Analyse genetischer Variationen bei Patienten mit Periimplantitis

Die Studie wird gemäß den Grundsätzen der Deklaration von Helsinki (überarbeitet 2013) durchgeführt. Es werden geeignete Maßnahmen zum Schutz der Patientendaten getroffen. Die Studie wurde am 3. Juli 2019 vom Wissenschaftlichen Rat des Instituto Universitário Egas Moniz (IUEM) genehmigt, und die Genehmigung der Ethikkommission von Egas Moniz ging am 24. Juli 2019 ein. Von der Klinischen Leitung der Zahnklinik Egas Moniz wurde auch die Genehmigung erhalten, Forschungsarbeiten an der Klinik der Universität durchzuführen.

Die Studie wird aus zwei Gruppen bestehen, die erste besteht aus Patienten mit Periimplantitis (Blutung und/oder Eiterung beim Sondieren, Sondierungstiefe (PD) gleich oder größer als 6 mm und Knochenverlust gleich oder größer als 3 mm) und die zweite Gruppe (Kontrollgruppe) bestehend aus Patienten mit periimplantärer Gesundheit (periimplantäre Mukosa ohne Entzündungszeichen und kein periimplantärer Knochenverlust). Die Definition von Periimplantitis und periimplantärer Gesundheit entspricht der neuen Klassifikation parodontaler und periimplantärer Erkrankungen (American Academy of Periodontology (AAP) und European Federation of Periodontology (EFP) 2017).

Eine periimplantäre Sondierungsuntersuchung (6 Stellen mit einer graduierten CP12-Parodontalsonde) und eine Bewertung der Plaqueanhäufung und Gingivaindizes (4 Stellen) werden wie üblich bei Implantatwartungsterminen durchgeführt. Das Vorhandensein von Blutungen bei der Sondierung oder Eiter wird ebenfalls bewertet. Bei einer Sondierungstiefe von mehr als 6 mm wird eine Implantatkontrollröntgenaufnahme angefertigt. Alle klinischen Daten werden von demselben Untersucher erhoben. Vor der Studie wird eine Trainings- und Kalibrierungsübung für PD-Messungen mit Patienten durchgeführt, die nicht in die Studie aufgenommen wurden.

Der parodontale Zustand der Patienten wird ebenfalls bewertet. Um die parodontale Gesundheit zu berücksichtigen, sollten die Patienten die folgenden klinischen Merkmale aufweisen: bis zu 10 % der Stellen mit Blutungen bei der Sondierung, kein Erythem und Ödem, keine Patientensymptome, kein klinischer Attachmentverlust und Knochenverlust und PD < 3 mm (AAP und EFP 2017). Ein Patient ist ein Parodontitis-Fall, wenn: interdentaler klinischer Attachmentverlust an mindestens 2 nicht benachbarten Zähnen nachweisbar ist oder bukkaler oder oraler klinischer Attachmentverlust > 3 mm mit Taschenbildung > 3 mm an mindestens 2 Zähnen nachweisbar ist. Die Klassifikation der Parodontitis erfolgt nach einem mehrdimensionalen Staging- und Grading-System.

Bei einer periimplantären Gesundheitssituation werden Maßnahmen zur Plaquekontrolle ergriffen, während bei Periimplantitis der Patient zu einem bestimmten Behandlungstermin überwiesen wird. Bei Patienten mit mehr als einem Implantat, das von Periimplantitis betroffen ist, wird dasjenige mit dem größten Knochenverlust für die Studie ausgewählt.

Die genetische Analyse wird im IUEM-Labor für Molekularbiologie mit der DNA-Extraktionstechnik durchgeführt, gefolgt von einer Polymerase-Kettenreaktion, gefolgt von Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus.

Für die biochemische Analyse werden die Papierstreifen in den periimplantären Sulkus/die Tasche eingeführt, bis ein Widerstand zu spüren ist, und 30 Sekunden gewartet, bevor sie entfernt werden. Visuell kontaminierte Proben (Blut) werden verworfen. Anschließend werden Papierstreifen auf Periotron® 8000 (Periotron Ide-interstate, NY, USA) gelegt, um das gesammelte periimplantäre Taschenflüssigkeitsvolumen zu quantifizieren. Die Papierstreifen werden dann in Eppendorf-Röhrchen mit Filter gegeben und bis zum Versand an die Universidad Complutense de Madrid bei -80 °C eingefroren. An dieser Universität wird die Konzentration der Entzündungsmediatoren IL-1 beta und TNF alpha mittels Multiplex-Fluoreszenz-Sphären-Immunoassays mit dem Luminex® 100/200™-System und PGE2 mittels Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) analysiert.

Die Prävalenz von Polymorphismen der IL-1-Gengruppe bei Patienten mit Periimplantitis und gesunden Patienten wird unter Verwendung geeigneter Methoden der Inferenzstatistik (bivariate Analyse/Assoziationstests) unter Berücksichtigung mehrerer soziodemografischer und klinischer Variablen verglichen: Raucherstatus, Geschlecht, Alter und Geschichte der Parodontitis. Basierend auf einer mittleren Effektgröße (w = 0,3), Bei einer Power von 80 % und einem Alpha-Level von 5 % wurde die Stichprobengröße für diese Studie mit n = 88 berechnet, also n = 44 für jede Gruppe (Periimplantitis und periimplantäre Gesundheit). Darüber hinaus wird ein multivariables logistisches Regressionsmodell konstruiert, um die Wirkung dieser Kovariablen zu bewerten und das Risiko für das Vorliegen einer Periimplantitis durch Bestimmung des entsprechenden adjustierten Odds Ratio (OR) zu quantifizieren. Zusätzlich werden die Spiegel der Entzündungsreaktionsmarker IL-1 beta, PGE2 und TNF-alpha, die in der periimplantären Taschenflüssigkeit vorhanden sind, zwischen der Gruppe der Patienten mit Periimplantitis und den Patienten mit gesunden oralen Implantaten verglichen Berücksichtigen Sie die oben genannten Variablen, indem Sie geeignete Methoden der Inferenzstatistik verwenden (parametrische/nicht parametrische Tests). Alle Inferenzanalysen werden auf einem Signifikanzniveau von 5 % durchgeführt.