淋巴细胞减少作为 COVID-19 老年患者疾病严重程度的特定生物标志物或预后危险因素的研究

简介 2019 年 12 月，中国湖北省武汉市发生了一系列病毒性肺炎病例，导致发现了一种新型病原体，后来被命名为严重急性呼吸系统综合症冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) (1) . SARS-CoV-2 在中国人口中迅速传播，随后传播到世界各大洲（南极洲除外）。 2020 年 3 月 11 日，世界卫生组织 (WHO) 宣布疫情为大流行 (2)。 9 月，217 个不同的国家报告了确诊病例，导致超过 2700 万人被感染，并向 WHO 报告了近 900.000 例死亡病例 (3, 4)。 SARS-CoV-2 不区分社会地位、年龄或种族，到目前为止还没有有效的治疗方法。 然而，已经确定了与疾病进展严重程度相关的风险因素，包括高龄 (>65 岁)、合并症，包括动脉高血压、心血管疾病、脑血管疾病、呼吸系统疾病和实验室参数，如低 CD3+CD8+ T 细胞 (< 75 个细胞.µL-1), 低淋巴细胞计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值 (N/L)（N/L 比值 >3.13）和心肌肌钙蛋白 I 增加 (≥0.05ng.mL-1) (5-9)。

已经证明，年龄和淋巴细胞减少都是与 COVID-19 患者疾病进展严重程度相关的危险因素。 然而，众所周知，低淋巴细胞计数也与健康个体的年龄增长有关 (10)。 另一项研究还表明，在 COVID-19 出现之前，高 CRP 与老年住院人群的淋巴细胞减少症有关 (11)。 这一观察结果提出了淋巴细胞减少是否是老年患者 COVID-19 疾病的特异性预后标志物的问题。

本研究的目的是：

1. 通过比较 3 组，评估老年人 COVID-19 病例淋巴细胞减少症的特异性：

   1. 第 1 组由 COVID-19 病例组成
   2. 第 2 组由 COVID-19 以外的急性感染患者组成
   3. 第 3 组由修改后的 SENIEUR 协议中定义的健康老年人组成
2. 评估 COVID-19 病例淋巴细胞减少与结果的相关性
3. 评估其他疾病（如心血管疾病/危险因素）与老年人淋巴细胞减少症之间的关系。

患者和方法

患者：

为了评估老年患者 COVID-19 感染中淋巴细胞减少的结果，将研究三组​​：

第 1 组将由 2020 年 2 月至 2020 年 9 月期间在 UZ Brussel 住院的 70 岁以上 COVID-19 阳性患者组成，他们的 SARS-CoV-2 RT-PCR 检测呈阳性。

第 2 组将由 100 名 70 岁以上因 COVID-19 以外的急性感染在 UZ Brussel 住院的患者组成。 为避免包括假阴性患者，这些患者将从 2019 年 1 月至 2019 年 12 月，即在比利时记录到第一例 COVID-19 病例之前进行选择。 COVID-19 以外的急性感染将定义为 1) 经鼻咽拭子证实的病毒感染：流感、RSV、副流感、鼻病毒、冠状病毒或 2) 经阳性血培养、阳性关节穿刺、阳性咳痰、肺炎证实的细菌感染胸片或腹部成像（CT 或回声）记录的感染，尿培养阳性，肾超声造影或 DMSA 闪烁显像证实肾盂肾炎，或肾盂肾炎的特定临床症状和血培养阳性。 由于无症状菌尿在老年患者中的患病率很高，因此仅尿培养阳性不被视为尿液感染。

为了评估合并症对老年人淋巴细胞减少症的影响，将第 1 组和第 2 组与定义明确的历史组（第 3 组）进行比较：

第 3 组将由修改后的 SENIEUR 协议 (12, 13) 中定义的健康老年人组成。 该小组是从先前进行的一项研究中招募的。 这些是居住在社区的 70 岁以上的人，被认为几乎健康，但大多数老年人都患有一些疾病，例如骨质疏松症、骨关节炎或动脉粥样硬化。

纳入标准 Cfr 三组定义 排除标准 接受免疫抑制治疗的患者、患有已知活动性癌症或血液系统疾病的患者、接受放疗或化疗的患者或患有已知自身免疫性疾病的患者将不包括在内，因为这些潜在病症或治疗会干扰白血病细胞计数超出了本研究的范围。

方法：

临床特征的确定将通过医疗档案和血液采样评估所有受试者的潜在疾病。 社会评估包括确定年龄、性别和家庭（私人与机构）。 临床数据包括吸烟和饮酒习惯、体重指数（BMI）、病史、目前的治疗和住院原因。 心血管 (CV) 疾病定义为中风病史、心肌梗塞、心功能不全（通过前壁心脏回波描记术和临床症状评估）、脑血管疾病或通过颈动脉或腿部多普勒超声检查评估的动脉粥样硬化和缺血症状。 CV 风险因素将由动脉高血压 (AHT)、2 型糖尿病 (DM 2)、高胆固醇血症或他汀类药物摄入、梗塞病史或吸烟病史的存在来定义。

综合老年评估 在可能的情况下，我们将获得综合老年评估：使用“老年累积疾病评定量表”(CIRS-G) 对合并症和医疗问题的严重程度进行评分，这是一种量化疾病负担的工具。 它将感染风险和严重程度最高的老年人与疫苗反应明显受损区分开来 (14)。 它包括对 14 个器官系统的医学问题的全面审查。 它基于每个器官系统 (15) 的 0 到 4 级评分。 “老年抑郁量表”用于评估抑郁症的风险 (GDS-15) 的 15 个问题 (16)。 使用 Katz 量表对“日常生活活动”(ADL) 进行评估。 它包括以下项目：洗澡、穿衣、转移、如厕、大小便和进食。 每个任务都按 4 级等级（卡茨等级为 1 到 4）分级，其中较低级别表示不存在依赖性，较高级别表示任务的最大依赖性 (17)。 使用“简易精神状态检查”(MMSE) 评估认知功能。 可能的分数范围从 0 到 30 分，分数 <24/30 表明认知功能受损 (18)。 使用“营养不良通用筛查工具”(MUST) (19) 评估营养状况。 社会复杂性的定义是需要社会工作者进行干预（需要家庭护理、康复疗养院或经济帮助）。 老年综合症的总和包括：跌倒、社会复杂性、谵妄、营养不良、依赖、抑郁、吞咽困难、大小便失禁、体位性低血压、处方不当和认知功能障碍。

生物参数 将收集在进入老年病房后的前 24 小时和 3 至 5 天后进行的常规生化评估的数据（白细胞总数和分类计数、血红蛋白和血细胞比容、肾功能和电解质 CRP、白蛋白、前白蛋白、维生素 B12 和叶酸水平）。

结果：

评估有或没有淋巴细胞减少症患者的结果、再住院的次数、入住重症监护病房的次数、肺栓塞等并发症、住院时间、死亡率、出院地点和严重程度评分将收集 COVID-19 + 患者胸部 CT 扫描的数据。

程序 这是一项回顾性研究。 不会进行任何干预。

流程图

研究分析 统计分析 IBM SPSS 25 版将用于统计分析。 Kolmogorov-Smirnov 检验将用于确定数据的正态性。

将对非参数数据进行 Mann Whitney 秩和检验或对参数数据进行学生 T 检验，以比较有和没有淋巴细胞减少症的患者的 COVID-19、其他感染、合并症、并发症、老年评估、住院时间、再住院、死亡率，出院地点。

为了确定可能与淋巴细胞减少症显着相关的临床和生物学因素，我们进行了单变量分析（由 Pearson 系数表示）。 对于所有志愿者，这些参数包括心血管疾病和危险因素（吸烟、动脉高血压、2 型糖尿病、胆固醇水平、BMI）、COVID-19、其他感染、合并症、并发症、老年评估、住院时间、再住院、死亡率、卸货地点。

为了定义淋巴细胞减少的独立预测因素，我们通过逐步向后多元线性回归分析测试了几种模型。