囊胚腔液中的 DNA 扩增

简介 辅助生殖技术 (ART) 的目标是分娩健康的单胎，IVF 中的治疗策略最有可能是从患者的胚胎队列中移植单个最有活力的胚胎。 因此，胚胎选择对于实现这一目标至关重要。 胚胎形态学的显微评估和评分是在 IVF 早期作为胚胎选择技术开发的（Veeck，1991），并且从那时起一直是最广泛应用的胚胎选择技术。 然而，该技术在最大限度地提高胚胎植入率方面的能力有限，长期以来一直令人遗憾，因此，长期以来一直在寻求更强大的胚胎选择技术。 延时监测和评分（Paulson 等人，2018 年）和使用 PGT-A 的整倍体胚胎移植（非整倍体的植入前基因检测；Gleicher 等人，2017 年）是最近的创新，已成为替代传统显微镜评估和评分的竞争者的胚胎形态。 PGT-A 的一个优势是它独立于胚胎发育和形态学特征评估，因为无论囊胚形态评分如何，整倍体囊胚以相同的速率着床（Capalbo 等人，2014 年）。 此外，除了 PGT-A 的技术和生物学限制外，实施 PGT-A 作为胚胎选择技术的成本可能被许多人认为是过高的。

在人类试管婴儿 PGT 的进化过程中，基于卵裂期胚胎（PGT-v1）活检 1-2 个卵裂球的不良结果和囊胚发育条件的改善，PGT 从 PGT-v1 发展到 PGT-v2。 证据表明 PGT-v.1 对胚胎活力构成重大风险，而整倍体胚胎的移植没有任何益处（Gleicher 等人，2017 年）。 大多数研究报告称，PGT-v2 需要对 5-10 个滋养外胚层 (TE) 细胞进行活检，不会对活检囊胚的发育潜力（植入活力）造成重大风险。 然而，最近有报道称，TE 活检可能并非完全没有风险（Gleicher 等人，2017 年，Ozgur 等人，2019 年）。 目前，PGT-A 面临四个挑战，无法将其作为囊胚选择技术常规使用； (1) 需要高技术专长，(2) TE 活检的侵入性，(3) 完整技术的成本，以及 (4) TE 活检存在抽样偏差——单次 TE 活检 5-10细胞可能无法准确代表整个囊胚的倍性。

传统 PGT 的衍生产品是囊胚腔液 (BF) 中的 DNA 分析。 这种现象首先由 Palini 等人报道。 (2013)。 BF 中 DNA 的起源被认为是胚胎整倍体化的结果，即通过细胞凋亡和/或坏死等调节过程消除非整倍体 DNA 或非整倍体细胞（Leaver 和 Wells，2019）。 玻璃化前胚泡塌陷的做法（Mukaida 等人，2006 年；Iwayama 等人，2011 年）提供了进行微创 PGT-A (miPGT-A) 的机会，即活检 BF。 在一项研究 PGT-A 与 TE 活检和 PGT-A 与 BF 活检之间的倍性一致性的研究中，作者发现临床妊娠率对于没有 DNA 扩增转移的囊胚为 77%，对于有 DNA 扩增的囊胚为 37%（ Magli 等人，2018 年）。 因此，仅仅在 BF 中积累 DNA 就可以作为一种补充措施来优先考虑胚泡进行转移。 实施 BF 活检和全基因组扩增 (WGA) 作为补充选择措施限制/减少 PGT-A 的三个主要挑战； (1) 技术专长，(2) 侵入性，以及 (3) 成本。

在目前的随机对照试验 (RCT) 中，研究人员将研究囊胚液活检 (BF-biopsy) 中的 DNA 扩增，作为一种辅助选择技术，结合囊胚形态学评分来选择要移植的囊胚。 将比较 FET 的临床植入结果，其中转移了评分选择的没有 DNA 扩增的单个胚泡和评分选择的单个胚泡。