- ICH GCP
- 미국 임상 시험 레지스트리
- 임상시험 NCT04744844
Blastocoel 유체의 DNA 증폭
Blastocoel Fluid에서 DNA 증폭이 없으면 기존의 배반포 선택 및 IVF 결과가 향상됩니까?
소개: 냉동 배아 이식(FET) 주기의 혁신적인 절차 변경으로 이식된 배반포의 이식률이 크게 증가했지만 배반포 선택은 이식 결과에서 중요한 제한 요소로 남아 있습니다. 착상율을 개선하기 위해서는 기존의 미세한 배반포 형태 스코어링/선택 기술을 향상된 배반포 선택 기술로 대체하거나 기존의 형태 선택 기술을 새로운 보충 선택 기술로 강화해야 합니다. DNA 증폭을 통한 배반강 체액 생검은 배반포 형태 점수 변수를 유전 변수로 보완할 수 있는 최소 침습(mi) 기술입니다.
목표: 현재의 무작위 통제 시험(RCT)에서 배반포 체액 생검(BF-생검)의 DNA 증폭은 배반포 형태 점수와 함께 이식할 배반포를 선택하기 위한 보충 조치로 조사될 것입니다. 목표는 비용을 증가시키지 않으면서 선택을 개선하고 임상 이식을 증가시키는 최소 침습 배반포 선택 기술을 개발하는 것입니다.
재료 및 방법: 단일 IVF 센터 이중 맹검 무작위 대조 시험, 전체 동결 IVF 치료를 위해 제시된 불임 환자로부터 18세에서 35세 사이의 여성을 모집한 환자. ICSI 후 2PN 접합자가 5개 이상인 등록된 환자(N = 500)는 시험의 두 부문(즉, 테스트 및 대조군)에 무작위 배정됩니다(1:1). 테스트 부문에서 3개의 배반포는 배반강 유체 생검(BF-생검) 및 전체 게놈 증폭을 받게 됩니다. DNA 증폭이 없는 단일 배반포는 테스트 암의 FET로 전송되고 단일 최고 점수 배반포는 컨트롤 암의 FET로 전송됩니다. 시험의 주요 결과 측정은 임상 이식(즉, 태아 심장박동이 있는 임신낭)이 될 것입니다.
결과: DNA 증폭이 없는 점수 선택 단일 배반포와 점수 선택 단일 배반포를 이식한 FET의 임상 이식 결과를 비교한다.
연구 개요
상세 설명
소개 보조 생식 기술(ART)의 목표는 건강한 단일 개체를 전달하는 것이며 IVF의 치료 전략은 환자의 배아 코호트에서 가장 생존 가능한 단일 배아를 이식하는 것이 가장 좋은 기회입니다. 따라서 배아 선택은 이 목표의 성공에 가장 중요합니다. 배아 형태의 현미경 평가 및 스코어링은 IVF 초기에 배아 선택 기술로 개발되었으며(Veeck, 1991) 그 이후로 가장 널리 시행되는 배아 선택 기술로 남아 있습니다. 그러나 배아 이식률을 최대화하는 기술의 제한된 능력은 오랫동안 한탄되어 왔으며 따라서 더 향상된 배아 선택 기술이 오랫동안 모색되었습니다. 타임랩스 모니터링 및 채점(Paulson et al., 2018) 및 PGT-A(이배수체에 대한 착상 전 유전자 검사; Gleicher et al., 2017)를 사용한 정배수체 배아 이식은 기존의 현미경 평가 및 채점을 대체할 경쟁자가 된 최근의 혁신입니다. 배아 형태의. PGT-A의 장점은 정배수체 배반포가 배반포 형태 점수와 관계없이 동일한 속도로 이식되기 때문에 배아 발달 및 형태학적 특징 평가의 독립성입니다(Capalbo et al., 2014). 또한 PGT-A의 기술적 및 생물학적 한계 외에도 PGT-A를 배아 선택 기술로 구현하는 데 드는 비용은 많은 사람들에게 금지된 것으로 간주될 수 있습니다.
인간 IVF에서 PGT의 진화에서 PGT는 분열 단계 배아(PGT-v1)에서 1-2 할구 생검의 불리한 결과와 배반포 발생 조건의 개선을 기반으로 PGT-v1에서 PGT-v2로 진행되었습니다. 증거는 PGT-v.1이 정배수체 배아의 이식으로 인한 이점 없이 배아 생존에 상당한 위험을 제기했음을 시사했습니다(Gleicher et al., 2017). 대부분의 연구는 5-10개의 영양외배엽(TE) 세포의 생검을 필요로 하는 PGT-v2가 생검된 배반포의 발생 가능성(이식 생존력)에 심각한 위험을 제기하지 않는다고 보고했습니다. 그러나 최근 TE 생검이 위험에서 완전히 자유롭지 않을 수 있음을 시사하는 보고가 있었습니다(Gleicher et al., 2017, Ozgur et al., 2019). 현재 PGT-A는 배반포 선택 기술로 일상적인 사용을 방해하는 네 가지 문제에 직면해 있습니다. (1) 고도의 기술 전문성에 대한 필요성, (2) TE 생검의 침습성, (3) 전체 기술의 비용, 및 (4) TE 생검이 표본 편향(5-10의 단일 TE 생검)에 영향을 받는다는 것 세포는 전체 배반포의 계략을 정확하게 나타내지 못할 수 있습니다.
기존 PGT의 스핀오프는 배반강액(BF)의 DNA 분석입니다. 이 현상은 Palini et al. (2013). BF에서 DNA의 기원은 배아 정배수화, 즉 아폽토시스 및/또는 괴사와 같은 조절 과정을 통한 이수성 DNA 또는 이수성 세포의 제거의 결과인 것으로 제안되었습니다(Leaver and Wells, 2019). 유리화 전에 배반포가 붕괴되는 관행(Mukaida et al., 2006, Iwayama et al., 2011)은 최소 침습 PGT-A(miPGT-A), 즉 생검 BF를 수행할 수 있는 기회를 제공합니다. TE 생검이 있는 PGT-A와 BF 생검이 있는 PGT-A 사이의 계략 일치성을 조사한 연구에서 저자는 임상 임신율이 DNA 증폭이 없는 배반포의 경우 77%, DNA 증폭이 있는 배반포의 경우 37%임을 발견했습니다. Magli 등, 2018). 따라서 BF에 DNA가 축적되는 것만으로도 배반포의 이동 우선순위를 정하는 보조 수단으로 사용할 수 있습니다. BF-생검 및 전체 게놈 증폭(WGA)을 보조 선택 측정으로 구현하면 PGT-A의 세 가지 주요 문제가 제한/감소됩니다. (1) 기술적 전문성, (2) 침습성, (3) 비용.
현재의 무작위 대조 시험(RCT)에서 조사관은 배반포 형태 점수와 함께 전송할 배반포를 선택하기 위한 보조 선택 기술로서 배반포 유체 생검(BF-생검)에서 DNA 증폭을 조사할 것입니다. DNA 증폭이 없는 스코어 선별된 단일 배반포와 스코어 선별된 단일 배반포를 이식한 FET의 임상 이식 결과를 비교한다.
연구 유형
등록 (실제)
단계
- 해당 없음
연락처 및 위치
연구 장소
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Antalya, 칠면조, 07080
- Antalya IVF
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
설명
포함 기준:
- 상담 당일 여성 연령이 18≤35세인 환자(의사가 난자 채취일에 여성 연령을 ≤35세로 예상함).
- 임상시험 참여 및 연구에서 익명화된 데이터 사용에 대해 정보에 입각한 동의를 제공한 환자.
- 이전 IVF 치료가 2회 이하인 환자.
- 단일 배반포 이동이 예상되는 환자.
제외 기준:
- 상담 당일 여성 연령이 35세 이상인 환자.
- 인슐린 의존성 당뇨병 또는 인슐린 비의존성 당뇨병이 있는 여성 환자 및 위장관, 심혈관, 폐, 간 또는 신장 질환이 있는 여성 환자.
- 일상적인 동결 체외수정에 사용되는 약물에 대한 금기 사항이나 알레르기가 있는 여성 환자.
- 기존의 PGT-A(이수성) 또는 PGT-M(단일성 질환)을 겪고 있는 환자
- 배아 발생 1일에 5개 미만의 2-PN 접합자를 가진 환자는 무작위화에서 제외됩니다.
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 주 목적: 치료
- 할당: 무작위
- 중재 모델: 병렬 할당
- 마스킹: 더블
무기와 개입
참가자 그룹 / 팔 |
개입 / 치료 |
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실험적: DNA 증폭 선택
실험 부문에서 모든 배반포는 일상적인 형태학적 평가를 받게 되며, 최고 점수를 받은 3개의 배반포는 배반강 유체 생검(BF-생검) 및 전체 게놈 증폭을 거칩니다.
DNA 증폭이 없는 단일 배반포가 냉동 배아 이식 주기에서 이식을 위해 선택됩니다.
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본 연구에서는 ICSI를 수행하는 데 사용되는 것과 유사한 미세 주입 피펫을 사용하여 포배강 유체 생검(BF-생검) 및 허탈을 수행할 것입니다.
피펫은 투명대와 TE를 통해 부드럽게 밀려나고 BF의 최대 90%가 흡인됩니다.
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활성 비교기: 형태학적 점수 선택
활성 비교기 암에서 모든 배반포는 일상적인 형태학적 평가를 받게 됩니다.
(단일) 최고 득점 배반포는 냉동 배아 이식 주기에서 이식을 위해 선택됩니다.
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본 연구에서는 ICSI를 수행하는 데 사용되는 것과 유사한 미세 주입 피펫을 사용하여 포배강 유체 생검(BF-생검) 및 허탈을 수행할 것입니다.
피펫은 투명대와 TE를 통해 부드럽게 밀려나고 BF의 최대 90%가 흡인됩니다.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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임상 이식
기간: 질 초음파 검사는 임신 5주 이후에 실시합니다.
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임상적 이식은 초음파로 확인된 정상적인 임신 주머니와 심장 박동이 있는 주기로 정의됩니다.
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질 초음파 검사는 임신 5주 이후에 실시합니다.
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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임신
기간: 배반포 이식 후 9일째에 혈청 임신 검사를 실시합니다.
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임신은 임의의 혈청 βHCG 수치가 >30mIU/mL인 주기로 정의됩니다.
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배반포 이식 후 9일째에 혈청 임신 검사를 실시합니다.
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진행중인 임신
기간: 경질 초음파 검사는 임신 12주 이후에 시행됩니다.
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진행 중인 임신은 초음파 검사에서 정상적인 임신낭과 심장 박동이 확인된 주기로 정의됩니다.
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경질 초음파 검사는 임신 12주 이후에 시행됩니다.
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공동 작업자 및 조사자
스폰서
수사관
- 연구 책임자: Kemal Ozgur, MD, Antalya IVF
- 수석 연구원: Kevin Coetzee, PhD, Antalya IVF
간행물 및 유용한 링크
일반 간행물
- Capalbo A, Rienzi L, Cimadomo D, Maggiulli R, Elliott T, Wright G, Nagy ZP, Ubaldi FM. Correlation between standard blastocyst morphology, euploidy and implantation: an observational study in two centers involving 956 screened blastocysts. Hum Reprod. 2014 Jun;29(6):1173-81. doi: 10.1093/humrep/deu033. Epub 2014 Feb 26.
- Iwayama H, Hochi S, Yamashita M. In vitro and in vivo viability of human blastocysts collapsed by laser pulse or osmotic shock prior to vitrification. J Assist Reprod Genet. 2011 Apr;28(4):355-61. doi: 10.1007/s10815-010-9522-4. Epub 2010 Dec 9.
- Magli MC, Albanese C, Crippa A, Tabanelli C, Ferraretti AP, Gianaroli L. Deoxyribonucleic acid detection in blastocoelic fluid: a new predictor of embryo ploidy and viable pregnancy. Fertil Steril. 2019 Jan;111(1):77-85. doi: 10.1016/j.fertnstert.2018.09.016. Epub 2018 Dec 5.
- Ozgur K, Berkkanoglu M, Bulut H, Yoruk GDA, Candurmaz NN, Coetzee K. Single best euploid versus single best unknown-ploidy blastocyst frozen embryo transfers: a randomized controlled trial. J Assist Reprod Genet. 2019 Apr;36(4):629-636. doi: 10.1007/s10815-018-01399-1. Epub 2019 Jan 7.
- Palini S, Galluzzi L, De Stefani S, Bianchi M, Wells D, Magnani M, Bulletti C. Genomic DNA in human blastocoele fluid. Reprod Biomed Online. 2013 Jun;26(6):603-10. doi: 10.1016/j.rbmo.2013.02.012. Epub 2013 Mar 13.
- Veeck LL: Atlas of the Human Oocytes and Early Conceptus. 1991, Vol. 2. Baltimore, Williams & Willkins Co.
- Paulson RJ, Reichman DE, Zaninovic N, Goodman LR, Racowsky C. Time-lapse imaging: clearly useful to both laboratory personnel and patient outcomes versus just because we can doesn't mean we should. Fertil Steril. 2018 Apr;109(4):584-591. doi: 10.1016/j.fertnstert.2018.01.042. No abstract available.
- Gleicher N, Metzger J, Croft G, Kushnir VA, Albertini DF, Barad DH. A single trophectoderm biopsy at blastocyst stage is mathematically unable to determine embryo ploidy accurately enough for clinical use. Reprod Biol Endocrinol. 2017 Apr 27;15(1):33. doi: 10.1186/s12958-017-0251-8.
- Mukaida T, Oka C, Goto T, Takahashi K. Artificial shrinkage of blastocoeles using either a micro-needle or a laser pulse prior to the cooling steps of vitrification improves survival rate and pregnancy outcome of vitrified human blastocysts. Hum Reprod. 2006 Dec;21(12):3246-52. doi: 10.1093/humrep/del285. Epub 2006 Aug 26.
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
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기본 완료 (실제)
연구 완료 (실제)
연구 등록 날짜
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