Amplification de l'ADN dans le fluide Blastocoel

Introduction L'objectif de la technologie de procréation assistée (ART) est la délivrance d'un singleton sain, la stratégie de traitement en FIV ayant les meilleures chances étant le transfert de l'embryon le plus viable de la cohorte d'embryons d'un patient. La sélection des embryons est donc primordiale pour atteindre cet objectif. L'évaluation microscopique et la notation de la morphologie de l'embryon ont été développées en tant que technique de sélection d'embryons dans les premières années de la FIV (Veeck, 1991) et sont depuis restées la technique de sélection d'embryons la plus largement pratiquée. Cependant, la capacité limitée de la technique à maximiser les taux d'implantation d'embryons a longtemps été déplorée et, par conséquent, des techniques de sélection d'embryons plus améliorées ont longtemps été recherchées. La surveillance et la notation en accéléré (Paulson et al., 2018) et le transfert d'embryons euploïdes à l'aide du PGT-A (test génétique préimplantatoire pour l'aneuploïdie ; Gleicher et al., 2017) sont des innovations récentes qui sont devenues des prétendantes pour remplacer l'évaluation et la notation microscopiques conventionnelles de la morphologie de l'embryon. Un avantage du PGT-A est son indépendance du développement embryonnaire et des évaluations des caractéristiques morphologiques, car les blastocystes euploïdes s'implantent au même rythme, quel que soit le score de morphologie du blastocyste (Capalbo et al., 2014). De plus, outre les limitations techniques et biologiques du PGT-A, les coûts de mise en œuvre du PGT-A en tant que technique de sélection d'embryons peuvent être considérés comme prohibitifs par beaucoup.

Dans l'évolution de la PGT dans la FIV humaine, la PGT est passée de la PGT-v1 à la PGT-v2 sur la base des effets indésirables de la biopsie de 1-2 blastomères d'embryons au stade de clivage (PGT-v1) et de l'amélioration des conditions de développement des blastocystes. Les preuves suggèrent que le PGT-v.1 pose un risque important pour la viabilité des embryons, sans aucun avantage résultant du transfert d'embryons euploïdes (Gleicher et al., 2017). La majorité des études ont rapporté que le PGT-v2, qui nécessite la biopsie de 5 à 10 cellules de trophectoderme (TE), ne pose aucun risque significatif pour le potentiel de développement (viabilité d'implantation) des blastocystes biopsiés. Cependant, des rapports ont récemment été publiés, suggérant que la biopsie TE pourrait ne pas être totalement sans risque (Gleicher et al., 2017, Ozgur et al., 2019). Actuellement, PGT-A fait face à quatre défis empêchant son utilisation courante comme technique de sélection de blastocystes ; (1) le besoin d'une expertise technique élevée, (2) le caractère invasif de la biopsie TE, (3) le coût de la technique complète et (4) le fait que la biopsie TE est sujette à un biais d'échantillonnage - une seule biopsie TE de 5 à 10 les cellules peuvent ne pas représenter avec précision la ploïdie de l'ensemble du blastocyste.

Un spin-off de la PGT conventionnelle est l'analyse de l'ADN dans le liquide blastocèle (BF). Ce phénomène a été rapporté pour la première fois par Palini et al. (2013). Il a été suggéré que l'origine de l'ADN dans le BF est le résultat de l'euploïdisation de l'embryon, c'est-à-dire l'élimination de l'ADN d'aneuploïdie ou des cellules aneuploïdes par des processus régulateurs tels que l'apoptose et/ou la nécrose (Leaver et Wells, 2019). La pratique de l'effondrement du blastocyste avant la vitrification (Mukaida et al., 2006, Iwayama et al., 2011) offre la possibilité d'effectuer une PGT-A mini-invasive (miPGT-A), c'est-à-dire la biopsie BF. Dans une étude visant à étudier la concordance de la ploïdie entre le PGT-A avec biopsie TE et le PGT-A avec biopsie BF, les auteurs ont constaté que le taux de grossesse clinique était de 77 % pour les blastocystes sans amplification d'ADN transférés et de 37 % pour les blastocystes avec amplification d'ADN ( Magli et al., 2018). La simple accumulation d'ADN dans le BF pourrait donc être utilisée comme mesure supplémentaire pour donner la priorité aux blastocystes pour le transfert. La mise en œuvre de la biopsie BF et de l'amplification génomique entière (WGA) en tant que mesure de sélection supplémentaire limite/réduit trois des principaux défis du PGT-A ; (1) expertise technique, (2) caractère invasif et (3) coûts.

Dans le présent essai contrôlé randomisé (ECR), les chercheurs étudieront l'amplification de l'ADN dans les biopsies de liquide de blastocyste (BF-biopsie) comme technique de sélection supplémentaire pour sélectionner les blastocystes à transférer en conjonction avec les scores de morphologie des blastocystes. Les résultats d'implantation clinique des FET dans lesquels un blastocyste unique sélectionné par score sans amplification d'ADN et des blastocystes uniques sélectionnés par score ont été transférés seront comparés.