益生菌后 COVID-19 病毒载量的变化

1. 研究假设：通过施用特定的益生菌，可以刺激针对冠状病毒 COVID-19 的免疫反应，从而能够降低其病毒载量和继发症状。

   有一种不同的方法来攻击有害微生物。 它基于在其栖息地中存在其他微生物的整个复杂网络，即我们的微生物群，它通过空间、食物或免疫效应的竞争来阻止该微生物的发育、生长和进食。 在 COVID-19 患者中，已经描述了肠道生态失调，特别是观察到被认为是乳酸杆菌属和双歧杆菌属益生菌的物种减少。 目前的研究建议测试新型营养补充剂对潜在患者免疫系统的影响，并平衡受损的微生物群。 该产品包含描述为受 COVID-19 感染影响的属的物种。 此外，所选菌株显示出抗炎和抗氧化作用，以及在之前的试验中刺激免疫系统的能力。 这三种菌株都具有 FDA 认可的 GRAS 状态，并且在 EFSA QPS 列表中。 该产品还含有维生素 D、锌和硒，这三种强大的免疫反应诱导剂。 根据世界卫生组织的标准，它是一种安全的产品。 此外，由于后生元活性，尽管使用了抗生素，它仍然有效，降低了此类患者发生败血症的风险。 为了监测功能性产品的治疗效果，将通过咨询方式对患者病情的演变进行跟进。 另一方面，我们将尝试将这种状态与血清和咽鼻刮片中存在的病毒载量相关联。

2. 主要和次要目标

主要目的：本研究的主要目的是评估新型营养补充剂（免疫系统增强剂、抗氧化和抗炎能力）降低 COVID-19 冠状病毒病入院患者鼻咽涂片病毒载量的能力。 患者将在整个过程中遵循医院委员会同意的药物。

次要目标：监测 COVID-19+ 入院患者入院时和出院前以下参数的变化：

• 住院时间（天）。 留在重症监护室（天）
• 临床指标：呼吸频率、体温、排便次数和稠度。 腹痛。 恶心和呕吐。 周六02。
• 入院第 5 天的呼吸支持类型：环境空气（无）、鼻罩、呼吸面罩、储液器、无创机械通气 (NIV)、经口气管插管。
• 入院和出院时的分析参数：总淋巴细胞、血红蛋白、铁蛋白、中性粒细胞、尿素/肌酐、C-反应蛋白、LDH、D-二聚体、AST/ALT、血小板。

• 确定患者队列中的死亡率并与文献中描述的进行比较。

  3. 主要和次要研究变量

  3. 1. 主要研究变量

• 鼻咽涂片入院期间的病毒载量。

  3. 2. 次要研究变量

• 住院时间（天）。 留在重症监护病房（天）。
• 入院时及之后每 48 小时的临床指标：呼吸频率、氧饱和度、体温、排便次数和稠度。 腹痛。 恶心和呕吐。
• 入院第 5 天的呼吸支持类型：环境空气（无）、鼻镜、呼吸面罩、储液器、无创机械通气 (NIV)、经口气管插管。
• 死亡。
• 第 0 天和出院时的分析参数：总淋巴细胞、铁蛋白、血红蛋白、中性粒细胞、尿素/肌酐、C-反应蛋白、IL-6、LDH、D-二聚体、AST/ALT、血小板

• 副作用的出现。

  4. 材料和方法

4.1. 研究设计 随机临床试验，临床干预功能性新型营养补充剂处方。 所有出现 COVID-19 或 COVID+ 感染症状的患者的预期持续时间为 3 个月。

将在患者入院开始时和每 48 小时通过 rt-qPCR（逆转录酶定量聚合酶链反应）分析血清病毒载量，直至感染和咽鼻渗出物缓解。

根据医院方案接受药物治疗的患者还将每天服用一剂（一包），直至疾病缓解或持续一个月。

4.2. 研究的样本量 根据 GRANMO 样本量计算器（2012 年 4 月版本 7.12）接受双侧对比中 0.15 的 alpha 风险和 0.3 的 beta 风险，第一组中的 48 名受试者和第二组中的 48 名受试者需要检测两个比例之间的差异具有统计学意义，而第 1 组（干预组）预计为 0.5，第 2 组为 0.7。 据估计，后续损失率为 5%。 已使用 ARCOSENE 方法。

4.3. 统计计划 定量变量将表示为均值和标准差，假设基于中心极限定理呈正态分布。

定性变量将表示为具有 95% 置信区间的频率。 定性变量将使用卡方检验进行比较。

定量变量将使用学生 T 检验进行比较。 为了评估干预措施对 COVID-19 疾病演变的影响，包括平均停留时间、临床变量以及定性和定量分析，将进行多变量分析，其中将由不同的变量控制可能成为混淆因素（年龄、性别、疾病类型、入院时疾病的严重程度、可能影响进化的其他疾病、医疗、既往手术等）

4.4. 计划物理样本绘制 主要评估标准：这些患者将在入院第 0 天和第 5 天进行手术，进行咽鼻涂片检查。

病毒载量测试和细胞因子：在样本中，病毒载量将通过医院服务中的 rt-qPCR 确定。 当认为合适时，应根据医生的指示测量细胞因子。

5. 研究方案中考虑的伦理问题

5.1 研究的伦理行为

该研究将按照以下准则进行：

• 当地的道德标准。
• 关于保护研究中人类受试者的欧洲指令。
• 赫尔辛基宣言。
• 该研究将严格按照《赫尔辛基宣言》中关于人体研究和临床试验的国际伦理建议，并按照卫生部关于临床试验的建议进行。
• 欧洲药物流行病学和药物警戒中心网络的建议
• GMP 建议。
• 其他适用于每个国家和巴伦西亚共同体的相关指南、法律或法规 由于它是一个营养补充的研究项目，它不被视为药物或保健品，因此生物医学研究法适用于它，而不是欧洲经济共同体 RD 1090/2015。 因此，无需获得 AEMPS（国家药品管理局）或 Conselleria de Sanitat 的授权。

研究方案将提交给 Hospital de Sagunto IRB 以供事先批准。