterschiede in der mittleren und maximalen Steifheit (kPa), da sie sich auf die unabhängige Variable der Testzeit (Wiederholung und Sitzung) für jede Messstelle beziehen. Einweg-Varianzanalysen (ANOVAs) und abhängige t-Tests werden für die post-hoc Bonferroni-korrigierte Bewertung signifikanter Haupteffekte verwendet. Abhängige t-Tests bestimmen, ob die Messebene die SWE-Steifigkeitsmessungen signifikant beeinflusst. Intraklassen-Korrelationskoeffizienten und Standardfehler von Messungen werden die Zuverlässigkeit von SWE-Steifigkeitsmessungen innerhalb und zwischen Sitzungen sowie zwischen Ebenen bewerten.

Ziel 1.2: Univariate lineare Regressionen werden die Beziehung zwischen mittlerer und maximaler SWE-Steifigkeit und dem komplexen Elastizitätsmodul abbilden, wobei der komplexe Elastizitätsmodul als Kriteriumsstandard betrachtet wird. Für nichtlineare Beziehungen werden entsprechende Transformationen vorgenommen.

Ziel 1.3: Multivariate Zwei-Wege-Analysen der Kovarianz werden die Wirkung von Ort (zervikaler Übergang, Isthmus, Fundus) und Gruppe (FIB vs. KON) auf die maximale und mittlere Myometriumsteifigkeit und die verwirrenden Auswirkungen von Alter, Parität und Verwendung von Verhütungsmitteln auf die testen bereinigte Gruppenmittelwertdifferenz. Unabhängige t-Tests werden für die nachträgliche Bewertung verwendet, wenn eine signifikante Hauptwirkung/Wechselwirkung beobachtet wird. Logistische Regressionen werden das Verhältnis von Alter, Parität und Verwendung von Verhütungsmitteln zur Myometriumsteifigkeit an jeder Messstelle abbilden. Akzeptable Regressionen erklären mehr als 80 % der Varianz in den Daten. Für nichtlineare Beziehungen werden entsprechende Transformationen vorgenommen.

Ziel 2.1: Basierend auf dem Pathologiebericht werden Myome entweder als nicht degenerativ (d. h. normal) oder degenerativ (einschließlich aller Variationen in der Präsentation). Einweg-MANOVAs werden zwischen den Gruppenunterschieden im Myomtyp (nicht degenerativ vs. degenerativ) und dem mit SWE gemessenen Peak des Uterusgewebes und der mittleren Steifheit bewertet, während die Post-hoc-Bewertung signifikanter Haupteffekte unabhängige t-Tests unter Verwendung geeigneter Bonferroni-Korrekturen beinhalten wird.

Ziel 2.2: SWE-Messungen werden als Ensemble-Mittelung über Wiederholungen innerhalb der Sitzung für jeden Standort gemittelt. Zweiweg-MANOVAs evaluieren Ort und Zeit (vor, nach Kurs 1, nach Kurs 2) Unterschiede in der mittleren und maximalen Steifheit, die mit SWE gemessen wurden. Einweg-ANOVAs und abhängige t-Tests werden für die post-hoc Bonferroni-korrigierte Auswertung verwendet von bedeutenden Haupteffekten.