种植体周围炎患者的遗传变异分析

该研究将根据赫尔辛基宣言（2013 年审查）的原则进行。 将采取适当措施保护患者数据。 该研究于 2019 年 7 月 3 日获得 Egas Moniz 大学 (IUEM) 科学委员会的批准，并于 2019 年 7 月 24 日收到 Egas Moniz 伦理委员会的批准。 Egas Moniz Dental Clinic 的 Clinical Direction 也获得了授权，可以在大学的 Clinic 开展研究工作。

该研究将由两组组成，第一组由种植体周围炎患者组成（探诊时出血和/或化脓，探诊深度 (PD) 等于或大于 6 毫米，骨丢失等于或大于 3 毫米），第二组由患者组成（对照组）由种植体周围健康的患者组成（种植体周围粘膜没有炎症迹象且没有种植体周围骨丢失）。 种植体周围炎和种植体周围健康的定义将符合牙周和种植体周围疾病的新分类（美国牙周病学会（AAP）和欧洲牙周病联合会（EFP）2017）

种植体周围探诊检查（使用 CP12 刻度牙周探针的 6 个位置）以及菌斑积聚和牙龈指数（4 个位置）的评估将在种植体维护预约中照常进行。 还将评估探诊出血或脓液的存在。 如果探测深度超过 6 毫米，将拍摄种植体控制射线照片。 所有临床数据将由同一检查员收集。 在研究之前，将使用未包括在研究中的患者对 PD 测量进行培训和校准练习。

还将评估患者的牙周状况。 为考虑牙周健康，患者应具备以下临床特征：多达 10% 的位置探诊出血、无红斑和水肿、无患者症状、无临床附着丧失和骨质流失以及 PD < 3mm（AAP 和欧洲金融中心 2017 年）。 如果出现以下情况，则患者为牙周炎病例： 至少可检测到 2 颗非相邻牙齿的牙间临床附着丧失，或 至少可检测到 2 颗牙齿的颊侧或口腔临床附着丧失 > 3 毫米且袋状物 > 3 毫米。 牙周炎的分类将在多维分期和分级系统上进行。

在种植体周围健康状况的情况下，将采取牙菌斑控制措施，而在种植体周围炎的情况下，患者将被转诊进行特定的治疗预约。 如果患者的一颗以上种植体受到种植体周围炎的影响，则将选择骨质流失最严重的一颗进行研究。

遗传分析将在 IUEM 分子生物学实验室进行，采用 DNA 提取技术，然后进行聚合酶链反应，然后进行限制性片段长度多态性分析。

对于生化分析，纸条将插入种植体周围沟/袋中，直到感觉到阻力，等待 30 秒后再取出。 视觉污染的样品（血液）将被丢弃。 随后将纸条放置在 Periotron® 8000（Periotron Ide-interstate，NY，USA）上以量化收集的种植体周围缝隙液体积。 然后将纸条放入带有过滤器的 eppendorf 管中，并在 -80ºC 下冷冻，直到运送到马德里康普顿斯大学。 在这所大学，炎症介质 IL-1 β 和 TNF α 的浓度将使用 Luminex® 100/200™ 系统的多重荧光球免疫测定法和酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 的 PGE2 进行分析。

IL-1 基因组多态性在种植体周围炎患者和健康患者中的流行率将通过使用适当的推论统计方法（双变量分析/关联测试）进行比较，同时考虑几个社会人口学和临床变量：吸烟状况、性别、年龄和牙周炎病史。 基于中等效应大小 (w=0.3)， 在 80% 的功效和 5% 的 alpha 水平下，本研究的样本量计算为 n=88，因此，每组（种植体周围炎和种植体周围健康）n=44。 此外，将构建多变量回归 logistic 模型，以评估这些协变量的影响，并通过确定对应的调整后优势比 (OR) 来量化存在种植体周围炎的风险。 此外，将在种植体周围炎患者组和健康口腔种植体患者组之间比较种植体周围缝隙液中存在的炎症反应标志物 IL-1 β、PGE2 和 TNF-α 的水平，服用通过使用适当的推论统计方法（参数/非参数测试）考虑上述变量。 所有推论分析将在 5% 的显着性水平下进行。