Caractérisation de la rigidité des tissus des fibromes utérins

Buts et objectifs Le but de ce projet est de comprendre si et comment la rigidité des tissus des fibromes utérins, mesurée par SWE, peut être utilisée pour prédire et surveiller la réponse au traitement médical chez les patientes présentant des fibromes utérins symptomatiques.

Objectif 1 : Évaluer la faisabilité de l'utilisation de la SWE pour mesurer la rigidité du myomètre non néoplasique et du fibrome utérin chez les femmes préménopausées Objectif 1.1 : Évaluer la fiabilité inter et intra-session de la mesure de la rigidité du tissu utérin avec la SWE chez 60 femmes fibromes utérins et 60 participants témoins appariés en bonne santé.

Objectif 1.2 : À l'aide des données acquises auprès des 60 femmes atteintes de fibromes utérins, la validité de SWE sera évaluée en comparant la rigidité du tissu utérin in vivo mesurée par SWE à la rigidité d'échantillons de tissu utérin excisés chirurgicalement mesurés ex vivo par un testeur mécanique.

Objectif 1.3 : Évaluer l'effet de confusion de l'âge, de la parité, de l'utilisation de contraceptifs et de la présence de fibromes sur la rigidité myométriale mesurée par SWE chez 60 femmes atteintes de fibromes utérins et 60 participantes témoins appariées en bonne santé.

Objectif 2 : Évaluer l'applicabilité clinique de l'utilisation de la rigidité tissulaire mesurée par SWE pour la classification et la surveillance des fibromes utérins chez les femmes pré-ménopausées.

Objectif 2.1 : Déterminer si le SWE est suffisamment sensible pour identifier les différences de rigidité tissulaire entre les fibromes non dégénératifs et dégénératifs, tel que validé par l'histologie à partir d'échantillons de tissus excisés chirurgicalement de 60 femmes.

Objectif 2.2 : Déterminer si la SWE est suffisamment sensible pour identifier les différences de rigidité des tissus fibreux chez 60 femmes atteintes de fibromes utérins avant et après deux cours de 3 mois de thérapie SPRM et évaluer si la réactivité médicale (c.-à-d. soulagement des symptômes) est lié aux mesures SWE de base.

Conception de l'étude : Il s'agira d'une étude prospective cas-témoins qui utilisera un modèle d'étude mixte (au sein et entre les sujets) (Figure 1). Des femmes atteintes de fibromes utérins et des participantes témoins appariées en bonne santé seront recrutées et assisteront à deux ou trois séances d'imagerie par échographie (selon l'affectation du groupe). Les participantes atteintes de fibromes verront à la fois leur myomètre et la rigidité des fibromes mesurés à l'aide de SWE. Les contrôles appariés sains verront leur myomètre mesuré uniquement. Les participants avec des fibromes subissant une intervention chirurgicale subiront une hystérectomie ou une myomectomie et des échantillons de tissus seront récoltés et testés dans un gabarit qui mesure la rigidité sous tension mécanique. Les participants avec des fibromes qui demandent une prise en charge médicale auront une séance d'imagerie par échographie avant et après deux cours de 3 mois d'acétate d'ulipristal (UPA ; un SPRM prescrit au Canada20).

Participants : Trois groupes de 60 femmes préménopausées âgées de plus de 18 ans seront recrutés :

1. Les patientes souhaitant une prise en charge chirurgicale des fibromes utérins (FIB-Sx) seront recrutées à partir d'une liste de patientes ayant consenti à la chirurgie (hystérectomie ou myomectomie avec indication principale de fibromes) par un membre du Groupe de gynécologie mini-invasive de L'Hôpital d'Ottawa (dirigé par le candidat principal désigné , S. Singh). FIB-Sx sera exclu s'il a> 5 fibromes identifiés à l'échographie ou suspicion de léiomyosarcome sur la base d'un examen clinique, chirurgical ou pathologique macroscopique.
2. Les patientes à la recherche d'une prise en charge médicale des fibromes utérins (FIB-Mx) seront sélectionnées à partir d'une liste d'aiguillages vers le Centre de santé pour femmes Shirley E. Greenberg (SEGWHC) de L'Hôpital d'Ottawa et recrutées au moment de la consultation si un traitement leur a été prescrit. de l'UPA par leur médecin traitant. FIB-Mx sera exclu s'ils ont> 5 fibromes identifiés sur US ou cours antérieur d'analogues SPRM / GnRH dans les 3 mois suivant le recrutement.
3. Les participants témoins en bonne santé (CON) (appartenant au FIB en âge, parité et IMC) seront recrutés dans la communauté d'Ottawa par le biais d'affiches publicitaires, du bouche à oreille et des médias sociaux. La CON sera exclue si elle a des antécédents de pathologie utérine (par ex. adénomyose, hyperplasie, endométriose), ont des cycles menstruels irréguliers, sont actuellement enceintes ou ont été enceintes au cours des six derniers mois précédant le recrutement.

Évaluation initiale : les femmes consentantes des filières contrôle (CON) et chirurgicale (FIB-Sx) participeront à deux évaluations. Les femmes consentantes de la filière médicale (FIB-Mx) assisteront à une visite dès que possible après le recrutement, une autre trois mois après le début du traitement et une troisième visite 6 mois après le début du traitement. À chaque visite, les femmes subiront des évaluations par élastographie par ondes de cisaillement (SWE) et US 3D (Supersonic UltrafastTM Aixplorer®, Apexium Medical, Canada) de leur utérus dans son ensemble, sur 10 sites sains et jusqu'à 5 sites de fibromes. SWE et les volumes seront enregistrés en séries de clips de 10 images. Des mesures morphologiques de l'utérus et des fibromes sélectionnés seront effectuées et les fibromes recevront des numéros d'identification basés sur une carte de taille et de localisation en 3D. SWE sera utilisé pour prendre des mesures pertinentes de la rigidité des tissus sur tous les sites d'intérêt. Trois répétitions de chaque mesure seront effectuées. Les femmes des volets CON et FIB-Sx recevront une deuxième séance d'imagerie identique lors de leur première visite et une seule séance d'imagerie lors de la deuxième visite. Les participants au flux FIB-Mx recevront une seule séance d'imagerie à chaque visite.

Intervention chirurgicale : l'approche chirurgicale (abdominale ou laparoscopique) sera enregistrée ainsi que les résultats secondaires, y compris la durée de l'opération, la perte de sang, les conversions de techniques chirurgicales, les excisions échouées/incomplètes et les procédures supplémentaires effectuées. Ces données seront utilisées à des fins descriptives et contribueront au développement d'une base de données pour notre objectif de recherche à long terme.

Échantillonnage de tissus : pour les participants au volet FIB-Sx, l'approche chirurgicale (myomectomie ou hystérectomie + abdominale ou laparoscopique), le déroulement de la résection et les résultats secondaires, y compris la durée de l'opération, la perte de sang, la technique chirurgicale, les excisions échouées/incomplètes, intra ou post - Les complications opératoires et les procédures supplémentaires seront enregistrées à des fins descriptives. Les échantillons de tissus morcelés seront exclus. Tous les tissus excisés chirurgicalement seront envoyés au service de pathologie pour inspection grossière et traitement suivant les procédures standard. Pour les cas d'hystérectomie, un assistant en pathologie (formé et sous la supervision du collaborateur S. Strickland) excisera cinq échantillons de 1 cm3 de tissu non néoplasique des sites myométriaux d'intérêt et des sections de 1 cm3 de chaque fibrome d'intérêt. Pour les cas de myomectomie, des sections de 1 cm3 de chaque fibrome d'intérêt seront également excisées. Dans les cas chirurgicaux avec > 3 fibromes excisés, le chirurgien participant inclura le numéro d'identification de fibrome spécifique à l'étude donné lors de la séance d'imagerie américaine dans la demande de pathologie. Un membre de l'équipe de recherche rencontrera l'assistant en pathologie au moment de la dissection pour s'assurer que chaque échantillon est placé dans des bouteilles individuelles avec une solution saline isotonique et étiqueté avec son numéro d'identification d'étude unique. Les échantillons seront transportés au laboratoire de M. Labrosse (collaborateur) à l'Institut de cardiologie d'Ottawa pour des tests mécaniques.

Intervention médicale : Le traitement médical sera enregistré ainsi que les résultats secondaires liés aux symptômes du patient et à sa qualité de vie. Ces données seront utilisées à des fins descriptives et contribueront au développement d'une base de données pour notre objectif de recherche à long terme.

Essais mécaniques : Tous les échantillons seront conservés dans une solution saline et testés dans les 24 heures suivant l'excision. Les échantillons seront encore disséqués en tranches de 2x10 mm et chargés dans un gabarit mécanique (Biotester, CellScale, Waterloo, Canada) au laboratoire du collaborateur M. Labrosse et testés à 37°C, cycliquement en tension (1Hz, 2-3% de déformation) suivant les procédures développé dans la littérature pour les tests mécaniques sur le tissu utérin. Le module d'élasticité (E, kPa), analogue à la rigidité, et le rapport de contraste de rigidité (E_fibroid/E_myometer) seront calculés trois fois pour chaque échantillon et moyennés. Le protocole de test mécanique prendra environ 2 heures. Le chargement mécanique sera sous contrôle de déplacement (2-3 % de contrainte) pour éliminer le risque d'endommager les tissus, permettant des mesures répétées et des analyses histologiques. Tous les échantillons seront placés dans du formol tamponné neutre à 10 % immédiatement après le test et renvoyés en pathologie pour un diagnostic définitif. Les rapports de pathologie et les diapositives seront examinés rétrospectivement pour extraire les caractéristiques descriptives des fibromes. Les membres de l'équipe de recherche acquérant des mesures SWE ultérieures, des mesures de rigidité mécanique et examinant des rapports de pathologie ne seront pas informés des résultats de la mesure SWE initiale.

Analyses statistiques : Toutes les données seront testées pour la normalité et des tests non paramétriques équivalents à ceux décrits ci-dessous seront utilisés le cas échéant. Tous les tests seront effectués à l'aide du logiciel statistique SPSS (v25, IMB Corp., Armonk, États-Unis) et la signification sera acceptée comme p<0,05. Des comparaisons post-hoc appropriées seront effectuées. Les variables dépendantes du pic SWE et de la rigidité moyenne sont supposées être interdépendantes.

Objectif 1.1 : Les analyses de variance multivariées bidirectionnelles (3x2) (MANOVA) testeront les différences significatives dans la rigidité moyenne et maximale (kPa) en ce qui concerne la variable indépendante du temps de test (répétition et session) pour chaque site de mesure. Des analyses de variance unidirectionnelles (ANOVA) et des tests t dépendants seront utilisés pour l'évaluation post-hoc corrigée de Bonferroni des effets principaux significatifs. Des tests t dépendants détermineront si le plan de mesure affecte de manière significative les mesures de rigidité SWE. Les coefficients de corrélation intra-classe et l'erreur standard des mesures évalueront la fiabilité intra- et inter-session, et entre les plans des mesures de rigidité SWE.

Objectif 1.2 : Les régressions linéaires univariées cartographieront la relation entre la rigidité moyenne et maximale de SWE et le module d'élasticité complexe, le module d'élasticité complexe étant considéré comme le critère standard. Pour les relations non linéaires, des transformations appropriées seront effectuées.

Objectif 1.3 : Des analyses multivariées bidirectionnelles de covariance testeront l'effet du site (jonction cervicale, isthme, fond d'œil) et du groupe (FIB vs CON) sur la rigidité myométriale maximale et moyenne et les effets confondants de l'âge, de la parité et de l'utilisation de contraceptifs sur la différence moyenne de groupe ajustée. Des tests t indépendants seront utilisés pour l'évaluation post-hoc si un effet/interaction principal significatif est observé. Les régressions logistiques cartographieront la relation entre l'âge, la parité et l'utilisation de contraceptifs et la rigidité myométriale à chaque site de mesure. Des régressions acceptables expliqueront > 80 % de la variance des données. Pour les relations non linéaires, des transformations appropriées seront effectuées.

Objectif 2.1 : Sur la base du rapport de pathologie, les fibromes seront classés comme non dégénératifs (c.-à-d. normale) ou dégénérative (y compris toutes les variations de présentation). Les MANOVA à sens unique évalueront les différences entre les groupes dans le type de fibrome (non dégénératif vs dégénératif) et le pic de tissu utérin et la rigidité moyenne mesurée avec SWE, tandis que l'évaluation post-hoc des effets principaux significatifs impliquera des tests t indépendants utilisant les corrections de Bonferroni appropriées.

Objectif 2.2 : Les mesures SWE feront l'objet d'une moyenne d'ensemble sur les répétitions intra-session pour chaque site. Les MANOVA bidirectionnelles évalueront les différences de site et de temps (avant, après le cours 1, après le cours 2) dans la rigidité moyenne et maximale mesurées avec SWE Les ANOVA unidirectionnelles et les tests t dépendants seront utilisés pour l'évaluation corrigée post-hoc de Bonferroni d'effets principaux significatifs.