Studio della linfopenia come biomarcatore specifico o fattore di rischio prognostico per la gravità della malattia nei pazienti anziani con COVID-19

Introduzione Nel dicembre 2019 un gruppo di casi di polmonite virale a Wuhan, una città nella provincia cinese di Hubei, ha portato alla scoperta di un nuovo agente patogeno che è stato successivamente denominato Sindrome respiratoria acuta grave Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) (1) . SARS-CoV-2 si è diffuso rapidamente in tutta la popolazione della Cina e successivamente in tutti i continenti del mondo (ad eccezione dell'Antartide). L'11 marzo 2020 l'epidemia è stata dichiarata pandemia dall'Organizzazione mondiale della sanità (OMS) (2). A settembre sono stati segnalati casi confermati da 217 paesi diversi e hanno provocato oltre 27 milioni di individui infetti e quasi 900.000 casi mortali segnalati all'OMS (3, 4). SARS-CoV-2 non discrimina tra stato sociale, età o etnia e fino ad ora un trattamento efficace rimane assente. Tuttavia, i fattori di rischio associati alla gravità della progressione della malattia sono stati identificati e comprendono l'età avanzata (>65 anni), comorbidità con inclusione di ipertensione arteriosa, malattie cardiovascolari, malattie cerebrovascolari, malattie respiratorie e parametri di laboratorio come basse cellule T CD3+CD8+ (< 75 celle.μL-1), bassa conta linfocitaria, rapporto neutrofili/linfociti (N/L) (rapporto N/L >3,13) e aumento della troponina cardiaca I (≥0,05 ng.mL-1) (5-9).

È stato dimostrato che sia l'età che la linfopenia sono fattori di rischio associati alla gravità della progressione della malattia nei pazienti COVID-19. Un basso numero di linfociti, tuttavia, è anche noto per essere associato all'aumento dell'età in individui sani (10). Un altro studio ha anche dimostrato che un'elevata PCR era associata a linfopenia in una popolazione ospedalizzata geriatrica prima della comparsa di COVID-19 (11). Questa osservazione solleva la questione se la linfopenia sia o meno un marcatore prognostico specifico per la malattia COVID-19 nei pazienti anziani.

Gli obiettivi di questo studio sono:

1. valutare la specificità della linfopenia nei casi di COVID-19 negli anziani grazie al confronto di 3 Gruppi:

   1. Il gruppo 1 è costituito da casi di COVID-19
   2. Il gruppo 2 è costituito da pazienti con un'infezione acuta diversa da COVID-19
   3. Il gruppo 3 è costituito da persone anziane sane definite come nel protocollo SENIEUR modificato
2. valutare la correlazione della linfopenia nei casi di COVID-19 e l'esito
3. valutare la relazione tra altre morbilità (come malattie cardiovascolari/fattori di rischio) e linfopenia negli anziani.

Pazienti e metodi

Pazienti:

Per valutare l'esito della linfopenia nelle infezioni da COVID-19 nei pazienti anziani, saranno studiati tre gruppi:

Il gruppo 1 sarà composto da 100 pazienti positivi al COVID-19 di età superiore ai 70 anni ricoverati in UZ Brussel da febbraio 2020 a settembre 2020 con un test RT-PCR positivo per SARS-CoV-2.

Il gruppo 2 sarà composto da 100 pazienti di età superiore ai 70 anni ricoverati in UZ Brussel per infezioni acute diverse da COVID-19. Per evitare di includere pazienti falsi negativi, questi pazienti saranno selezionati da gennaio 2019 a dicembre 2019, prima che i primi casi di COVID-19 fossero documentati in Belgio. Un'infezione acuta diversa da COVID-19 sarà definita come 1) infezione virale confermata da tampone rinofaringeo per: influenza, RSV, parainfluenza, rinovirus, coronavirus o 2) infezione batterica confermata con emocoltura positiva, puntura articolare positiva, espettorazioni positive, polmonite alla radiografia del torace, o infezione documentata da immagini addominali (TC o eco), un'urinocoltura positiva con una pielonefrite confermata con un'ecografia renale o una scintigrafia con DMSA o sintomi clinici specifici per pielonefrite ed emocoltura positiva. Un'urinocoltura positiva da sola non è considerata un'infezione delle urine a causa dell'elevata prevalenza di batteriuria asintomatica nei pazienti geriatrici.

Per valutare l'influenza delle comorbilità sulla linfopenia negli anziani, i Gruppi 1 e 2 saranno confrontati con un gruppo storico ben definito (Gruppo 3):

Il gruppo 3 sarà composto da persone anziane sane definite come nel protocollo SENIEUR modificato (12, 13). Questo gruppo viene reclutato da uno studio condotto in precedenza. Si tratta di individui residenti in comunità di età superiore ai 70 anni e considerati quasi sani con alcune condizioni presenti nella maggior parte degli anziani come l'osteoporosi, l'osteoartrosi o l'aterosclerosi.

Criteri di inclusione Cfr. definizione dei tre gruppi Criteri di esclusione I pazienti sottoposti a terapia immunosoppressiva, i pazienti con cancro attivo noto o disturbi ematologici, i pazienti sottoposti a radio o chemioterapia o con malattie autoimmuni note non saranno inclusi poiché queste condizioni o terapie sottostanti possono interferire con i globuli bianchi conta cellulare in un modo che va oltre lo scopo di questa ricerca.

Metodi:

Determinazione delle caratteristiche cliniche Tutti i soggetti saranno valutati per malattie sottostanti mediante archivi medici e prelievo di sangue. La valutazione sociale includeva la determinazione dell'età, del sesso e della casa (privato contro istituto). I dati clinici includevano abitudine al fumo e all'alcol, indice di massa corporea (BMI), anamnesi, trattamento in corso e motivi del ricovero. Le malattie cardiovascolari (CV) sono definite come una storia di ictus, infarto miocardico, insufficienza cardiaca (valutata mediante ecografia cardiaca anteriore e sintomi clinici), malattia vascolare cerebrale o ateromatosi valutata mediante ecografia carotidea o leg Doppler e sintomi ischemici. I fattori di rischio CV saranno definiti dalla presenza nell'anamnesi di ipertensione arteriosa (AHT), diabete mellito di tipo 2 (DM 2), ipercolesterolemia o assunzione di statine, anamnesi di infarto o fumo.

Valutazione geriatrica completa Quando possibile, otterremo una valutazione geriatrica completa: le comorbilità e la gravità dei problemi medici sono state valutate utilizzando la "Cumulative Illness Rating Scale-Geriatric" (CIRS-G), che è uno strumento per quantificare il carico di malattia. Distingue gli anziani con il più alto rischio e la gravità dell'infezione con una risposta vaccinale marcatamente compromessa (14). Comprende una revisione completa dei problemi medici di 14 sistemi di organi. Si basa su una valutazione da 0 a 4 di ciascun sistema di organi (15). La "Geriatric Depression Scale" è stata utilizzata per valutare il rischio di depressione (GDS-15) in 15 domande (16). La valutazione delle "Attività della vita quotidiana" (ADL) è stata effettuata utilizzando la scala di Katz. Include i seguenti elementi: fare il bagno, vestirsi, trasferirsi, andare in bagno, continenza e mangiare. Ogni attività è valutata su una scala a 4 livelli (da 1 a 4 per la scala di Katz), dove i livelli inferiori rappresentano l'assenza di dipendenza ei livelli superiori la massima dipendenza per l'attività (17). Le funzioni cognitive sono state valutate utilizzando il "Mini Mental State Examination" (MMSE). I punteggi possibili vanno da 0 a 30 punti, con punteggi <24/30 che indicano una funzione cognitiva compromessa (18). Lo stato nutrizionale è stato valutato utilizzando il "Malnutrition Universal Screening Tool" (MUST) (19). La complessità sociale è stata definita dalla necessità di un intervento con un assistente sociale (necessità di assistenza domiciliare, casa di cura riabilitativa o aiuto finanziario). La somma della sindrome geriatrica include quanto segue: caduta, complessità sociale, delirio, denutrizione, dipendenza, depressione, disfagia, incontinenza, ipotensione ortostatica, prescrizione inappropriata e disfunzione cognitiva.

Parametri biologici Verranno raccolti i dati della valutazione biochimica di routine eseguita nelle prime 24 ore e dopo 3-5 giorni dopo il ricovero in un'unità geriatrica (conta totale e differenziale dei globuli bianchi, emoglobina ed ematocrito, funzionalità renale ed elettroliti CRP, albumina, prealbumina, vitamina B12 e livelli di acido folico).

Risultato:

Per valutare l'esito di pazienti con o senza linfopenia, il numero di riospedalizzazione, i ricoveri in un'unità di terapia intensiva, le complicanze come l'embolia polmonare, la durata della degenza ospedaliera, la mortalità, il luogo della dimissione e il punteggio di gravità della TAC del torace nei pazienti COVID-19+.

Procedure Questo è uno studio retrospettivo. Non verranno eseguiti interventi.

Diagramma di flusso

Analisi dello studio Analisi statistica IBM SPSS versione 25 sarà utilizzato per le analisi statistiche. Il test di Kolmogorov-Smirnov sarà utilizzato per determinare la normalità dei dati.

Verrà eseguito il test della somma dei ranghi di Mann Whitney per i dati non parametrici o un test T di Student per i dati parametrici per confrontare i pazienti con e senza linfopenia per COVID-19, altre infezioni, comorbidità, complicanze, valutazione geriatrica, durata del ricovero, riospedalizzazione, mortalità, luogo di dimissione.

Al fine di identificare i fattori clinici e biologici che potrebbero essere significativamente associati alla linfopenia, abbiamo eseguito analisi univariate (raffigurate dal coefficiente di Pearson). Per tutti i volontari, questi parametri comprendevano malattie cardiovascolari e fattori di rischio (fumo, ipertensione arteriosa, diabete di tipo 2, livelli di colesterolo, BMI), COVID-19, altre infezioni, comorbidità, complicanze, valutazione geriatrica, durata del ricovero, riospedalizzazione, mortalità, luogo di scarico.

Al fine di definire fattori predittivi indipendenti di linfopenia, abbiamo testato diversi modelli mediante analisi di regressione multilineare all'indietro graduale.