Alterações na carga viral no COVID-19 após os probióticos

1. Hipótese do estudo: Através da administração de probióticos específicos, poderia ser estimulada a resposta imune contra o coronavírus COVID-19, podendo diminuir sua carga viral e sintomatologia secundária.

   Existe uma maneira diferente de atacar um microrganismo nocivo. Baseia-se na existência no seu habitat de toda uma rede complexa de outros microrganismos, a nossa microbiota, que impede o desenvolvimento, crescimento e alimentação desse microrganismo, quer por competição de espaço, alimento, quer por efeitos imunitários. Em pacientes com COVID-19, foi descrita disbiose intestinal, observando-se especificamente a diminuição de espécies consideradas probióticas dos gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium. O presente estudo propõe o teste do novo suplemento nutricional para potencializar o sistema imunológico do paciente e equilibrar a microbiota danificada. Este produto contém espécies dos gêneros descritos como afetados na infecção por COVID-19. Além disso, as cepas selecionadas apresentaram efeito anti-inflamatório, antioxidante e capacidade de estimulação do sistema imunológico em ensaios anteriores. Todas as três cepas têm o status GRAS reconhecido pelo FDA e estão na lista EFSA QPS. O produto também contém vitamina D, zinco e selênio, três poderosos indutores da resposta imune. É um produto seguro de acordo com os critérios da OMS. Além disso, pode ser eficaz apesar da administração de antibióticos, devido à atividade pós-biótica, reduzindo o risco de sepse descrito nesse tipo de paciente. Para monitorar os efeitos do tratamento com o produto funcional, será feito um acompanhamento por meio de consulta quanto à evolução do quadro do paciente. Por outro lado, tentaremos correlacionar este estado com a carga viral presente no soro e no raspado faríngeo-nasal.

2. OBJETIVOS PRIMÁRIOS E SECUNDÁRIOS

Objetivo principal: O objetivo principal do estudo é avaliar a capacidade do novo suplemento nutricional (potenciador do sistema imunológico, capacidade antioxidante e anti-inflamatória) de diminuir a carga viral por esfregaço nasofaríngeo em pacientes internados por doença de coronavírus COVID-19. O Paciente seguirá a medicação acordada pela comissão do Hospital durante todo o processo.

Objetivos secundários: Acompanhamento das alterações, em pacientes internados por COVID-19+, dos seguintes parâmetros na admissão e antes da alta:

• Internação hospitalar (dias). Permanência em Unidade de Terapia Intensiva (dias)
• Indicadores clínicos: frequência respiratória, temperatura corporal, número de evacuações e consistência. Dor abdominal. Nausea e vomito. Sáb02.
• Tipo de suporte respiratório no 5º dia de internação: ar ambiente (nenhum), máscara nasal, ventimask, reservatório, ventilação mecânica não invasiva (VNI), intubação orotraqueal.
• Parâmetros analíticos na admissão e na alta: Linfócitos totais, Hemoglobina, Ferritina, Neutrófilos, Ureia/Creatinina, Proteína C-reativa, LDH, D-dímero, AST/ALT, Plaquetas.

• Determinação da incidência de mortalidade na coorte de pacientes e comparação com a descrita na literatura.

  3. VARIÁVEIS DE ESTUDO PRIMÁRIAS E SECUNDÁRIAS

  3. 1. Variável primária do estudo

• Carga viral durante o período de admissão para esfregaço nasofaríngeo.

  3. 2. Variáveis ​​secundárias do estudo

• Internação hospitalar (dias). Permanência em Unidade de Terapia Intensiva (dias).
• Indicadores clínicos na admissão e a cada 48 horas seguintes: frequência respiratória, saturação de oxigênio, temperatura corporal, número de evacuações e consistência. Dor abdominal. Nausea e vomito.
• Tipo de suporte respiratório no 5º dia de internação: ar ambiente (nenhum), óculos nasais, ventimask, reservatório, ventilação mecânica não invasiva (VNI), intubação orotraqueal.
• Mortalidade.
• Parâmetros analíticos no dia 0 e na alta hospitalar: Linfócitos totais, ferritina, hemoglobina, neutrófilos, ureia/creatinina, proteína C-reativa, IL-6, LDH, dímero D, AST/ALT, plaquetas

• Aparecimento de efeitos colaterais.

  4. MATERIAL E MÉTODOS

4.1. Desenho do estudo Ensaio clínico randomizado com intervenção clínica de prescrição de novo suplemento nutricional funcional. A duração prevista é de 3 meses em todos os doentes que apresentem sintomas de infeção por COVID-19 ou COVID+.

A carga viral sérica será analisada por rt-qPCR (reação em cadeia da polimerase quantitativa com transcriptase reversa) no início da internação do paciente e a cada 48 horas até a remissão da infecção e exsudato faríngeo-nasal.

O paciente medicado conforme protocolo hospitalar também receberá uma dose diária (um sachê) até a remissão da doença ou por um mês.

4.2. Tamanho da amostra do estudo De acordo com a Calculadora de tamanho de amostra GRANMO (versão 7.12 de abril de 2012) Aceitando um risco alfa de 0,15 e um risco beta de 0,3 em um contraste bilateral, são necessários 48 indivíduos no primeiro grupo e 48 no segundo para detectar o diferença entre duas proporções como estatisticamente significativa, do que para o grupo 1 (grupo de intervenção) espera-se que seja 0,5 e o grupo 2 0,7. Estima-se uma taxa de perda de seguimento de 5%. A abordagem ARCOSENE tem sido usada.

4.3. Plano estatístico As variáveis ​​quantitativas serão expressas como média e desvio padrão assumindo distribuição normal com base no teorema do limite central.

As variáveis ​​qualitativas serão expressas como frequências com seus intervalos de confiança de 95%. As variáveis ​​qualitativas serão comparadas por meio do teste qui-quadrado.

As variáveis ​​quantitativas serão comparadas por meio do teste T de Student. Com o objetivo de avaliar o impacto da intervenção na evolução da doença por COVID-19, na média de permanência, variáveis ​​clínicas e análises qualitativas e quantitativas, será realizada uma análise multivariada, na qual será controlada por diferentes variáveis ​​que podem atuar como fatores de confusão (idade, sexo, tipo de doença, gravidade da doença na admissão, outras doenças que podem afetar a evolução, tratamento médico, cirurgias anteriores, etc.)

4.4. Planejamento da coleta de amostras físicas Critérios principais de avaliação: Esses pacientes terão sua cirurgia realizada esfregaço faríngeo-nasal no dia 0 e no dia 5 de internação.

Testes de carga viral e citocinas: Nas amostras, a carga viral será determinada por rt-qPCR, em serviços hospitalares. As citocinas devem ser dosadas por indicação do médico quando julgar apropriado.

5. ASPECTOS ÉTICOS CONSIDERADOS NO PROTOCOLO DO ESTUDO

5.1 Conduta ética do estudo

O estudo será realizado de acordo com as seguintes orientações:

• Padrões éticos locais.
• Diretivas europeias sobre a proteção de seres humanos em pesquisa.
• Declaração de Helsinque.
• O estudo será conduzido em estrita conformidade com as recomendações éticas internacionais para pesquisa em seres humanos e ensaios clínicos estabelecidos na Declaração de Helsinque e de acordo com as recomendações do Ministério da Saúde sobre ensaios clínicos.
• Recomendações da Rede Europeia de Centros de Farmacoepidemiologia e Farmacovigilância
• Recomendações GMP.
• Outras diretrizes, leis ou regulamentos relevantes aplicáveis ​​em cada país e na Comunidade Valenciana Por se tratar de um projeto de pesquisa com suplemento nutricional, não é considerado um medicamento ou produto de saúde, pelo que se aplica a Lei de Pesquisa Biomédica e não a EECC RD 1090/2015. Portanto, não há necessidade de autorização da AEMPS (Agência Estadual de Medicamentos) ou da Conselleria de Sanitat.

O protocolo do estudo será submetido à aprovação prévia do Hospital de Sagunto IRB.