Изменения вирусной нагрузки при COVID-19 после пробиотиков

1. Гипотеза исследования: путем введения определенных пробиотиков можно стимулировать иммунный ответ против коронавируса COVID-19, способный снизить его вирусную нагрузку и вторичную симптоматику.

   Есть и другой способ атаковать вредоносный микроорганизм. Он основан на существовании в среде его обитания целой сложной сети других микроорганизмов, нашей микробиоты, препятствующей развитию, росту и питанию этого микроорганизма либо за счет конкуренции пространства, пищи, либо за счет иммунного воздействия. У пациентов с COVID-19 был описан дисбактериоз кишечника, в частности, наблюдалось уменьшение видов, считающихся пробиотиками родов Lactobacillus и Bifidobacterium. Настоящее исследование предлагает тестирование новой пищевой добавки для потенциальной иммунной системы пациента и уравновешивает поврежденную микробиоту. Этот продукт содержит виды из родов, описанных как пораженные инфекцией COVID-19. Более того, отобранные штаммы показали противовоспалительный и антиоксидантный эффект, а также способность стимулировать иммунную систему в предыдущих анализах. Все три штамма имеют статус GRAS, признанный FDA, и входят в список QPS EFSA. Продукт также содержит витамин D, цинк и селен, три мощных индуктора иммунного ответа. Это безопасный продукт по критериям ВОЗ. Кроме того, он может быть эффективен, несмотря на введение антибиотиков, благодаря постбиотической активности, снижая риск сепсиса, описанного у этого типа пациентов. Чтобы контролировать эффект лечения функциональным продуктом, будет проводиться последующее наблюдение посредством консультаций относительно развития состояния пациента. С другой стороны, мы попытаемся сопоставить это состояние с вирусной нагрузкой, присутствующей в сыворотке крови и соскобе из глотки и носа.

2. ОСНОВНЫЕ И ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ЗАДАЧИ

Основная цель: Основная цель исследования - оценить способность новой пищевой добавки (усилитель иммунной системы, антиоксидант и противовоспалительная способность) снижать вирусную нагрузку с помощью мазка из носоглотки у пациентов, госпитализированных по поводу коронавирусной болезни COVID-19. Пациент будет принимать лекарства, согласованные комитетом больницы, на протяжении всего процесса.

Второстепенные цели: Мониторинг изменений у пациентов, госпитализированных с COVID-19+, следующих параметров при поступлении и до выписки:

• Пребывание в стационаре (дни). Пребывание в отделении интенсивной терапии (дни)
• Клинические показатели: частота дыхания, температура тела, количество дефекаций и консистенция. Боль в животе. Тошнота и рвота. Сб02.
• Вид респираторной поддержки на 5-е сутки поступления: атмосферный воздух (нет), назальная маска, вентимаска, резервуар, неинвазивная искусственная вентиляция легких (НИВЛ), оротрахеальная интубация.
• Аналитические показатели при поступлении и выписке: общие лимфоциты, гемоглобин, ферритин, нейтрофилы, мочевина/креатинин, С-реактивный белок, ЛДГ, Д-димер, АСТ/АЛТ, тромбоциты.

• Определение частоты летальности в когорте пациентов и сравнение с описанной в литературе.

  3. ПЕРВИЧНЫЕ И ВТОРИЧНЫЕ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЕ ПЕРЕМЕННЫЕ

  3. 1. Первичная переменная исследования

• Вирусная нагрузка в период поступления в мазок из носоглотки.

  3. 2. Второстепенные переменные исследования

• Пребывание в стационаре (дни). Пребывание в отделении интенсивной терапии (дней).
• Клинические показатели при поступлении и каждые 48 ч после этого: частота дыхания, насыщение кислородом, температура тела, количество дефекаций и консистенция. Боль в животе. Тошнота и рвота.
• Вид респираторной поддержки на 5-е сутки поступления: атмосферный воздух (нет), назальные очки, вентимаска, резервуар, неинвазивная искусственная вентиляция легких (НИВЛ), оротрахеальная интубация.
• Смертность.
• Аналитические параметры на 0-й день и при выписке из стационара: общие лимфоциты, ферритин, гемоглобин, нейтрофилы, мочевина/креатинин, С-реактивный белок, ИЛ-6, ЛДГ, D-димер, АСТ/АЛТ, тромбоциты.

• Появление побочных эффектов.

  4. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

4.1. Дизайн исследования Рандомизированное клиническое исследование с клиническим вмешательством по назначению новой функциональной пищевой добавки. Ожидаемая продолжительность составляет 3 месяца для всех пациентов с симптомами инфекции COVID-19 или COVID+.

Вирусная нагрузка в сыворотке будет анализироваться с помощью RT-qPCR (количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой) в начале поступления пациента и каждые 48 часов до ремиссии инфекции и глоточно-носового экссудата.

Пациенту, получающему лечение в соответствии с больничным протоколом, также будет выдаваться дневная доза (один пакетик) до ремиссии болезни или в течение одного месяца.

4.2. Размер выборки исследования Согласно калькулятору размера выборки GRANMO (версия 7.12, апрель 2012 г.) Принимая альфа-риск 0,15 и бета-риск 0,3 при двустороннем контрастировании, 48 субъектов в первой группе и 48 во второй группе необходимы для выявления разница между двумя пропорциями как статистически значимая, чем для группы 1 (группа вмешательства) ожидается на уровне 0,5 и группы 2 0,7. По оценкам, последующий уровень потерь составляет 5%. Был использован подход ARCOSENE.

4.3. Статистический план Количественные переменные будут выражены как среднее значение и стандартное отклонение при условии нормального распределения, основанного на центральной предельной теореме.

Качественные переменные будут выражены как частоты с их 95% доверительными интервалами. Качественные переменные будут сравниваться с использованием критерия хи-квадрат.

Количественные переменные будут сравниваться с использованием Т-критерия Стьюдента. Чтобы оценить влияние вмешательства на развитие заболевания COVID-19, на среднее пребывание, клинические переменные, а также качественный и количественный анализ, будет проведен многомерный анализ, в котором оно будет контролироваться различными переменными, которые факторами путаницы могли выступать (возраст, пол, тип заболевания, тяжесть заболевания при поступлении, другие заболевания, которые могли повлиять на эволюцию, медикаментозное лечение, предшествующие операции и др.)

4.4. Планирование взятия физического образца. Основные критерии оценки: Этим пациентам будет проведена хирургическая операция по взятию мазка из зева и носа на 0-й и 5-й день госпитализации.

Тестирование вирусной нагрузки и цитокины: В образцах вирусная нагрузка будет определяться с помощью RT-qPCR в больничных условиях. Цитокины должны быть измерены по указанию врача, когда это будет сочтено целесообразным.

5. ЭТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ, УЧИТЫВАЕМЫЕ В ПРОТОКОЛЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

5.1 Этическое проведение исследования

Исследование будет проводиться в соответствии со следующими рекомендациями:

• Местные этические стандарты.
• Европейские директивы по защите людей в исследованиях.
• Хельсинкская декларация.
• Исследование будет проводиться в строгом соответствии с международными этическими рекомендациями по исследованиям и клиническим испытаниям на людях, изложенными в Хельсинкской декларации, и в соответствии с рекомендациями Министерства здравоохранения по клиническим испытаниям.
• Рекомендации Европейской сети центров фармакоэпидемиологии и фармаконадзора
• Рекомендации GMP.
• Другие соответствующие руководящие принципы, законы или правила, применимые в каждой стране и в Валенсийском сообществе. Поскольку это исследовательский проект с пищевой добавкой, он не считается лекарством или продуктом для здоровья, и поэтому к нему применяется Закон о биомедицинских исследованиях, а не ЕЭСС РД 1090/2015. Поэтому нет необходимости в разрешении AEMPS (Государственное агентство по лекарственным средствам) или Conselleria de Sanitat.

Протокол исследования будет представлен на предварительное одобрение IRB Hospital de Sagunto.